| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 WRKY转录因子概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 WRKY转录因子的结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 WRKY转录因子的分类 | 第11页 |
| 1.2 WRKY转录因子的研究进展及生物学功能 | 第11-17页 |
| 1.2.1 参与植物非生物胁迫 | 第12-13页 |
| 1.2.2 参与植物生物胁迫 | 第13-14页 |
| 1.2.3 参与植株生长发育过程 | 第14-15页 |
| 1.2.4 参与植物信号网络调控及物质代谢过程 | 第15-17页 |
| 1.3 苹果在盐/病菌胁迫下的研究概况 | 第17-18页 |
| 1.3.1 苹果盐胁迫 | 第17页 |
| 1.3.2 苹果斑点落叶病 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料方法 | 第19-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 培养基的配置 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-32页 |
| 2.2.1 植物核酸的提取与cDNA的获得 | 第20-21页 |
| 2.2.2 MdWRKY33基因的克隆 | 第21-24页 |
| 2.2.3 MdWRKY33基因的组织特异性表达 | 第24页 |
| 2.2.4 亚细胞定位 | 第24-26页 |
| 2.2.5 MdWRKY33基因过表达载体的构建 | 第26页 |
| 2.2.6 MdWRKY33基因沉默载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.7 农杆菌介导法转化苹果‘GL-3’组培苗 | 第28-29页 |
| 2.2.8 转基因植株的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.9 转基因植株的胁迫处理(NaCl、SA) | 第30-31页 |
| 2.2.10 转基因植株的抗病性检测 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-52页 |
| 3.1 苹果MdWRKY33基因的克隆与分析 | 第32-35页 |
| 3.1.1 苹果MdWRKY33基因CDS序列的克隆与分析 | 第32-34页 |
| 3.1.2 MdWRKY33的进化关系 | 第34-35页 |
| 3.2 MdWRKY33的组织特异性表达 | 第35-36页 |
| 3.3 MdWRKY33的亚细胞定位 | 第36-39页 |
| 3.3.1 MdWRKY33-GFP载体的构建 | 第36-38页 |
| 3.3.2 激光共聚焦显微镜下的亚细胞定位 | 第38-39页 |
| 3.4 苹果MdWRKY33基因的遗传转化分析 | 第39-47页 |
| 3.4.1 苹果MdWRKY33基因过表达载体构建及转化农杆菌 | 第39-40页 |
| 3.4.2 苹果MdWRKY33基因沉默载体构建及转化农杆菌 | 第40-44页 |
| 3.4.3 苹果的遗传转化 | 第44-45页 |
| 3.4.4 转基因植株的鉴定 | 第45-47页 |
| 3.5 MdWRKY33在苹果中的功能验证 | 第47-52页 |
| 3.5.1 盐胁迫 | 第47-48页 |
| 3.5.2 激素(SA)胁迫 | 第48-49页 |
| 3.5.3 斑点落叶病胁迫 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 4.1 MdWRKY33基因的克隆与分析 | 第52页 |
| 4.2 MdWRKY33的生物学功能 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
