摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
符号说明 | 第13-15页 |
1 前言 | 第15-18页 |
2 材料与方法 | 第18-28页 |
2.1 材料 | 第18-21页 |
2.1.1 细胞系及病毒来源 | 第18页 |
2.1.2 试剂 | 第18页 |
2.1.3 抗体 | 第18-19页 |
2.1.4 细胞培养专用试剂 | 第19页 |
2.1.5 引物 | 第19页 |
2.1.6 实验临时配用试剂 | 第19-20页 |
2.1.7 主要仪器 | 第20-21页 |
2.2 方法 | 第21-28页 |
2.2.1 细胞总RNA的抽提及纯化 | 第21-22页 |
2.2.2 实时荧光定量PCR(Quantitative Realtime PCR) | 第22-23页 |
2.2.3 Western Blot | 第23-25页 |
2.2.4 AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
2.2.5 免疫细胞化学法检测 | 第26-27页 |
2.2.6 病毒滴度测定 | 第27页 |
2.2.7 统计学分析 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-58页 |
3.1 CVB3感染对HeLa细胞凋亡的影响 | 第28-35页 |
3.1.1 CVB3病毒扩增与感染HeLa细胞旳病毒滴度测定 | 第28-29页 |
3.1.2 CVB3感染后HeLa细胞形态学观察 | 第29-31页 |
3.1.3 CVB3感染后HeLa细胞凋亡检测 | 第31-34页 |
3.1.4 CVB3感染后HeLa细胞Akt与mTOR的表达 | 第34-35页 |
3.2 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响 | 第35-47页 |
3.2.1 LY294002对HeLa细胞PI3K表达的影响 | 第35-37页 |
3.2.2 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞形态学的影响 | 第37-38页 |
3.2.3 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞不同时间点凋亡的影响 | 第38-40页 |
3.2.4 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞Akt、p-Akt与mTOR、p-mTOR表达的影响 | 第40-47页 |
3.3 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响 | 第47-58页 |
3.3.1 Rapamycin对HeLa细胞mTOR表达的影响 | 第47-49页 |
3.3.2 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞形态学影响 | 第49-50页 |
3.3.3 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞不同时间点凋亡的影响 | 第50-51页 |
3.3.4 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞4EBP1、p-4EBP1与P70S6K、p-P70S6K表达的影响 | 第51-58页 |
4 讨论 | 第58-70页 |
4.1. CBV3感染对HeLa细胞凋亡的影响 | 第58-61页 |
4.2. CVB3感染抑制HeLa细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路 | 第61-66页 |
4.3. LY294002抑制PI3K对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响 | 第66-68页 |
4.4. Rapamycin抑制mTOR对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响 | 第68-70页 |
5 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
综述1 | 第80-88页 |
参考文献 | 第85-88页 |
综述2 | 第88-101页 |
参考文献 | 第95-101页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第101-103页 |
致谢 | 第103页 |