| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1.1 Flagellin概述 | 第14-18页 |
| 1.1.1 Flagellin的蛋白结构 | 第14-15页 |
| 1.1.2 Flagellin介导的信号通路 | 第15-18页 |
| 1.2 Flagellin-TLR5信号通路与疾病发生 | 第18-29页 |
| 1.2.1 Flagellin-TLR5信号通路与炎性肠病 | 第18-23页 |
| 1.2.2 Flagellin-TLR5信号通路与肿瘤免疫 | 第23-26页 |
| 1.2.3 Flagellin-TLR5信号通路与代谢相关疾病 | 第26-27页 |
| 1.2.4 Flagellin-TLR5信号通路与肝脏炎症 | 第27-28页 |
| 1.2.5 Flagellin-TLR5信号通路与移植物抗宿主病 | 第28-29页 |
| 1.2.6 Flagellin-TLR5信号通路与其他疾病 | 第29页 |
| 1.3 本课题的研究意义 | 第29-31页 |
| 第二章 重组鞭毛蛋白CBLB502的中试制备和质量研究 | 第31-82页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-37页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.1.2 试验材料 | 第32-34页 |
| 2.1.3 常用培养基的配制 | 第34-35页 |
| 2.1.4 常用溶液的配制 | 第35-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 2.2.1 重组鞭毛蛋白中试发酵工艺 | 第37页 |
| 2.2.2 重组鞭毛蛋白中试纯化工艺 | 第37-39页 |
| 2.2.3 重组鞭毛蛋白原液质量标准 | 第39-42页 |
| 2.3 实验结果 | 第42-74页 |
| 2.3.1 重组鞭毛蛋白工程菌中试发酵试验结果 | 第42页 |
| 2.3.2 重组鞭毛蛋白中试纯化试验结果 | 第42-47页 |
| 2.3.3 重组鞭毛蛋白原液质量控制结果 | 第47-74页 |
| 2.4 讨论 | 第74-82页 |
| 第三章 CBLB502蛋白免疫原性及药代动力学检测用抗体的制备 | 第82-97页 |
| 3.1 实验材料 | 第82-83页 |
| 3.1.1 主要实验仪器 | 第82页 |
| 3.1.2 实验试剂与动物 | 第82-83页 |
| 3.2 实验方法 | 第83-88页 |
| 3.2.1 CBLB502中和性抗体检测用ELISA试剂盒的制备 | 第83-85页 |
| 3.2.2 临床研究受试者血清抗体检测入选标准 | 第85页 |
| 3.2.3 重组鞭毛蛋白CBLB502临床药代动力学用特异性抗体的制备 | 第85-88页 |
| 3.3 实验结果 | 第88-94页 |
| 3.3.0 食蟹猴血清反应性检测 | 第88-89页 |
| 3.3.1 食蟹猴阳性血清抗体纯化 | 第89-90页 |
| 3.3.2 血清纯化抗体的ELISA检测 | 第90页 |
| 3.3.3 正常人血清样本CBLB502中和性抗体的检测 | 第90-91页 |
| 3.3.4 CBLB502特异性单克隆抗体免疫原的设计 | 第91页 |
| 3.3.5 BALB/c小鼠血清反应性检测 | 第91-92页 |
| 3.3.6 阳性杂交瘤细胞的初筛 | 第92-93页 |
| 3.3.7 阳性杂交瘤细胞的复筛 | 第93-94页 |
| 3.4 讨论 | 第94-97页 |
| 第四章 重组鞭毛蛋白CBLB502对免疫性肝损伤的防护作用 | 第97-139页 |
| 4.1 实验材料 | 第97-100页 |
| 4.1.1 主要实验仪器 | 第97-98页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第98-99页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第99-100页 |
| 4.2 实验方法 | 第100-104页 |
| 4.2.1 急性肝损伤模型构建 | 第100页 |
| 4.2.2 肝功能分析 | 第100页 |
| 4.2.3 肝脏组织H&E染色 | 第100页 |
| 4.2.4 肝组织Tunnel染色 | 第100页 |
| 4.2.5 Real-timePCR检测小鼠肝脏中趋化因子mRNA表达 | 第100-101页 |
| 4.2.6 Westernblot检测 | 第101-102页 |
| 4.2.7 Casepase3/8/9活性检测 | 第102页 |
| 4.2.8 血清Th1/Th2/Th17型细胞因子检测 | 第102-103页 |
| 4.2.9 肝脏单个核细胞的分离 | 第103页 |
| 4.2.10 流式细胞术检测 | 第103-104页 |
| 4.2.11 NK、NKT细胞体内清除 | 第104页 |
| 4.2.12 骨髓嵌合小鼠的制备 | 第104页 |
| 4.2.13 统计学分析 | 第104页 |
| 4.3 实验结果 | 第104-133页 |
| 4.3.0 ConA诱导急性肝损伤产生 | 第104-105页 |
| 4.3.1 CBLB502抑制ConA介导肝损伤的时效、量效关系 | 第105-106页 |
| 4.3.2 CBLB502对致死剂量ConA注射后小鼠存活率的影响 | 第106-107页 |
| 4.3.3 CBLB502抑制ConA诱导的肝脏炎性损伤 | 第107-110页 |
| 4.3.4 CBLB502抑制ConA诱导的肝内炎性免疫细胞浸润与活化 | 第110-113页 |
| 4.3.5 CBLB502抑制ConA诱导的炎性细胞因子表达上调 | 第113-117页 |
| 4.3.6 CBLB502抑制T、NKT细胞产生IL-4、TNF-α和IFN-γ | 第117-121页 |
| 4.3.7 CBLB502抑制α-Galcer诱导的肝损伤 | 第121-124页 |
| 4.3.8 CBLB502的肝保护效应与其诱导的IL-6存在关联 | 第124-126页 |
| 4.3.9 CBLB502通过抑制IL-4介导抗损伤效应 | 第126-128页 |
| 4.3.10 CBLB502的肝保护效应依赖于骨髓来源免疫细胞TLR5信号通路 | 第128-133页 |
| 4.4 讨论 | 第133-139页 |
| 第五章 Tlr5基因缺失小鼠对ConA诱导肝损伤的敏感性增强 | 第139-152页 |
| 5.1 实验材料 | 第139-141页 |
| 5.1.1 主要实验仪器 | 第139-140页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第140-141页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第141页 |
| 5.2 实验方法 | 第141-143页 |
| 5.2.1 TLR5~(-/-)小鼠的鉴定 | 第141-142页 |
| 5.2.2 外周淋巴细胞计数 | 第142页 |
| 5.2.3 急性肝损伤模型建立 | 第142页 |
| 5.2.4 肝功能分析 | 第142-143页 |
| 5.2.5 肝脏组织H&E染色 | 第143页 |
| 5.2.6 流式细胞染色分析 | 第143页 |
| 5.2.7 统计学分析 | 第143页 |
| 5.3 实验结果 | 第143-149页 |
| 5.3.1 TLR5~(-/-)小鼠基因型鉴定 | 第143-144页 |
| 5.3.2 TLR5~(-/-)小鼠外周血中性粒细胞增多 | 第144页 |
| 5.3.3 TLR5~(-/-)小鼠肠道微生物组成发生改变 | 第144-145页 |
| 5.3.4 TLR5~(-/-)小鼠肝脏免疫细胞浸润增加 | 第145页 |
| 5.3.5 TLR5~(-/-)小鼠对ConA诱导肝损伤的敏感性增强 | 第145-146页 |
| 5.3.6 TLR5~(-/-)小鼠炎性细胞因子分泌增加 | 第146-149页 |
| 5.4 讨论 | 第149-152页 |
| 第六章 结论与展望 | 第152-155页 |
| 6.1 研究总结 | 第152-153页 |
| 6.2 创新点 | 第153-154页 |
| 6.3 展望 | 第154-155页 |
| 参考文献 | 第155-168页 |
| 附录 | 第168-175页 |
| 发表论文和参加科研情况 | 第175-176页 |
| 致谢 | 第176-177页 |
