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薄皮甜瓜脂氧合酶CmLOX10和CmLOX13的原核表达、生化特性及启动子分析

缩略语第4-12页
摘要第12-14页
Abstract第14-16页
第一章 文献综述第17-32页
    1.1 脂氧合酶的蛋白特性第17-26页
        1.1.1 LOX蛋白结构特征第17-18页
        1.1.2 LOX催化反应的位置特异性第18-19页
        1.1.3 LOX途径第19-23页
        1.1.4 LOX的分类第23-26页
    1.2 LOX与果实成熟衰老第26-28页
        1.2.1 LOX与乙烯合成第26-27页
        1.2.2 LOX与果实香气合成第27-28页
    1.3 LOX与逆境胁迫第28-30页
        1.3.1 逆境胁迫相关的LOX基因第29页
        1.3.2 抗逆相关的AOS和HPL支路第29-30页
    1.4 本研究的目的、意义及技术路线第30-32页
        1.4.1 本研究目的和意义第30-31页
        1.4.2 技术路线第31-32页
第二章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的克隆及生物信息学分析第32-57页
    2.1 材料第32-33页
    2.2 方法第33-39页
    2.3 结果与分析第39-55页
        2.3.1 CmLOX10和CmLOX13基因的扩增第39-40页
        2.3.2 CmLOX10和CmLOX13的鉴定和测序第40-41页
        2.3.3 CmLOX10和CmLOX13的5’RACE第41页
        2.3.4 CmLOX10和CmLOX13与数据库中的序列比对第41-46页
        2.3.5 CmLOX10和CmLOX13启动子的克隆第46-47页
        2.3.6 CmLOX10和CmLOX13启动子连接、鉴定和测序第47页
        2.3.7 CmLOX10和CmLOX13与数据库中的启动子序列比对第47-52页
        2.3.8 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的生物信息学分析第52-55页
    2.4 讨论第55-56页
        2.4.1 CmLOX10和CmLOX13与数据库中序列的差异第55页
        2.4.2 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的生物信息学分析第55-56页
    2.5 本章小结第56-57页
第三章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的原核表达及生化特性分析第57-76页
    3.1 材料第57-59页
    3.2 方法第59-66页
    3.3 结果与分析第66-74页
        3.3.1 CmLOX10和CmLOX13原核表达载体的构建第66-67页
        3.3.2 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白的诱导表达第67-68页
        3.3.3 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白的纯化第68-69页
        3.3.4 CmLOX10和CmLOX13纯化蛋白的Western blotting分析第69-70页
        3.3.5 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白最适pH值和温度测定第70-71页
        3.3.6 CmLOX10和CmLOX13蛋白酶促动力学参数测定第71-72页
        3.3.7 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白的位置特异性的鉴定第72-74页
    3.4 讨论第74-75页
        3.4.1 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的原核表达第74页
        3.4.2 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13蛋白的功能预测第74-75页
    3.5 本章小结第75-76页
第四章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的亚细胞定位及启动子分析第76-98页
    4.1 材料第77-79页
    4.2 方法第79-86页
    4.3 结果与分析第86-96页
        4.3.1 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的亚细胞定位第86-87页
        4.3.2 CmLOX10和CmLOX13启动子中与激素和非生物胁迫相关顺式作用元件分析第87-93页
        4.3.3 CmLOX10和CmLOX13启动子表达载体的构建第93-94页
        4.3.4 CmLOX13启动子对激素的响应第94-96页
        4.3.5 CmLOX13启动子对非生物胁迫的响应第96页
    4.4 讨论第96-97页
        4.4.1 CmLOX10和CmLOX13在烟草叶片的瞬时表达第96页
        4.4.2 CmLOX13启动子对激素和非生物胁迫的响应第96-97页
    4.5 本章小结第97-98页
第五章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13对拟南芥的遗传转化第98-107页
    5.1 材料第98-99页
    5.2 方法第99-102页
    5.3 结果与分析第102-105页
        5.3.1 野生型拟南芥的PPT浓度筛选第102页
        5.3.2 野生型拟南芥的除草剂Basta浓度筛选第102-103页
        5.3.3 转基因拟南芥的Basta筛选第103页
        5.3.4 转基因拟南芥植株的RT-PCR鉴定第103-105页
    5.4 讨论第105-106页
        5.4.1 CmLOX10和CmLOX13转基因拟南芥筛选的Basta浓度第105页
        5.4.2 转基因拟南芥植株的RT-PCR鉴定第105-106页
    5.5 本章小结第106-107页
全文总结与展望第107-109页
本课题的特色和创新之处第109-110页
参考文献第110-119页
附录第119-131页
致谢第131-132页
攻读学位期间发表的学术论文第132页

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