摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号说明 | 第9-12页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 骨骼肌生长发育概述 | 第12-16页 |
1.1.1 骨骼肌的发生 | 第12-13页 |
1.1.2 骨骼肌发育相关的重要调控因了 | 第13-15页 |
1.1.3 骨骼肌发育相关的信号通路 | 第15-16页 |
1.2 IncRNA的研究进展 | 第16-18页 |
1.2.1 LnCRNA的概述 | 第16页 |
1.2.2 InCRNA的生物学功能 | 第16-17页 |
1.2.3 IncRNA与肌肉发育 | 第17-18页 |
1.3 miRNA与肌肉发育 | 第18-20页 |
1.4 miR-133的研究进展 | 第20-21页 |
1.5 木研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-39页 |
2.1 试验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 试验动物及组织 | 第22页 |
2.1.2 细胞、载体 | 第22-23页 |
2.1.3 主要溶液及培养基的配制 | 第23-24页 |
2.1.4 生物信息学分析 | 第24-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-39页 |
2.2.1 PCR引物设计 | 第26-27页 |
2.2.2 组织和细胞RNA的提取 | 第27-29页 |
2.2.3 常规PCR和RT-qPCR | 第29-30页 |
2.2.4 质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
2.2.5 Western Blot | 第31页 |
2.2.6 SMSCs体外培养 | 第31-33页 |
2.2.7 重组质粒构建 | 第33-35页 |
2.2.8 瞬时转染 | 第35-36页 |
2.2.9 双荧光素酶活性检测 | 第36-37页 |
2.2.10 SMSCs的增殖试验 | 第37页 |
2.2.11 荧光原位杂交(FISH) | 第37-39页 |
3 结果与分析 | 第39-55页 |
3.1 山羊lnc_594的生物信息学分析 | 第39-40页 |
3.2 山羊lnc_594的组织表达谱分析 | 第40-41页 |
3.3 lnc_594和miR-133a-3p的结合位点验证 | 第41-43页 |
3.3.1 lnc_594的miRNA结合位点预测 | 第42页 |
3.3.2 lnc_594与结合位点的识别 | 第42-43页 |
3.4 lnc_594和miR-133a-3p在SMSCs中的共定位 | 第43-45页 |
3.5 山羊lnc_594、miR-133a-3p及其靶基因FGFR1表达模式 | 第45-49页 |
3.5.1 miR-133a-3p及其靶基因FGFR1的组织表达模式 | 第45-46页 |
3.5.2 SMSCs分化模型的构建 | 第46-47页 |
3.5.3 lnc_594、miR-133a-3p和FGFR1在细胞水平的差异表达 | 第47-48页 |
3.5.4 FGFR1的蛋白表达谱 | 第48-49页 |
3.6 lnc_594对SMSCs分化的影响 | 第49-52页 |
3.6.1 过表达lnc_594对SMSCs分化的影响 | 第49-51页 |
3.6.2 抑制lnc_594对SMSCs分化的影响 | 第51-52页 |
3.7 lnc_594对SMSCs增殖的影响 | 第52-53页 |
3.8 miR-133a-3p的过表达验证 | 第53-55页 |
3.8.1 miR-133a-3p转染效率的检测 | 第53-54页 |
3.8.2 miR-133a-3p对lnc_594和FGFR1表达量的影响 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-60页 |
4.1 lnc_594的生物信息学分析 | 第55页 |
4.2 lnc_594和miR-133a-3p的位点验证及共定位 | 第55-56页 |
4.3 lnc_594、miR-133a-3p、FGFR1在组织和细胞水平的表达规律 | 第56-57页 |
4.4 miR-133a-3p对SMSCs的调控 | 第57-58页 |
4.5 lnc_594和miR-133a-3p的相互作用 | 第58-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |