摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第11-14页 |
1.1 肿瘤的侵袭转移 | 第11页 |
1.2 V-ATPase与肿瘤的侵袭转移 | 第11-12页 |
1.3 V-ATPase的结构功能及抑制剂 | 第12-13页 |
1.4 山荷叶素及其衍生物 | 第13-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-31页 |
2.1 实验材料 | 第14-18页 |
2.1.1 细胞株 | 第14页 |
2.1.2 试剂 | 第14-16页 |
2.1.3 溶液配制 | 第16-17页 |
2.1.4 实验仪器 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-31页 |
2.2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
2.2.2 MTT | 第19-20页 |
2.2.3 V-ATPase活性检测 | 第20页 |
2.2.4 溶酶体内pH的测定 | 第20页 |
2.2.5 细胞质pH的测定 | 第20-21页 |
2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第21-22页 |
2.2.7 台盼蓝染色法 | 第22页 |
2.2.8 Wounding healing实验(划痕实验) | 第22-23页 |
2.2.9 Transwell实验 | 第23页 |
2.2.10 明胶酶谱法 | 第23-25页 |
2.2.11 细胞免疫荧光 | 第25页 |
2.2.12 细胞RNA提取 | 第25-26页 |
2.2.13 逆转录 | 第26页 |
2.2.14 RT-PCR | 第26-27页 |
2.2.15 琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
2.2.16 蛋白免疫印迹 | 第28-30页 |
2.2.17 数据处理和统计学分析 | 第30-31页 |
第三章 结果 | 第31-52页 |
3.1 基于细胞迁移与V-ATPase活力的山荷叶素类糖苷的筛选 | 第31-34页 |
3.1.1 山荷叶素糖苷类化合物对MCF-7 细胞迁移能力的影响 | 第31-33页 |
3.1.2 山荷叶素糖苷类化合物对MCF-7 细胞V-ATPase活力的影响 | 第33-34页 |
3.2 mj-9e对细胞增殖的影响 | 第34-36页 |
3.2.1 mj-9e对肿瘤细胞及正常细胞活力的影响 | 第34-35页 |
3.2.2 mj-9e对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响 | 第35-36页 |
3.3 mj-9e对乳腺癌细胞V-ATPase活力的影响 | 第36-37页 |
3.4 mj-9e对乳腺癌细胞胞质pH和溶酶体pH的影响 | 第37-39页 |
3.5 mj-9e对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响 | 第39-42页 |
3.5.1 mj-9e对乳腺癌细胞迁移的影响 | 第39-40页 |
3.5.2 mj-9e对乳腺癌细胞侵袭的影响 | 第40-42页 |
3.6 mj-9e对乳腺癌细胞MMPs活化及表达的影响 | 第42-43页 |
3.7 mj-9e对 β-catenin通路的影响 | 第43-47页 |
3.7.1 mj-9e对 β-catenin蛋白表达及胞内分布的影响 | 第43-44页 |
3.7.2 mj-9e对 β-catenin及下游靶基因转录水平的影响 | 第44-45页 |
3.7.3 mj-9e对 β-catenin降解的影响 | 第45-47页 |
3.8 GSK3β 在mj-9e抑制 β-catenin通路的作用 | 第47-52页 |
3.8.1 mj-9e对GSK3β 磷酸化的影响 | 第47页 |
3.8.2 激活GSK3β 磷酸化对mj-9e抑制 β-catenin通路的影响 | 第47-50页 |
3.8.3 激活GSK3β 磷酸化对mj-9e抑制乳腺癌细胞迁移的影响 | 第50-52页 |
第四章 讨论 | 第52-56页 |
第五章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
英文缩写词表 | 第64-66页 |
综述 | 第66-83页 |
综述参考文献 | 第76-83页 |
在读硕士期间公开发表论文与参加项目 | 第83-84页 |
A:所参加项目 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |