| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1 稻瘟病菌侵染循环及产孢、附着胞发育相关基因研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1 稻瘟病菌的侵染循环过程 | 第10-11页 |
| 1.2 稻瘟病菌产孢相关基因研究进展 | 第11页 |
| 1.3 稻瘟病菌附着孢发育相关基因研究进展 | 第11-12页 |
| 2 泛素-蛋白酶体系统 | 第12-14页 |
| 2.1 泛素 | 第12页 |
| 2.2 泛素化系统 | 第12-13页 |
| 2.3 26S蛋白酶体 | 第13-14页 |
| 3 泛素E3连接酶家族蛋白的分类与功能 | 第14-19页 |
| 3.1 泛素E3连接酶家族蛋白的分类 | 第14-17页 |
| 3.2 泛素E3连接酶家族蛋白的功能 | 第17-19页 |
| 4 稻瘟病菌泛素E3连接酶家族蛋白的研究意义 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-33页 |
| 1 实验菌株、质粒、试剂和培养基等材料 | 第21-22页 |
| 1.1 实验菌株 | 第21页 |
| 1.2 实验质粒 | 第21-22页 |
| 1.3 植物材料 | 第22页 |
| 1.4 培养基 | 第22页 |
| 1.5 生化试剂 | 第22页 |
| 2 实验方法 | 第22-33页 |
| 2.1 蛋白序列获得、分析及系统演化关系分析 | 第22-23页 |
| 2.1.1 稻瘟病菌E3连接酶家族蛋白的进化关系 | 第22-23页 |
| 2.1.2 蛋白结构域的分析 | 第23页 |
| 2.2 稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测 | 第23页 |
| 2.3 DNA琼脂糖电泳 | 第23-24页 |
| 2.4 PCR扩增目的片断 | 第24-25页 |
| 2.5 PCR产物的克隆 | 第25页 |
| 2.6 E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| 2.7 感受态细胞的转化 | 第26页 |
| 2.8 质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.9 质粒酶切与连接 | 第27页 |
| 2.10 E3 liagse基因敲除载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.11 稻瘟病菌原生质体的制备 | 第28页 |
| 2.12 稻瘟病菌原生质体转化 | 第28-29页 |
| 2.13 稻瘟病菌总RNA的提取和分析 | 第29-31页 |
| 2.14 稻瘟病菌敲除突变体的表型观察 | 第31-33页 |
| 2.14.1 稻瘟病菌的生长速度测定 | 第31页 |
| 2.14.2 产孢量测定 | 第31页 |
| 2.14.3 孢子萌发及附着胞形成实验 | 第31页 |
| 2.14.4 洋葱表皮内侵染结构的观察 | 第31-32页 |
| 2.14.5 致病性鉴定 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-50页 |
| 1 稻瘟病菌E3连接酶家族蛋白的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 1.1 稻瘟病菌E3连接酶家族蛋白序列分析 | 第33-34页 |
| 1.2 蛋白结构域的分析 | 第34页 |
| 2 同源重组获得敲除突变体 | 第34-40页 |
| 2.1 敲除载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.2 原生质体转化及突变体的筛选与验证 | 第35-38页 |
| 2.3 RT-PCR分析突变体中E3 liagse基因的表达 | 第38-40页 |
| 3 敲除突变体的表型分析 | 第40-50页 |
| 3.1 生长速度测定 | 第40-41页 |
| 3.2 产孢量测定 | 第41-42页 |
| 3.3 孢子萌发率、附着胞形成率及洋葱表皮侵入分析 | 第42-48页 |
| 3.4 致病性分析 | 第48-50页 |
| 4 讨论与小结 | 第50-52页 |
| 1 稻瘟病菌E3连接酶参与调控营养生长、孢子萌发以及附着胞的形成过程 | 第50-51页 |
| 2 稻瘟病菌E3连接酶与稻瘟病菌对植物的侵染致病相关 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
