| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略语表 | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-40页 |
| 1.1 植物抵抗非生物逆境分子生物学研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 植物中参与逆境胁迫响应的主要信号传导路径 | 第16-22页 |
| 1.2.1 ABA信号路径 | 第17-19页 |
| 1.2.2 Ca~(2+)信号路径 | 第19-22页 |
| 1.3 CBL-CIPK复合体参与植物的抗逆反应 | 第22-38页 |
| 1.3.1 CBL-CIPK复合体 | 第22-26页 |
| 1.3.2 CBL-CIPK信号网络的比较基因组分析 | 第26-27页 |
| 1.3.3 CBL-CIPK信号网络的定位和靶标 | 第27-30页 |
| 1.3.4 CBL-CIPK复合体的功能 | 第30-38页 |
| 1.3.5 CIPK6蛋白激酶研究进展 | 第38页 |
| 1.4 本课题研究的目的、意义 | 第38-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 2.1.2 实验所用到的菌株、质粒和感受态细胞 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-51页 |
| 2.2.1 植物核酸抽提技术 | 第41-42页 |
| 2.2.2 cDNA制备 | 第42页 |
| 2.2.3 GhCIPK6的cDNA及基因组全长的获得 | 第42-44页 |
| 2.2.4 基因生物信息学分析 | 第44页 |
| 2.2.5 GhCIPK6启动子序列克隆及顺式作用元件分析 | 第44页 |
| 2.2.6 Southern杂交分析 | 第44页 |
| 2.2.7 RT-PCR和q RT-PCR基因的表达分析 | 第44-45页 |
| 2.2.8 载体的构建 | 第45-47页 |
| 2.2.9 植物遗传转化 | 第47-48页 |
| 2.2.10 原生质体瞬时表达 | 第48-50页 |
| 2.2.11 转基因材料的筛选与鉴定 | 第50页 |
| 2.2.12 GUS染色分析 | 第50页 |
| 2.2.13 拟南芥胁迫处理实验 | 第50-51页 |
| 2.2.14 转基因棉花花器官性状调查 | 第51页 |
| 2.2.15 转基因植株激素含量测定 | 第51页 |
| 2.3 实验中所用的引物 | 第51-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-84页 |
| 3.1 棉花GhCIPK6基因的克隆与生物信息学分析 | 第56-59页 |
| 3.2 GhCIPK6的拷贝数分析 | 第59-60页 |
| 3.3 GhCIPK6组织表达模式及非生物逆境和ABA响应的表达分析 | 第60-62页 |
| 3.4 GhCIPK6的亚细胞定位分析 | 第62-63页 |
| 3.5 GhCIPK6的启动子分析 | 第63-66页 |
| 3.5.1 GhCIPK6启动子序列分析 | 第63-65页 |
| 3.5.2 GhCIPK6启动子组织表达模式 | 第65-66页 |
| 3.6 遗传转化载体的构建 | 第66-67页 |
| 3.6.1 超表达载体的构建 | 第67页 |
| 3.6.2 RNAi载体的构建 | 第67页 |
| 3.7 拟南芥中异源表达GhCIPK6的功能验证 | 第67-74页 |
| 3.7.1 拟南芥的转化和筛选 | 第67页 |
| 3.7.2 GhCIPK6超量表达拟南芥转基因种子逆境条件的萌发分析 | 第67-69页 |
| 3.7.3 GhCIPK6超量表达转基因拟南芥ABA敏感性分析 | 第69-71页 |
| 3.7.4 土培条件下GhCIPK6超量表达拟南芥植株抗旱性分析 | 第71-72页 |
| 3.7.5 逆境相关基因的表达分析 | 第72-74页 |
| 3.8 GhCIPK6转基因棉花的遗传转化和功能验证 | 第74-84页 |
| 3.8.1 棉花遗传转化和转基因植株的阳性检测 | 第74-75页 |
| 3.8.2 转基因植株的拷贝数和表达量检测 | 第75-76页 |
| 3.8.3 棉花GhCIPK6超表达表现高温不育 | 第76-79页 |
| 3.8.4 GhCIPK6超表达促进棉蕾和胚珠发育 | 第79-81页 |
| 3.8.5 转基因棉花叶片和花药在田间不同温度下的激素变化分析 | 第81-84页 |
| 4 讨论 | 第84-93页 |
| 4.1 GhCIPK6属于一类与CBL互作的蛋白激酶,参与逆境响应 | 第84-85页 |
| 4.2 GhCIPK6在花药中特异表达,可能参与生殖系统功能 | 第85-86页 |
| 4.3 GhCIPK6超表达可能通过AtCBL1/AtCBL4-GhCIPK6调控增加抗旱性 | 第86-87页 |
| 4.4 GhCIPK6介导拟南芥抗盐性和抗旱性的交叉 | 第87-88页 |
| 4.5 GhCIPK6介导的非生物胁迫和ABA信号路径的交叉 | 第88-89页 |
| 4.6 GhCIPK6超表达造成高温敏感雄性不育 | 第89-93页 |
| 参考文献 | 第93-106页 |
| 附录 | 第106-111页 |
| 攻读学位期间已发表和待发表论文 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
