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LY294002和雷帕霉素对CVB3感染HeLa细胞凋亡的影响及机制研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
符号说明第13-15页
1 前言第15-18页
2 材料与方法第18-28页
    2.1 材料第18-21页
        2.1.1 细胞系及病毒来源第18页
        2.1.2 试剂第18页
        2.1.3 抗体第18-19页
        2.1.4 细胞培养专用试剂第19页
        2.1.5 引物第19页
        2.1.6 实验临时配用试剂第19-20页
        2.1.7 主要仪器第20-21页
    2.2 方法第21-28页
        2.2.1 细胞总RNA的抽提及纯化第21-22页
        2.2.2 实时荧光定量PCR(Quantitative Realtime PCR)第22-23页
        2.2.3 Western Blot第23-25页
        2.2.4 AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡第25-26页
        2.2.5 免疫细胞化学法检测第26-27页
        2.2.6 病毒滴度测定第27页
        2.2.7 统计学分析第27-28页
3 结果第28-58页
    3.1 CVB3感染对HeLa细胞凋亡的影响第28-35页
        3.1.1 CVB3病毒扩增与感染HeLa细胞旳病毒滴度测定第28-29页
        3.1.2 CVB3感染后HeLa细胞形态学观察第29-31页
        3.1.3 CVB3感染后HeLa细胞凋亡检测第31-34页
        3.1.4 CVB3感染后HeLa细胞Akt与mTOR的表达第34-35页
    3.2 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响第35-47页
        3.2.1 LY294002对HeLa细胞PI3K表达的影响第35-37页
        3.2.2 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞形态学的影响第37-38页
        3.2.3 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞不同时间点凋亡的影响第38-40页
        3.2.4 LY294002对CVB3感染的HeLa细胞Akt、p-Akt与mTOR、p-mTOR表达的影响第40-47页
    3.3 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响第47-58页
        3.3.1 Rapamycin对HeLa细胞mTOR表达的影响第47-49页
        3.3.2 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞形态学影响第49-50页
        3.3.3 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞不同时间点凋亡的影响第50-51页
        3.3.4 Rapamycin对CVB3感染的HeLa细胞4EBP1、p-4EBP1与P70S6K、p-P70S6K表达的影响第51-58页
4 讨论第58-70页
    4.1. CBV3感染对HeLa细胞凋亡的影响第58-61页
    4.2. CVB3感染抑制HeLa细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路第61-66页
    4.3. LY294002抑制PI3K对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响第66-68页
    4.4. Rapamycin抑制mTOR对CVB3感染的HeLa细胞及下游分子表达和磷酸化变化的影响第68-70页
5 结论第70-71页
参考文献第71-80页
综述1第80-88页
    参考文献第85-88页
综述2第88-101页
    参考文献第95-101页
攻读学位期间主要的研究成果第101-103页
致谢第103页

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