| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 1 引文和文献综述 | 第11-27页 |
| 1.1 心脏早期发育过程概述 | 第11-12页 |
| 1.2 斑马鱼心脏早期发育过程 | 第12-15页 |
| 1.3 心脏分化过程中的重要的调控因子 | 第15-20页 |
| 1.3.1 GATA | 第16-17页 |
| 1.3.2 Nkx2.5 | 第17页 |
| 1.3.3 BMP家族 | 第17-18页 |
| 1.3.4 Tbx基因家族 | 第18-19页 |
| 1.3.5 MADS框基因家族 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究相关基因概况 | 第20-25页 |
| 1.4.1 pitx2基因 | 第20-21页 |
| 1.4.2 klhl31基因 | 第21-22页 |
| 1.4.3 myl7基因 | 第22-23页 |
| 1.4.4 wntll基因 | 第23-25页 |
| 1.5 本文研究的意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-43页 |
| 2.1 材料 | 第27-30页 |
| 2.1.1 生物信息学软件 | 第27-28页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 菌株和载体 | 第29页 |
| 2.1.4 斑马鱼 | 第29-30页 |
| 2.1.5 主要实验仪器和耗材 | 第30页 |
| 2.2 方法 | 第30-43页 |
| 2.2.1 分子生物学实验方法 | 第30-36页 |
| 2.2.2 蛋白诱导纯化与抗体制备技术 | 第36-40页 |
| 2.2.3 多克隆抗体的效价检测技术 | 第40-42页 |
| 2.2.4 成体斑马鱼各组织蛋白的提取与检测 | 第42页 |
| 2.2.5 斑马鱼胚胎抗体染色 | 第42-43页 |
| 3 实验结果与分析 | 第43-68页 |
| 3.1 本文涉及的载体构建流程 | 第43页 |
| 3.2 斑马鱼心脏标记基因pitx2的多克隆抗体的制备 | 第43-49页 |
| 3.2.1 Pitx2基因片段的PCR扩增和重组质粒的构建 | 第44-46页 |
| 3.2.2 Pitx2融合蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
| 3.2.3 Pitx2融合蛋白的纯化 | 第47页 |
| 3.2.4 Pitx2多克隆抗体Western-blot鉴定和斑马鱼组织蛋白检测 | 第47-49页 |
| 3.2.5 斑马鱼胚胎抗体染色 | 第49页 |
| 3.3 斑马鱼心脏发育相关基因klhl31的多克隆抗体的制备 | 第49-54页 |
| 3.3.1 Klhl31基因片段的PCR扩增和重组质粒的构建 | 第49-52页 |
| 3.3.2 Klhl31融合蛋白的诱导表达 | 第52页 |
| 3.3.3 Klhl31融合蛋白的亲和纯化 | 第52-53页 |
| 3.3.4 Klhl31多克隆抗体Western-blot鉴定和斑马鱼组织蛋白检测 | 第53-54页 |
| 3.4 斑马鱼心脏标记基因myl7的多克隆抗体的制备 | 第54-61页 |
| 3.4.1 Myl7基因的PCR扩增和重组质粒的构建 | 第54-57页 |
| 3.4.2 Myl7的蛋白诱导表达 | 第57-58页 |
| 3.4.3 Myl7融合蛋白的亲和纯化 | 第58页 |
| 3.4.4 斑马鱼Myl7基因的多克隆抗体的效价检测 | 第58-59页 |
| 3.4.5 斑马鱼myl7基因多克隆鼠抗的制备 | 第59-61页 |
| 3.4.5.1 斑马鱼myl7基因的蛋白诱导和纯化 | 第59-60页 |
| 3.4.5.2 融合蛋白pGEX-4T-1-myl7免疫小鼠 | 第60-61页 |
| 3.4.5.3 利用制备的myl7鼠抗抗体进行胚胎抗体染色 | 第61页 |
| 3.5 斑马鱼心脏发育标记基因wntl1的多克隆抗体制备 | 第61-68页 |
| 3.5.1 Wntl1基因片段的PCR扩增和重组质粒的构建 | 第61-64页 |
| 3.5.2 wntl1融合蛋白的诱导表达 | 第64-65页 |
| 3.5.3 Wntl1融合蛋白的纯化 | 第65-66页 |
| 3.5.4 Wntl1多克隆抗体的效价检测 | 第66页 |
| 3.5.5 斑马鱼基因wntl1的探针制备构建的质粒 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 5 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 后记 | 第81-82页 |
