摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第11-29页 |
1 小麦赤霉病的发生与危害 | 第11-12页 |
2 小麦赤霉病菌 | 第12-13页 |
2.1 小麦赤霉病菌的组成 | 第12页 |
2.2 小麦赤霉病菌的生物学特性 | 第12-13页 |
3 禾谷镰孢菌毒素 | 第13-16页 |
3.1 毒素种类 | 第14-15页 |
3.2 禾谷镰孢菌毒素的检测 | 第15-16页 |
3.2.1 生物测定法 | 第15-16页 |
3.2.2 化学和免疫化学测定法 | 第16页 |
4 禾谷镰孢菌致病相关基因研究进展 | 第16-17页 |
5 禾谷镰孢菌的遗传转化 | 第17-18页 |
6 禾谷镰孢菌对多菌灵的抗药性研究进展 | 第18-19页 |
7 本研究的主要内容及其意义 | 第19-21页 |
7.1 研究的主要内容 | 第19-20页 |
7.2 本研究的意义 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-29页 |
第二部分 研究内容 | 第29-73页 |
第一章 抗多菌灵小麦赤霉病菌的适合度研究 | 第29-49页 |
前言 | 第29-31页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
1.1 供试菌株 | 第31页 |
1.2 培养基 | 第31页 |
1.3 真菌基因组DNA的提取 | 第31页 |
1.4 PCR反应体系 | 第31-32页 |
1.5 3-AcDON化学型菌株筛选 | 第32-33页 |
1.5.1 多菌灵抗性菌株与敏感菌株综合物种的鉴定 | 第32页 |
1.5.2 菌株F.asiaticum和F.graminearum种的区分鉴定 | 第32-33页 |
1.5.3 F.asiaticum菌株产毒化学型鉴定 | 第33页 |
1.6 多菌灵抗性菌株与敏感菌株适合度分析 | 第33-34页 |
1.6.1 菌丝的生长速度测定 | 第33页 |
1.6.2 菌株的产子囊壳能力测定 | 第33-34页 |
1.6.3 菌株产毒能力测定 | 第34页 |
1.6.4 田间致病力测定 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-44页 |
2.1 3-AcDON化学型菌株筛选 | 第34-37页 |
2.1.1 多菌灵抗性菌株与敏感菌株综合物种的鉴定 | 第34-35页 |
2.1.2 禾谷镰孢菌综合物种菌株种的鉴定 | 第35-36页 |
2.1.3 菌株F. asiaticum产毒化学型的鉴定 | 第36-37页 |
2.2 多菌灵抗性菌株与敏感菌株适合度分析 | 第37-44页 |
2.2.1 菌丝的生长速度测定 | 第37-38页 |
2.2.2 菌株的产子囊壳能力测定 | 第38页 |
2.2.3 菌株产毒能力测定 | 第38-43页 |
2.2.4 田间致病力测定结果 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
第二章 FgGal4-like1基因的功能分析 | 第49-73页 |
前言 | 第49-50页 |
1 材料与方法 | 第50-61页 |
1.1 供试菌株和质粒 | 第50-51页 |
1.2 培养基及试剂 | 第51-52页 |
1.3 禾谷镰孢菌基因组DNA与PHYG1.4质粒的提取 | 第52页 |
1.4 禾谷镰孢菌原生质体转化方法 | 第52-54页 |
1.5 基因FgGal4-likel的敲除 | 第54-58页 |
1.5.1 Split PCR方法构建基因敲除DNA片段 | 第54-56页 |
1.5.2 原生质体转化 | 第56-57页 |
1.5.3 敲除突变体验证 | 第57-58页 |
1.6 敲除突变体的回复 | 第58页 |
1.6.1 回复突变DNA片段构建 | 第58页 |
1.6.2 原生质体转化 | 第58页 |
1.6.3 回复突变体验证 | 第58页 |
1.7 Southern杂交 | 第58-60页 |
1.7.1 用CTAB法提取野生型PH-1和突变体菌株的DNA | 第58-59页 |
1.7.2 酶切反应 | 第59-60页 |
1.7.3 酶切后电泳 | 第60页 |
1.8 突变体生物学特征观察 | 第60-61页 |
1.8.1 生长形态观察 | 第60页 |
1.8.2 产孢能力与产子囊壳能力 | 第60页 |
1.8.3 田间致病力 | 第60-61页 |
2 结果与分析 | 第61-69页 |
2.1 敲除片段的获得 | 第61-62页 |
2.2 敲除突变体的获得 | 第62-63页 |
2.2.1 PCR验证 | 第62页 |
2.2.2 RT-PCR验证 | 第62-63页 |
2.3 FgGal4-like1基因敲除突变体的回复突变体的获得 | 第63-64页 |
2.3.1 回复DNA片段的构建 | 第63页 |
2.3.2 回复突变体的验证 | 第63-64页 |
2.4 Southern杂交验证 | 第64-66页 |
2.4.1 Southern杂交酶切反应 | 第64-65页 |
2.4.2 Southern杂交探针的制备 | 第65页 |
2.4.3 Southern印记杂交结果 | 第65-66页 |
2.5 突变体生物学特征观察 | 第66-69页 |
2.5.1 突变体菌落形态及生长速率 | 第66-67页 |
2.5.2 产孢量的比较 | 第67页 |
2.5.3 产子囊壳的比较 | 第67-68页 |
2.5.4 田间致病力 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-73页 |
全文总结 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |