| 致谢 | 第6-13页 |
| 摘要 | 第13-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 缩略词表 | 第18-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-42页 |
| 1.1 神经退行性疾病研究进展 | 第20-28页 |
| 1.1.1 神经退行性疾病概述 | 第20-21页 |
| 1.1.2 神经退行性疾病发病机制 | 第21-25页 |
| 1.1.3 天然抗氧化剂与神经退行性疾病 | 第25-28页 |
| 1.2 Nrf2-ARE信号通路在神经退行性疾病中的作用研究进展 | 第28-33页 |
| 1.2.1 Nrf2-ARE信号通路概述 | 第28-30页 |
| 1.2.2 Nrf2-ARE信号通路与神经退行性疾病 | 第30-31页 |
| 1.2.3 天然抗氧化剂与Nrf2激活剂 | 第31-33页 |
| 1.3 苯乙醇苷类化合物研究进展 | 第33-35页 |
| 1.3.1 苯乙醇苷类化合物概述 | 第33-34页 |
| 1.3.2 苯乙醇苷类化合物生物活性 | 第34-35页 |
| 1.3.3 苯乙醇苷类化合物与神经退行性疾病 | 第35页 |
| 1.4 天然产物抗氧化活性的常见评价方法 | 第35-38页 |
| 1.4.1 化学分析法 | 第35-37页 |
| 1.4.2 细胞模型 | 第37-38页 |
| 1.4.3 动物模型 | 第38页 |
| 1.5 分子对接与药物筛选 | 第38-39页 |
| 1.6 研究背景及主要内容 | 第39-42页 |
| 1.6.1 研究背景和意义 | 第39-40页 |
| 1.6.2 研究主要内容 | 第40-41页 |
| 1.6.3 技术路线图 | 第41-42页 |
| 第二章 基于分子对接的天然抗氧化剂对Nrf2激活作用研究 | 第42-59页 |
| 2.1 引言 | 第42页 |
| 2.2 实验材料 | 第42-44页 |
| 2.2.1 生物学软件 | 第42-43页 |
| 2.2.2 细胞品系 | 第43页 |
| 2.2.3 试剂与耗材 | 第43-44页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第44页 |
| 2.3 实验方法 | 第44-48页 |
| 2.3.1 天然抗氧化剂的整理与配体分子的准备 | 第44-45页 |
| 2.3.2 天然抗氧化剂与Keap1蛋白分子对接 | 第45页 |
| 2.3.3 天然抗氧化剂与Keap1亲和力的3D-QSAR模型研究 | 第45页 |
| 2.3.4 细胞培养 | 第45-46页 |
| 2.4.5 细胞活力检测 | 第46页 |
| 2.3.6 细胞质蛋白与细胞核蛋白分离提取 | 第46页 |
| 2.3.7 蛋白质定量检测 | 第46-47页 |
| 2.3.8 Western blot | 第47-48页 |
| 2.3.9 数据分析 | 第48页 |
| 2.4 结果与分析 | 第48-58页 |
| 2.4.1 天然抗氧化剂与Keap1分子对接结果分析 | 第48-50页 |
| 2.4.2 天然抗氧化剂与Keap1分子对接影响因素分析 | 第50-52页 |
| 2.4.3 天然抗氧化剂与Keap1亲和力的3D-QSAR分析 | 第52-53页 |
| 2.4.4 天然抗氧化剂的细胞毒性分析 | 第53-55页 |
| 2.4.5 天然抗氧化剂对Nrf2的激活能力分析 | 第55-58页 |
| 2.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 第三章 苯乙醇苷对氧化应激损伤细胞的保护作用研究 | 第59-75页 |
| 3.1 引言 | 第59页 |
| 3.2 实验材料 | 第59-61页 |
| 3.2.1 细胞品系 | 第59页 |
| 3.2.2 试剂与耗材 | 第59-60页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第60-61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第61页 |
| 3.3.2 细胞活力测定 | 第61页 |
| 3.3.3 蛋白质定量检测 | 第61页 |
| 3.3.4 细胞内SOD、GSH-Px、CAT酶活力检测 | 第61-63页 |
| 3.3.5 细胞内MDA含量检测 | 第63页 |
| 3.3.6 细胞内ROS水平检测 | 第63-64页 |
| 3.3.7 细胞凋亡率检测 | 第64页 |
| 3.3.8 DAPI染色 | 第64-65页 |
| 3.3.9 数据分析 | 第65页 |
| 3.4 结果与分析 | 第65-74页 |
| 3.4.1 苯乙醇苷的细胞毒性分析 | 第65-66页 |
| 3.4.2 苯乙醇苷对氧化应激损伤细胞增殖率的影响 | 第66-67页 |
| 3.4.3 苯乙醇苷对氧化应激损伤细胞抗氧化酶活性的影响 | 第67-69页 |
| 3.4.4 苯乙醇苷对氧化应激损伤细胞ROS水平的影响 | 第69-70页 |
| 3.4.5 苯乙醇苷对氧化应激损伤细胞MDA含量的影响 | 第70-72页 |
| 3.4.6 苯乙醇苷对氧化应激损伤细胞凋亡率的影响 | 第72-74页 |
| 3.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 第四章 苯乙醇苷对氧化应激损伤细胞的保护作用机制研究 | 第75-95页 |
| 4.1 引言 | 第75页 |
| 4.2 实验材料 | 第75-77页 |
| 4.2.1 细胞品系 | 第75页 |
| 4.2.2 试剂与耗材 | 第75-76页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第76-77页 |
| 4.3 实验方法 | 第77-81页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第77页 |
| 4.3.2 免疫荧光检测 | 第77-78页 |
| 4.3.3 蛋白质提取方法 | 第78页 |
| 4.3.4 蛋白质定量检测 | 第78页 |
| 4.3.5 Western blot | 第78页 |
| 4.3.6 总RNA提取 | 第78-79页 |
| 4.3.7 反转录 | 第79页 |
| 4.3.8 RT-PCR | 第79-80页 |
| 4.3.9 抑制剂处理 | 第80页 |
| 4.3.10 siRNA转染 | 第80-81页 |
| 4.3.11 数据分析 | 第81页 |
| 4.4 结果与分析 | 第81-94页 |
| 4.4.1 苯乙醇苷对细胞内Nrf2分布的影响 | 第81-85页 |
| 4.4.2 苯乙醇苷对细胞保护作用中Nrf2效果确证 | 第85-87页 |
| 4.4.3 苯乙醇苷对Nrf2下游Ⅱ相解毒酶的影响 | 第87-90页 |
| 4.4.4 苯乙醇苷对细胞保护作用中Ⅱ相解毒酶HO-1效果确证 | 第90-91页 |
| 4.4.5 苯乙醇苷对Nrf2内源性蛋白抑制剂Keap1的影响 | 第91-92页 |
| 4.4.6 苯乙醇苷对Nrf2-ARE信号通路激活机制分析 | 第92-94页 |
| 4.5 本章小结 | 第94-95页 |
| 第五章 毛蕊花糖苷对6-OHDA诱导的PD斑马鱼的保护作用研究 | 第95-106页 |
| 5.1 引言 | 第95页 |
| 5.2 实验材料 | 第95-96页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第95页 |
| 5.2.2 试剂与耗材 | 第95-96页 |
| 5.2.3 主要仪器 | 第96页 |
| 5.3 实验方法 | 第96-99页 |
| 5.3.1 斑马鱼的饲养 | 第96-97页 |
| 5.3.2 配鱼与鱼卵收集 | 第97页 |
| 5.3.3 毛蕊花糖苷最大耐受剂量筛选 | 第97页 |
| 5.3.4 斑马鱼行为学检测 | 第97-98页 |
| 5.3.5 斑马鱼体内SOD、GSH-Px、CAT酶活力检测 | 第98页 |
| 5.3.6 斑马鱼体内MDA含量检测 | 第98页 |
| 5.3.7 酪氨酸羟化酶活性检测 | 第98-99页 |
| 5.3.8 数据分析 | 第99页 |
| 5.4 结果与分析 | 第99-105页 |
| 5.4.1 斑马鱼对毛蕊花糖苷的耐受剂量分析 | 第99-100页 |
| 5.4.2 毛蕊花糖苷对PD斑马鱼行为学的影响 | 第100-101页 |
| 5.4.3 毛蕊花糖苷对PD斑马鱼MDA含量的影响 | 第101-102页 |
| 5.4.4 毛蕊花糖苷对PD斑马鱼抗氧化酶活性的影响 | 第102-104页 |
| 5.4.5 毛蕊花糖苷对PD斑马鱼黑质多巴胺能神经元的影响 | 第104-105页 |
| 5.5 本章小结 | 第105-106页 |
| 第六章 毛蕊花糖苷对6-OHDA诱导的PD斑马鱼的保护作用机制研究 | 第106-119页 |
| 6.1 引言 | 第106页 |
| 6.2 实验材料 | 第106-108页 |
| 6.2.1 实验动物 | 第106-107页 |
| 6.2.2 试剂与耗材 | 第107页 |
| 6.2.3 主要仪器 | 第107-108页 |
| 6.3 实验方法 | 第108-110页 |
| 6.3.1 斑马鱼的饲养 | 第108页 |
| 6.3.2 配鱼与鱼卵收集 | 第108页 |
| 6.3.3 总RNA提取 | 第108页 |
| 6.3.4 反转录 | 第108页 |
| 6.3.5 RT-PCR | 第108-109页 |
| 6.3.6 斑马鱼幼鱼毛蕊花糖苷暴露处理 | 第109页 |
| 6.3.7 斑马鱼成鱼毛蕊花糖苷腹腔注射处理 | 第109-110页 |
| 6.3.8 UHPLC-PDA分析 | 第110页 |
| 6.3.9 伊文思蓝染色 | 第110页 |
| 6.3.10 数据分析 | 第110页 |
| 6.4 结果与分析 | 第110-118页 |
| 6.4.1 毛蕊花糖苷对NRF2基因转录的影响 | 第110-111页 |
| 6.4.2 毛蕊花糖苷对Nrf2下游Ⅱ相解毒酶基因转录的影响 | 第111-113页 |
| 6.4.3 毛蕊花糖苷对PD相关基因转录的影响 | 第113-115页 |
| 6.4.4 毛蕊花糖苷对血脑屏障透过性的研究 | 第115-117页 |
| 6.4.6 毛蕊花糖苷对已受损血脑屏障的影响 | 第117-118页 |
| 6.5 本章小结 | 第118-119页 |
| 第七章 全文总结、创新点及展望 | 第119-121页 |
| 7.1 全文总结 | 第119-120页 |
| 7.2 创新点 | 第120页 |
| 7.3 展望 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-141页 |
| 附录 | 第141-150页 |
| 个人简介 | 第150页 |
| 攻读博士期间主要科研成果 | 第150-152页 |
| 攻读博士期间获奖情况 | 第152页 |
