| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 主要中英文缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-32页 |
| 1. 毛细管凝胶电泳技术的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2 QIAxcel毛细管凝胶电泳的原理 | 第13页 |
| 1.3 应用 | 第13-15页 |
| 1.3.1 细菌疾病诊断 | 第14页 |
| 1.3.2 病毒疾病诊断 | 第14页 |
| 1.3.3 遗传性疾病疾病诊断 | 第14-15页 |
| 1.3.4 植物遗传物质鉴定 | 第15页 |
| 1.3.5 其他 | 第15页 |
| 1.4 QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的优势与缺点 | 第15-17页 |
| 1.4.1 优势 | 第15-16页 |
| 1.4.2 缺点与不足 | 第16-17页 |
| 1.5 展望与小结 | 第17页 |
| 2. 液相芯片检测平台的研究进展 | 第17-26页 |
| 2.1 液相芯片的发展过程 | 第17-19页 |
| 2.2 液相芯片的原理简介 | 第19-21页 |
| 2.3 液相芯片的应用 | 第21-25页 |
| 2.3.1 生命科学领域 | 第21-23页 |
| 2.3.1.1 蛋白表达谱 | 第21-22页 |
| 2.3.1.2 基因组研究 | 第22-23页 |
| 2.3.2 病原核酸检测 | 第23-24页 |
| 2.3.3 遗传性及免疫性疾病诊断 | 第24-25页 |
| 2.3.4 其他领域 | 第25页 |
| 2.4 展望与小结 | 第25-26页 |
| 3. 本文研究病原概述 | 第26-31页 |
| 3.1 猪伪狂犬病 | 第26-27页 |
| 3.2 猪流行性乙型脑炎病 | 第27页 |
| 3.3 猪圆环2型病 | 第27-28页 |
| 3.4 猪瘟病 | 第28页 |
| 3.5 猪繁殖与呼吸综合征 | 第28-29页 |
| 3.6 猪细小病 | 第29-30页 |
| 3.7 非洲猪瘟病 | 第30-31页 |
| 4. 本文的目的与意义 | 第31-32页 |
| 第二章 多重PCR扩增方法的建立 | 第32-50页 |
| 1. 引言 | 第32页 |
| 2. 实验的主要材料 | 第32-34页 |
| 2.1 本章主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.3 样本来源 | 第34页 |
| 3 实验方法 | 第34-42页 |
| 3.1 引物设计 | 第34-36页 |
| 3.2 病毒核酸DNA/RNA的提取及c DNA的制备 | 第36-37页 |
| 3.2.1 DNA的提取 | 第36页 |
| 3.2.2 RNA的提取 | 第36-37页 |
| 3.2.3 c DNA的制备 | 第37页 |
| 3.3 重组质粒的构建 | 第37-40页 |
| 3.3.1 靶序列的扩增 | 第37页 |
| 3.3.2 靶序列的回收 | 第37-38页 |
| 3.3.3 连接 | 第38页 |
| 3.3.4 连接产物的转化 | 第38-39页 |
| 3.3.5 克隆载体的鉴定 | 第39页 |
| 3.3.6 重组质粒的提取 | 第39页 |
| 3.3.7 重组质粒的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.4 PCR扩增体系的建立 | 第40-42页 |
| 3.4.1 反应体条件的优化 | 第40-41页 |
| 3.4.2 单重PCR灵敏度的测定 | 第41页 |
| 3.4.3 特异性试验 | 第41-42页 |
| 4. 结果 | 第42-47页 |
| 4.1 靶基因及其质粒的鉴定 | 第42页 |
| 4.2 反应条件的优化结果 | 第42-44页 |
| 4.3 单重PCR灵敏度测定结果 | 第44-45页 |
| 4.4 特异性验证结果 | 第45-47页 |
| 5. 讨论 | 第47-48页 |
| 6. 本章小结 | 第48-50页 |
| 第三章 基于QIAxcel毛细管凝胶电泳系统7种猪病毒病检测方法的建立 | 第50-61页 |
| 1. 引言 | 第50页 |
| 2. 实验的主要材料 | 第50-51页 |
| 2.1 本章主要试剂与仪器 | 第50-51页 |
| 2.2 样本来源 | 第51页 |
| 3 实验方法 | 第51-52页 |
| 3.1 反应体系及程序 | 第51页 |
| 3.2 多重PCR反应条件的优化 | 第51页 |
| 3.3 QIAxcel毛细管凝胶电泳系统的基本操作 | 第51-52页 |
| 3.4 毛细管分析系统的特异性试验 | 第52页 |
| 3.5 毛细管分析系统灵敏度的测定 | 第52页 |
| 4 结果 | 第52-58页 |
| 4.1 反应条件优化结果 | 第52-56页 |
| 4.2 毛细管分析系统的特异性试验 | 第56-58页 |
| 4.3 毛细管分析系统灵敏度的测定 | 第58页 |
| 5. 讨论 | 第58-59页 |
| 6. 本章小结 | 第59-61页 |
| 第四章 基于Bio-Plex液相芯片系统7种猪病毒病检测方法的构建 | 第61-78页 |
| 1. 引言 | 第61页 |
| 2. 实验的主要材料 | 第61-62页 |
| 2.1 样本来源 | 第61页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第61-62页 |
| 3. 方法 | 第62-68页 |
| 3.1 引物和探针的设计 | 第62-63页 |
| 3.2 Bio-Plex 200~(TM)的校正和验证 | 第63-64页 |
| 3.3 探针与微球的共价偶联 | 第64-65页 |
| 3.4 偶联探针的验证 | 第65-66页 |
| 3.5 杂交反应体系的优化和建立 | 第66-67页 |
| 3.6 杂交结果的判定标准 | 第67页 |
| 3.7 Bio-Plex液相芯片多重检测技术灵敏度试验 | 第67页 |
| 3.8 Bio-Plex液相芯片多重检测技术特异性试验 | 第67页 |
| 3.9 Bio-Plex液相芯片多重检测技术重复性试验 | 第67-68页 |
| 4. 结果 | 第68-76页 |
| 4.1 偶联微球的计数 | 第68页 |
| 4.2 Bio-Plex杂交探针偶联结果 | 第68-71页 |
| 4.3 Bio-Plex杂交体系的建立 | 第71-73页 |
| 4.4 Bio-Plex检测平台灵敏度试验结果 | 第73-74页 |
| 4.5 Bio-Plex检测平台交叉反应及特异性试验结果 | 第74-75页 |
| 4.6 Bio-Plex检测平台重复性性验结果 | 第75-76页 |
| 5. 讨论与分析 | 第76-77页 |
| 6. 本章小结 | 第77-78页 |
| 第五章 PCR-QIAxcel与PCR-Bio-Plex的临床应用 | 第78-84页 |
| 1. 引言 | 第78页 |
| 2. 实验的主要材料 | 第78-79页 |
| 2.1 样本来源 | 第78-79页 |
| 2.2 主要仪器 | 第79页 |
| 3. 实验方法 | 第79-80页 |
| 3.1 样本核酸提提取 | 第79页 |
| 3.2 两种检测方法 | 第79-80页 |
| 4. 实验结果 | 第80-81页 |
| 5. 讨论 | 第81-82页 |
| 6. 本章小结 | 第82-84页 |
| 全文总结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附录1 | 第93-94页 |
| 附录2 | 第94-98页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第98页 |
