| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第14-37页 |
| ·菌寄生真菌研究现状 | 第14-18页 |
| ·菌寄生真菌的种类 | 第14-16页 |
| ·菌寄生真菌的作用机理 | 第16-18页 |
| ·菌寄生真菌几丁质酶研究现状 | 第18-32页 |
| ·微生物几丁质酶基因 | 第18-21页 |
| ·菌寄生真菌几丁质酶基因 | 第21-23页 |
| ·几丁质酶基因的表达调控 | 第23-24页 |
| ·菌寄生真菌几丁质酶的生防应用 | 第24-32页 |
| ·存在的问题及展望 | 第32-34页 |
| ·几丁质酶活性与抗病性 | 第32-33页 |
| ·不同菌寄生真菌几丁质酶基因对植物生长的影响 | 第33页 |
| ·工程菌和转基因植物的安全性 | 第33页 |
| ·菌寄生真菌几丁质酶基因资源 | 第33-34页 |
| ·展望 | 第34页 |
| ·选题的目的意义、研究内容、技术路线 | 第34-37页 |
| ·选题的目的意义 | 第34-35页 |
| ·研究内容 | 第35-36页 |
| ·技术路线 | 第36-37页 |
| 2 材料和方法 | 第37-77页 |
| ·材料 | 第37-41页 |
| ·供试菌株与质粒 | 第37页 |
| ·酶和生化试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器和设备 | 第38页 |
| ·有关溶液及培养基的配制 | 第38-41页 |
| ·几丁质酶基因的克隆 | 第41-54页 |
| ·真菌总RNA 的提取 | 第44页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第44-45页 |
| ·菌丝体DNA 的抽提 | 第45页 |
| ·基因trchi1 的克隆 | 第45-51页 |
| ·tfchi1 基因的克隆 | 第51-53页 |
| ·tfchi2 基因的克隆 | 第53-54页 |
| ·tfchi3 基因的克隆 | 第54页 |
| ·几丁质酶基因的生物信息学分析 | 第54-55页 |
| ·几丁质酶基因在毕赤酵母中的表达及分析 | 第55-66页 |
| ·T. roseum trchi1 基因在毕赤酵母中的表达及分析 | 第55-64页 |
| ·几丁质酶基因tfchi1 在毕赤酵母中的表达及分析 | 第64-65页 |
| ·几丁质酶基因tfchi2 在毕赤酵母中的表达及分析 | 第65-66页 |
| ·重组几丁质酶抑菌活性测定 | 第66-67页 |
| ·粉红聚端孢几丁质酶基因trchi1 转化烟草研究 | 第67-77页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第67-68页 |
| ·转化农杆菌 | 第68-69页 |
| ·重组农杆菌鉴定 | 第69页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第69-71页 |
| ·转基因烟草植株的鉴定 | 第71-75页 |
| ·转基因烟草植株的基因表达分析 | 第75-76页 |
| ·转基因烟草的抗病性 | 第76-77页 |
| 3 结果与分析 | 第77-166页 |
| ·T. roseum trchi1 基因的克隆、表达及性质分析 | 第77-106页 |
| ·trchi1 基因的克隆 | 第77-93页 |
| ·trchi1 的毕赤酵母表达 | 第93-100页 |
| ·表达几丁质酶的纯化与性质研究 | 第100-106页 |
| ·T. flavus ACCC30960 tfchi1 基因的克隆、表达及性质分析 | 第106-134页 |
| ·tfchi1 基因的克隆 | 第106-122页 |
| ·tfchi1 基因的毕赤酵母表达 | 第122-128页 |
| ·表达几丁质酶Tfchi1 酶学性质 | 第128-131页 |
| ·重组几丁质酶Tfchi1 的抗菌活性 | 第131-134页 |
| ·T. flavus ACCC30960 tfchi2 基因的克隆、表达及性质分析 | 第134-154页 |
| ·tfchi2 基因的克隆 | 第134-143页 |
| ·tfchi2 基因的毕赤酵母表达 | 第143-149页 |
| ·表达几丁质酶Tfchi2 酶学性质研究 | 第149-152页 |
| ·重组几丁质酶Tfchi2 的抗菌活性 | 第152-154页 |
| ·T. flavus ACCC30404 tfchi3 基因的克隆、 | 第154-157页 |
| ·tfchi3 中间片段的分离 | 第154-155页 |
| ·tfchi3 基因cDNA 3′末端序列的分离 | 第155-156页 |
| ·Trchi3 蛋白的保守结构域分析 | 第156-157页 |
| ·粉红聚端孢几丁质酶基因trchi1 转烟草研究 | 第157-166页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第157-160页 |
| ·转化农杆菌 | 第160页 |
| ·LBA4404- pROKⅡ/yctrchi1 转化烟草 | 第160-161页 |
| ·转化烟草的分子检测 | 第161-162页 |
| ·转基因烟草植株的基因表达分析 | 第162-163页 |
| ·转基因烟草的抗病性分析 | 第163-166页 |
| 4 讨论 | 第166-173页 |
| ·基因分离技术 | 第166-168页 |
| ·菌寄生真菌几丁质酶基因的表达 | 第168-169页 |
| ·菌寄生真菌几丁质酶的酶学特性 | 第169-170页 |
| ·菌寄生真菌几丁质酶的抑菌活性 | 第170-171页 |
| ·菌寄生菌几丁质酶的结构域 | 第171页 |
| ·几丁质酶基因转烟草研究 | 第171-173页 |
| 5 结论与建议 | 第173-176页 |
| ·结论 | 第173-174页 |
| ·建议 | 第174-176页 |
| 参考文献 | 第176-194页 |
| 致谢 | 第194-195页 |
| 攻读学位期间发表论文的情况 | 第195页 |
