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抗多菌灵小麦赤霉病菌的适合度研究及一个Gal4-like基因的功能分析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一部分 文献综述第11-29页
    1 小麦赤霉病的发生与危害第11-12页
    2 小麦赤霉病菌第12-13页
        2.1 小麦赤霉病菌的组成第12页
        2.2 小麦赤霉病菌的生物学特性第12-13页
    3 禾谷镰孢菌毒素第13-16页
        3.1 毒素种类第14-15页
        3.2 禾谷镰孢菌毒素的检测第15-16页
            3.2.1 生物测定法第15-16页
            3.2.2 化学和免疫化学测定法第16页
    4 禾谷镰孢菌致病相关基因研究进展第16-17页
    5 禾谷镰孢菌的遗传转化第17-18页
    6 禾谷镰孢菌对多菌灵的抗药性研究进展第18-19页
    7 本研究的主要内容及其意义第19-21页
        7.1 研究的主要内容第19-20页
        7.2 本研究的意义第20-21页
    参考文献第21-29页
第二部分 研究内容第29-73页
    第一章 抗多菌灵小麦赤霉病菌的适合度研究第29-49页
        前言第29-31页
        1 材料与方法第31-34页
            1.1 供试菌株第31页
            1.2 培养基第31页
            1.3 真菌基因组DNA的提取第31页
            1.4 PCR反应体系第31-32页
            1.5 3-AcDON化学型菌株筛选第32-33页
                1.5.1 多菌灵抗性菌株与敏感菌株综合物种的鉴定第32页
                1.5.2 菌株F.asiaticum和F.graminearum种的区分鉴定第32-33页
                1.5.3 F.asiaticum菌株产毒化学型鉴定第33页
            1.6 多菌灵抗性菌株与敏感菌株适合度分析第33-34页
                1.6.1 菌丝的生长速度测定第33页
                1.6.2 菌株的产子囊壳能力测定第33-34页
                1.6.3 菌株产毒能力测定第34页
                1.6.4 田间致病力测定第34页
        2 结果与分析第34-44页
            2.1 3-AcDON化学型菌株筛选第34-37页
                2.1.1 多菌灵抗性菌株与敏感菌株综合物种的鉴定第34-35页
                2.1.2 禾谷镰孢菌综合物种菌株种的鉴定第35-36页
                2.1.3 菌株F. asiaticum产毒化学型的鉴定第36-37页
            2.2 多菌灵抗性菌株与敏感菌株适合度分析第37-44页
                2.2.1 菌丝的生长速度测定第37-38页
                2.2.2 菌株的产子囊壳能力测定第38页
                2.2.3 菌株产毒能力测定第38-43页
                2.2.4 田间致病力测定结果第43-44页
        3 讨论第44-46页
        参考文献第46-49页
    第二章 FgGal4-like1基因的功能分析第49-73页
        前言第49-50页
        1 材料与方法第50-61页
            1.1 供试菌株和质粒第50-51页
            1.2 培养基及试剂第51-52页
            1.3 禾谷镰孢菌基因组DNA与PHYG1.4质粒的提取第52页
            1.4 禾谷镰孢菌原生质体转化方法第52-54页
            1.5 基因FgGal4-likel的敲除第54-58页
                1.5.1 Split PCR方法构建基因敲除DNA片段第54-56页
                1.5.2 原生质体转化第56-57页
                1.5.3 敲除突变体验证第57-58页
            1.6 敲除突变体的回复第58页
                1.6.1 回复突变DNA片段构建第58页
                1.6.2 原生质体转化第58页
                1.6.3 回复突变体验证第58页
            1.7 Southern杂交第58-60页
                1.7.1 用CTAB法提取野生型PH-1和突变体菌株的DNA第58-59页
                1.7.2 酶切反应第59-60页
                1.7.3 酶切后电泳第60页
            1.8 突变体生物学特征观察第60-61页
                1.8.1 生长形态观察第60页
                1.8.2 产孢能力与产子囊壳能力第60页
                1.8.3 田间致病力第60-61页
        2 结果与分析第61-69页
            2.1 敲除片段的获得第61-62页
            2.2 敲除突变体的获得第62-63页
                2.2.1 PCR验证第62页
                2.2.2 RT-PCR验证第62-63页
            2.3 FgGal4-like1基因敲除突变体的回复突变体的获得第63-64页
                2.3.1 回复DNA片段的构建第63页
                2.3.2 回复突变体的验证第63-64页
            2.4 Southern杂交验证第64-66页
                2.4.1 Southern杂交酶切反应第64-65页
                2.4.2 Southern杂交探针的制备第65页
                2.4.3 Southern印记杂交结果第65-66页
            2.5 突变体生物学特征观察第66-69页
                2.5.1 突变体菌落形态及生长速率第66-67页
                2.5.2 产孢量的比较第67页
                2.5.3 产子囊壳的比较第67-68页
                2.5.4 田间致病力第68-69页
        3 讨论第69-71页
        参考文献第71-73页
全文总结第73-75页
致谢第75页

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