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拟南芥、小麦及玉米脂肪酸Alpha-DOX基因研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-26页
   ·脂肪酸α-双加氧酶(alpha-Dioxygenase)的研究进展第12-18页
     ·植物脂肪酸α-双加氧酶(alpha-Dioxygenase)的发现第12-14页
     ·植物脂肪酸α-双加氧酶(alpha-Dioxygenase)的催化性质第14-15页
     ·alpha-Dioxygenas 的生物学功能与表达模式第15-18页
   ·毕赤酵母表达系统第18-22页
     ·毕赤酵母表达系统的构成与特点第19-20页
     ·影响目的基因在毕赤酵母中表达的因素第20-22页
   ·实时荧光定量PCR 技术的发展及应用第22-24页
     ·实时定量PCR 的基本原理第23页
     ·实时荧光定量PCR 技术的应用第23-24页
   ·立题依据和研究目的第24-26页
第二章 拟南芥Alpha-dioxygenase 2 在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定第26-39页
   ·材料第26-29页
     ·拟南芥AtDOX2 的cDNA第26页
     ·质粒载体第26页
     ·宿主菌第26页
     ·实验材料及试剂盒第26页
     ·实验试剂第26-28页
     ·毕赤酵母表达的溶液及培养基第28页
     ·引物第28-29页
   ·实验方法第29-33页
     ·AtDOX2 基因的扩增及重组表达载体的构建第29-31页
     ·重组表达载体电转化及酵母阳性重组子的筛选第31页
     ·重组转化子的鉴定第31-32页
     ·目的蛋白的诱导表达第32-33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·AtDOX2 酵母表达载体的构建第33页
     ·AtDOX2 表达菌株的筛选第33-34页
     ·AtDOX2 表达和诱导时间的优化第34-35页
     ·AtDOX2 的分离纯化第35页
     ·AtDOX2 的过氧化物酶活性分析第35-36页
     ·AtDOX2 的双加氧酶活性分析第36-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 小麦中Alpha-dioxygenase 的表达分析第39-45页
   ·材料第39页
     ·植物材料第39页
     ·主要试剂第39页
     ·主要仪器第39页
     ·引物第39页
   ·试验方法第39-41页
     ·植物材料胁迫的处理第39-40页
     ·RNA 的提取与cDNA 的合成第40页
     ·小麦DOX 基因表达水平定量第40页
     ·数据的处理第40-41页
   ·结果与分析第41-43页
     ·NaCl 胁迫下TaDOX 的表达第41-42页
     ·PEG8000 胁迫下TaDOX 的表达第42-43页
   ·讨论第43-45页
第四章 玉米中Alpha-dioxygenase 基因的克隆及生物信息学分析第45-59页
   ·材料第45页
     ·植物材料第45页
     ·菌株和载体第45页
     ·主要试剂第45页
   ·计算机分析软件第45页
   ·试验方法第45-48页
     ·RNA 的提取和cDNA 第一链的合成第45-46页
     ·玉米DOX 基因的克隆第46-47页
     ·大肠杆菌感受态的制备及连接产物的转化第47-48页
   ·结果与分析第48-57页
     ·RT-PCR 扩增ZmDOX第48-50页
     ·玉米DOX 的序列分析第50-57页
   ·讨论第57-59页
     ·基因克隆的策略第57页
     ·DOX 基因编码产物功能分析第57-59页
第五章 总结论与创新第59-60页
   ·总结论第59页
   ·创新点第59-60页
参考文献第60-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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