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长链非编码RNA lnc594调控山羊骨骼肌卫星细胞增殖、分化的作用及机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
符号说明第9-12页
1 前言第12-22页
    1.1 骨骼肌生长发育概述第12-16页
        1.1.1 骨骼肌的发生第12-13页
        1.1.2 骨骼肌发育相关的重要调控因了第13-15页
        1.1.3 骨骼肌发育相关的信号通路第15-16页
    1.2 IncRNA的研究进展第16-18页
        1.2.1 LnCRNA的概述第16页
        1.2.2 InCRNA的生物学功能第16-17页
        1.2.3 IncRNA与肌肉发育第17-18页
    1.3 miRNA与肌肉发育第18-20页
    1.4 miR-133的研究进展第20-21页
    1.5 木研究的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-39页
    2.1 试验材料第22-26页
        2.1.1 试验动物及组织第22页
        2.1.2 细胞、载体第22-23页
        2.1.3 主要溶液及培养基的配制第23-24页
        2.1.4 生物信息学分析第24-26页
    2.2 试验方法第26-39页
        2.2.1 PCR引物设计第26-27页
        2.2.2 组织和细胞RNA的提取第27-29页
        2.2.3 常规PCR和RT-qPCR第29-30页
        2.2.4 质粒DNA的提取第30-31页
        2.2.5 Western Blot第31页
        2.2.6 SMSCs体外培养第31-33页
        2.2.7 重组质粒构建第33-35页
        2.2.8 瞬时转染第35-36页
        2.2.9 双荧光素酶活性检测第36-37页
        2.2.10 SMSCs的增殖试验第37页
        2.2.11 荧光原位杂交(FISH)第37-39页
3 结果与分析第39-55页
    3.1 山羊lnc_594的生物信息学分析第39-40页
    3.2 山羊lnc_594的组织表达谱分析第40-41页
    3.3 lnc_594和miR-133a-3p的结合位点验证第41-43页
        3.3.1 lnc_594的miRNA结合位点预测第42页
        3.3.2 lnc_594与结合位点的识别第42-43页
    3.4 lnc_594和miR-133a-3p在SMSCs中的共定位第43-45页
    3.5 山羊lnc_594、miR-133a-3p及其靶基因FGFR1表达模式第45-49页
        3.5.1 miR-133a-3p及其靶基因FGFR1的组织表达模式第45-46页
        3.5.2 SMSCs分化模型的构建第46-47页
        3.5.3 lnc_594、miR-133a-3p和FGFR1在细胞水平的差异表达第47-48页
        3.5.4 FGFR1的蛋白表达谱第48-49页
    3.6 lnc_594对SMSCs分化的影响第49-52页
        3.6.1 过表达lnc_594对SMSCs分化的影响第49-51页
        3.6.2 抑制lnc_594对SMSCs分化的影响第51-52页
    3.7 lnc_594对SMSCs增殖的影响第52-53页
    3.8 miR-133a-3p的过表达验证第53-55页
        3.8.1 miR-133a-3p转染效率的检测第53-54页
        3.8.2 miR-133a-3p对lnc_594和FGFR1表达量的影响第54-55页
4 讨论第55-60页
    4.1 lnc_594的生物信息学分析第55页
    4.2 lnc_594和miR-133a-3p的位点验证及共定位第55-56页
    4.3 lnc_594、miR-133a-3p、FGFR1在组织和细胞水平的表达规律第56-57页
    4.4 miR-133a-3p对SMSCs的调控第57-58页
    4.5 lnc_594和miR-133a-3p的相互作用第58-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-69页
攻读学位期间发表的学术论文目录第69-70页
致谢第70页

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