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拟南芥ABA诱导侧根减少突变体的筛选与基因克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
缩写词第11-12页
1 前言第12-24页
   ·侧根的发育及其相关研究第12页
   ·ABA 在植物生长发育中的作用第12-19页
     ·ABA 在种子的休眠及萌发中的作用第13页
     ·ABA 在气孔运动中的作用第13-15页
     ·ABA 在侧根发育中的作用第15-19页
   ·拟南芥 T-DNA 插入突变体第19-21页
     ·XVE 系列载体 pER16 中的 T-DNA 区域第19-20页
     ·拟南芥 T-DNA 插入突变体的基因克隆第20-21页
   ·基因 RAA2第21-24页
2 选题依据及意义第24-26页
3 材料和方法第26-36页
   ·实验材料第26页
     ·植物材料第26页
     ·菌株和质粒载体第26页
   ·实验试剂第26页
   ·实验常用溶液第26-27页
   ·培养基第27页
   ·实验所用引物第27-28页
     ·纯合突变体鉴定引物第27-28页
     ·TAIL-PCR 所用引物第28页
     ·RT-PCR 所用引物第28页
     ·构建载体所用引物第28页
   ·实验方法第28-36页
     ·拟南芥的种植第28-29页
     ·突变体的筛选第29页
     ·TAIL-PCR 技术第29-30页
     ·拟南芥的杂交第30页
     ·拟南芥 DNA 的提取第30-31页
     ·拟南芥 T-DNA 插入突变体的纯合体鉴定第31页
     ·总 RNA 的提取和 cDNA 的合成第31-32页
     ·PCR 产物的回收和纯化第32页
     ·ABA 对拟南芥种子萌发的影响第32-33页
     ·拟南芥植株的失水率测定第33页
     ·拟南芥植株的远红外热图分析第33页
     ·重组质粒载体的构建第33-34页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第34页
     ·重组质粒的鉴定第34页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第34-35页
     ·农杆菌介导的植株的转化第35页
     ·拟南芥转基因植株的筛选第35-36页
4 结果与分析第36-50页
   ·突变体的获得第36页
   ·突变体 raa2-1 的基因克隆第36-39页
     ·突变体 raa2-1 的 TAIL-PCR 结果第37页
     ·突变体 raa2-1 的序列比对结果第37-38页
     ·基因 RAA2 的生物信息学分析结果第38-39页
   ·纯合突变体的鉴定第39-40页
   ·突变体 raa2-1 的遗传学分析第40-41页
   ·突变体 raa2-1 和 raa2-2 的表型分析第41-47页
     ·ABA 对突变体 raa2-1 和 raa2-2 根系构型的影响第41-42页
     ·ABA 对突变体 raa2-1 和 raa2-2 侧根发育的影响第42-43页
     ·糖对突变体 raa2-1 和 raa2-2 侧根发育的影响第43-44页
     ·ABA 对突变体 raa2-1 和 raa2-2 萌发的影响第44-45页
     ·突变体 raa2-1 和 raa2-2 气孔开度的分析第45-47页
   ·野生型和突变体 raa2-1、raa2-2 中基因 RAA2 的表达量分析第47-48页
   ·载体的构建及转基因植株的筛选第48-50页
     ·RAA2::pCAMBIA1300 回补载体的构建及回补植株的筛选第48页
     ·RAA2:: super1300+超表达载体的构建及超表达植株的筛选第48-50页
5 讨论第50-52页
6 结论第52-54页
参考文献第54-62页
致谢第62页

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