| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-14页 |
| 第2章 实验材料与仪器 | 第14-18页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 主要购置试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.2 主要配置溶液 | 第15-16页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第16-18页 |
| 第3章 实验方法 | 第18-30页 |
| 3.1 C6 细胞培养 | 第18-19页 |
| 3.1.1 C6 细胞传代培养 | 第18页 |
| 3.1.2 C6 细胞冻存 | 第18页 |
| 3.1.3 C6 细胞复苏 | 第18-19页 |
| 3.2 确定 G418 筛选剂量 | 第19页 |
| 3.3 C6 细胞转染 | 第19-20页 |
| 3.4 稳定转染细胞株 mRNA 水平鉴定（RT-PCR） | 第20-23页 |
| 3.4.1 引物序列 | 第20页 |
| 3.4.2 引物稀释 | 第20-21页 |
| 3.4.3 细胞总 RNA 提取（TRIzol 法） | 第21页 |
| 3.4.4 样品总 RNA 鉴定和定量 | 第21页 |
| 3.4.5 逆转录合成 cDNA | 第21-22页 |
| 3.4.6 PCR 扩增条件 | 第22页 |
| 3.4.7 1 %琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
| 3.4.8 图像分析 | 第23页 |
| 3.5 Cx43 蛋白水平鉴定（Western blot） | 第23-26页 |
| 3.5.1 样品总蛋白制备 | 第23页 |
| 3.5.2 样品蛋白含量测定 | 第23-24页 |
| 3.5.3 配胶（见表 2） | 第24页 |
| 3.5.4 灌胶和上样 | 第24页 |
| 3.5.5 垂直电泳 | 第24页 |
| 3.5.6 转膜 | 第24-25页 |
| 3.5.7 样品蛋白免疫反应 | 第25页 |
| 3.5.8 样品蛋白化学发光及曝光 | 第25-26页 |
| 3.5.9 膜再生 | 第26页 |
| 3.5.10 内参蛋白β-actin 免疫反应 | 第26页 |
| 3.5.11 图像分析 | 第26页 |
| 3.6 体外 C6 细胞侵袭性实验（Transwell 侵袭模型+MTT 法）[25] | 第26-27页 |
| 3.7 明胶酶谱法检测 MMP-2、MMP-9 活性[26] | 第27-29页 |
| 3.7.1 样品蛋白制备 | 第27页 |
| 3.7.2 样品蛋白含量测定 | 第27页 |
| 3.7.3 试剂的配制 | 第27-28页 |
| 3.7.4 配胶（见表 3） | 第28页 |
| 3.7.5 灌胶和上样 | 第28页 |
| 3.7.6 垂直电泳 | 第28-29页 |
| 3.7.7 孵育、染色及脱色 | 第29页 |
| 3.7.8 图像分析 | 第29页 |
| 3.8 MMP-9 蛋白水平检测（Western blot） | 第29页 |
| 3.9 数据统计学处理 | 第29-30页 |
| 第4章 结果 | 第30-35页 |
| 4.1 转染后细胞形态变化 | 第30页 |
| 4.2 转染后 Cx43 蛋白及 Cx43mRNA 表达的鉴定 | 第30-32页 |
| 4.3 各组细胞侵袭能力检测结果 | 第32页 |
| 4.4 明胶酶谱法检测各组细胞培养液中 MMP-2 及 MMP-9 活性 | 第32-33页 |
| 4.5 Western blot 检测 MMP-9 蛋白表达结果 | 第33-35页 |
| 第5章 讨论 | 第35-38页 |
| 5.1 神经胶质瘤侵袭性分子机制研究 | 第35页 |
| 5.2 Cx43 与神经胶质瘤细胞侵袭 | 第35-37页 |
| 5.3 Cx43 与 MMPs | 第37页 |
| 5.4 展望 | 第37-38页 |
| 第6章 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 综述 缝隙连接蛋白 43 与神经胶质瘤 | 第43-51页 |
| 1 GJ 与 Cx43 | 第44-45页 |
| 2 Cx43 与神经胶质瘤细胞生长抑制 | 第45-46页 |
| 2.1 Cx43 调节细胞生长：依赖 GJIC 机制 | 第45页 |
| 2.2 Cx43 调节细胞生长：不依赖于 GJIC 机制 | 第45-46页 |
| 3 Cx43 与神经胶质瘤细胞迁移 | 第46-47页 |
| 3.1 Cx43 与细胞迁移：依赖 GJIC 机制 | 第46页 |
| 3.2 Cx43 与细胞迁移：不依赖 GJIC 机制 | 第46-47页 |
| 4 结语 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
