摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第10-20页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) | 第10-13页 |
1.1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分类 | 第10-11页 |
1.1.2 PRRSV病毒的分子生物学特性 | 第11-13页 |
1.2 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)及其流行病学调查 | 第13-14页 |
1.3 PRRSV的流行病学调查 | 第14-17页 |
1.3.1 国外PRRSV流行病学调查及分子生物学特征 | 第14-15页 |
1.3.2 国内PRRSV流行病学现状及毒株的分子生物学特征 | 第15-17页 |
1.4 PRRSV抗体及病原诊断方法研究进展 | 第17-20页 |
1.4.1 PRRSV的血清学诊断 | 第17-18页 |
1.4.2 PRRSV的病原诊断 | 第18-19页 |
1.4.3 比较与讨论 | 第19-20页 |
第二章 ANTI-M-MAB单克隆抗体的纯化与鉴定 | 第20-30页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 杂交瘤细胞 | 第20页 |
2.1.2 主要仪器 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 杂交瘤细胞培养上清的纯化 | 第22-24页 |
2.2.2 单克隆抗体Anti-M-Mab的亚型鉴定 | 第24页 |
2.2.3 杂交瘤细胞中RNA的提取及测序 | 第24-25页 |
2.3 结果 | 第25-28页 |
2.3.1 单克隆抗体亚型鉴定 | 第25页 |
2.3.2 SDS-PAGE检测纯化后的抗体的纯度 | 第25-26页 |
2.3.3 纯化抗体的浓度测定 | 第26页 |
2.3.4 RNA提取及测序结果 | 第26-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
第三章 ANTI-M-MAB单克隆抗体对不同PRRSV毒株的反应性检测 | 第30-36页 |
3.1 材料 | 第30-31页 |
3.1.1 病毒与细胞 | 第30页 |
3.1.2 主要设备和仪器 | 第30页 |
3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
3.1.4 主要试剂的配制 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-32页 |
3.2.1 Mac145细胞的培养 | 第31页 |
3.2.2 PRRSV增殖与病毒滴度测定 | 第31-32页 |
3.2.3 用间接免疫荧光(IFA)的方法检测Anti-M-Mab与不同毒株的反应性 | 第32页 |
3.2.4 用间接ELISA的方法检测Anti-M-Mab识别的抗原表位的性质 | 第32页 |
3.3 结果 | 第32-34页 |
3.3.1 M与PRRSV不同毒株的反应结果 | 第32-34页 |
3.3.2 Anti-M-Mab所识别的表位性质 | 第34页 |
3.4 讨论 | 第34-36页 |
第四章 双抗夹心ELISA检测方法的建立与优化 | 第36-45页 |
4.1 材料 | 第36-37页 |
4.1.1 主要设备与仪器 | 第36页 |
4.1.2 主要试剂 | 第36页 |
4.1.3 主要试剂与配置 | 第36-37页 |
4.2 实验方法 | 第37页 |
4.3 结果 | 第37-43页 |
4.3.1 双抗夹心ELISA条件摸索 | 第37-41页 |
4.3.2 双抗夹心ELISA检测PRRSV不同毒株 | 第41-42页 |
4.3.3 最低检出量的确定 | 第42-43页 |
4.4 讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
附录 | 第53-58页 |
缩略词 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |