| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号及缩略语(ABBREVIATION)表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 植物信号转导中的脂信号通路 | 第12-15页 |
| 1.1 植物中脂信号通路概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 磷脂酶 | 第12-13页 |
| 1.1.2 多聚磷脂酰肌醇 | 第13-14页 |
| 1.1.3 肌醇多聚磷酸 | 第14页 |
| 1.2 植物中脂信号通路的作用 | 第14-15页 |
| 2 植物中的PLC | 第15-20页 |
| 2.1 植物PI/PLC的结构与分类 | 第16-17页 |
| 2.2 植物PI/PLC通路的特点 | 第17-18页 |
| 2.3 植物PI/PLC的调控机制 | 第18-19页 |
| 2.4 植物PI/PLC参与的逆境信号转导 | 第19-20页 |
| 3 磷脂信号转导通路中的多聚磷脂酰肌醇 | 第20-22页 |
| 3.1 PtdIns4P参与信号转导通路的研究进展 | 第20页 |
| 3.2 PtdIns(4,5)P_2参与信号转导通路的研究进展 | 第20-22页 |
| 3.2.1 跨膜蛋白 | 第21页 |
| 3.2.2 酶活性 | 第21-22页 |
| 3.2.3 磷脂酰肌醇结合域 | 第22页 |
| 4 研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 OSPLC1的胞内定位 | 第24-44页 |
| 1 材料与方法 | 第25-36页 |
| 1.1 实验材料 | 第25页 |
| 1.2 水稻的培养和处理 | 第25-26页 |
| 1.3 pSuper::GFP-OsPLC1载体的构建 | 第26-28页 |
| 1.3.1 OsPLC1片段的克隆 | 第26-27页 |
| 1.3.2 基因和载体的酶切 | 第27页 |
| 1.3.3 质粒的连接 | 第27页 |
| 1.3.4 质粒的转化 | 第27页 |
| 1.3.5 质粒的提取 | 第27-28页 |
| 1.3.6 双酶切鉴定 | 第28页 |
| 1.3.7 测序 | 第28页 |
| 1.4 农杆菌的转化 | 第28-29页 |
| 1.4.1 农杆菌感受态的制备 | 第28页 |
| 1.4.2 农杆菌转化 | 第28-29页 |
| 1.5 农杆菌侵染烟草叶片 | 第29页 |
| 1.6 激光共聚焦观察 | 第29页 |
| 1.7 农杆菌介导的水稻转基因 | 第29-30页 |
| 1.7.1 水稻转基因 | 第29-30页 |
| 1.7.2 水稻转基因苗的快速鉴定 | 第30页 |
| 1.8 水稻总蛋白的提取、纯化和分离 | 第30-32页 |
| 1.8.1 水稻总蛋白的提取 | 第30-31页 |
| 1.8.2 水稻总蛋白含量的测定 | 第31页 |
| 1.8.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第31-32页 |
| 1.8.4 转膜 | 第32页 |
| 1.8.5 蛋白免疫印迹试验(Western blotting) | 第32页 |
| 1.9 水稻细胞质膜的提取、纯化和分离 | 第32-35页 |
| 1.9.1 水稻总蛋白的粗体 | 第32-33页 |
| 1.9.2 水稻膜蛋白的粗提 | 第33页 |
| 1.9.3 水稻细胞质膜的纯化(两相法) | 第33-35页 |
| 1.10 酵母双杂 | 第35-36页 |
| 1.10.1 感受态制备 | 第35页 |
| 1.10.2 转化 | 第35-36页 |
| 1.10.3 毒性与自激活检测 | 第36页 |
| 1.10.4 酵母融合 | 第36页 |
| 2 结果分析 | 第36-41页 |
| 2.1 OsPLC1在烟草中的定位 | 第36-37页 |
| 2.2 GFP-OsPLC1转基因植株的筛选 | 第37-38页 |
| 2.3 OsPLC1在水稻中的细胞定位 | 第38-40页 |
| 2.4 OsPLC1互作蛋白的酵母筛选 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 OSPLC1对水解底物的选择性 | 第44-56页 |
| 1 材料与方法 | 第45-49页 |
| 1.1 实验材料 | 第45页 |
| 1.2 PtdIns4P和PtdIns(4,5)P_2探针荧光融合蛋白载体构建 | 第45-46页 |
| 1.2.1 PH_(FAPP1)和PH_(PLCδ1)的片段合成 | 第45页 |
| 1.2.2 基因和载体的酶切与连接 | 第45-46页 |
| 1.2.3 质粒的转化 | 第46页 |
| 1.2.4 测序 | 第46页 |
| 1.3 农杆菌介导的水稻转基因 | 第46页 |
| 1.4 激光共聚焦观察 | 第46页 |
| 1.5 TLC-GC法测定水稻中PtdIns4P含量 | 第46-49页 |
| 1.5.1 水稻总脂的提取 | 第46-47页 |
| 1.5.2 薄层层析(TLC) | 第47-48页 |
| 1.5.3 甲酯化 | 第48页 |
| 1.5.4 气相色谱分析脂肪酸 | 第48-49页 |
| 2 结果分析 | 第49-53页 |
| 2.1 构建PtdIns4P和PtdIns(4,5)P_2生物探针 | 第49页 |
| 2.2 水稻中PtdIns4P和PtdIns(4,5)P_2的定位 | 第49-51页 |
| 2.3 利用PtdIns4P的生物探针检测PtdIns4P含量变化 | 第51-52页 |
| 2.4 利用气相色谱测定水稻中PtdIns4P含量的测定 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| 全文讨论 | 第56-58页 |
| 全文结论和创新之处 | 第58-60页 |
| 全文结论 | 第58页 |
| 创新点 | 第58页 |
| 不足之处 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 附录 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
