缩略语 | 第4-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第17-32页 |
1.1 脂氧合酶的蛋白特性 | 第17-26页 |
1.1.1 LOX蛋白结构特征 | 第17-18页 |
1.1.2 LOX催化反应的位置特异性 | 第18-19页 |
1.1.3 LOX途径 | 第19-23页 |
1.1.4 LOX的分类 | 第23-26页 |
1.2 LOX与果实成熟衰老 | 第26-28页 |
1.2.1 LOX与乙烯合成 | 第26-27页 |
1.2.2 LOX与果实香气合成 | 第27-28页 |
1.3 LOX与逆境胁迫 | 第28-30页 |
1.3.1 逆境胁迫相关的LOX基因 | 第29页 |
1.3.2 抗逆相关的AOS和HPL支路 | 第29-30页 |
1.4 本研究的目的、意义及技术路线 | 第30-32页 |
1.4.1 本研究目的和意义 | 第30-31页 |
1.4.2 技术路线 | 第31-32页 |
第二章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的克隆及生物信息学分析 | 第32-57页 |
2.1 材料 | 第32-33页 |
2.2 方法 | 第33-39页 |
2.3 结果与分析 | 第39-55页 |
2.3.1 CmLOX10和CmLOX13基因的扩增 | 第39-40页 |
2.3.2 CmLOX10和CmLOX13的鉴定和测序 | 第40-41页 |
2.3.3 CmLOX10和CmLOX13的5’RACE | 第41页 |
2.3.4 CmLOX10和CmLOX13与数据库中的序列比对 | 第41-46页 |
2.3.5 CmLOX10和CmLOX13启动子的克隆 | 第46-47页 |
2.3.6 CmLOX10和CmLOX13启动子连接、鉴定和测序 | 第47页 |
2.3.7 CmLOX10和CmLOX13与数据库中的启动子序列比对 | 第47-52页 |
2.3.8 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的生物信息学分析 | 第52-55页 |
2.4 讨论 | 第55-56页 |
2.4.1 CmLOX10和CmLOX13与数据库中序列的差异 | 第55页 |
2.4.2 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的生物信息学分析 | 第55-56页 |
2.5 本章小结 | 第56-57页 |
第三章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的原核表达及生化特性分析 | 第57-76页 |
3.1 材料 | 第57-59页 |
3.2 方法 | 第59-66页 |
3.3 结果与分析 | 第66-74页 |
3.3.1 CmLOX10和CmLOX13原核表达载体的构建 | 第66-67页 |
3.3.2 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白的诱导表达 | 第67-68页 |
3.3.3 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白的纯化 | 第68-69页 |
3.3.4 CmLOX10和CmLOX13纯化蛋白的Western blotting分析 | 第69-70页 |
3.3.5 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白最适pH值和温度测定 | 第70-71页 |
3.3.6 CmLOX10和CmLOX13蛋白酶促动力学参数测定 | 第71-72页 |
3.3.7 CmLOX10和CmLOX13重组蛋白的位置特异性的鉴定 | 第72-74页 |
3.4 讨论 | 第74-75页 |
3.4.1 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的原核表达 | 第74页 |
3.4.2 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13蛋白的功能预测 | 第74-75页 |
3.5 本章小结 | 第75-76页 |
第四章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的亚细胞定位及启动子分析 | 第76-98页 |
4.1 材料 | 第77-79页 |
4.2 方法 | 第79-86页 |
4.3 结果与分析 | 第86-96页 |
4.3.1 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13的亚细胞定位 | 第86-87页 |
4.3.2 CmLOX10和CmLOX13启动子中与激素和非生物胁迫相关顺式作用元件分析 | 第87-93页 |
4.3.3 CmLOX10和CmLOX13启动子表达载体的构建 | 第93-94页 |
4.3.4 CmLOX13启动子对激素的响应 | 第94-96页 |
4.3.5 CmLOX13启动子对非生物胁迫的响应 | 第96页 |
4.4 讨论 | 第96-97页 |
4.4.1 CmLOX10和CmLOX13在烟草叶片的瞬时表达 | 第96页 |
4.4.2 CmLOX13启动子对激素和非生物胁迫的响应 | 第96-97页 |
4.5 本章小结 | 第97-98页 |
第五章 薄皮甜瓜CmLOX10和CmLOX13对拟南芥的遗传转化 | 第98-107页 |
5.1 材料 | 第98-99页 |
5.2 方法 | 第99-102页 |
5.3 结果与分析 | 第102-105页 |
5.3.1 野生型拟南芥的PPT浓度筛选 | 第102页 |
5.3.2 野生型拟南芥的除草剂Basta浓度筛选 | 第102-103页 |
5.3.3 转基因拟南芥的Basta筛选 | 第103页 |
5.3.4 转基因拟南芥植株的RT-PCR鉴定 | 第103-105页 |
5.4 讨论 | 第105-106页 |
5.4.1 CmLOX10和CmLOX13转基因拟南芥筛选的Basta浓度 | 第105页 |
5.4.2 转基因拟南芥植株的RT-PCR鉴定 | 第105-106页 |
5.5 本章小结 | 第106-107页 |
全文总结与展望 | 第107-109页 |
本课题的特色和创新之处 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-119页 |
附录 | 第119-131页 |
致谢 | 第131-132页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第132页 |