摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第10-12页 |
第一章 文献研究 | 第12-17页 |
1.1 阿尔茨海默病 | 第12-13页 |
1.1.1 概述 | 第12页 |
1.1.2 流行病学 | 第12页 |
1.1.3 病理特征及发病机制 | 第12-13页 |
1.1.4 遗传因素 | 第13页 |
1.2 雌激素与阿尔茨海默病 | 第13-15页 |
1.2.1 阿尔茨海默病患病率的性别差异 | 第13-14页 |
1.2.2 雌激素对阿尔茨海默病的作用 | 第14页 |
1.2.3 雌激素对阿尔茨海默病的作用机制 | 第14-15页 |
1.3 CYP19A1与阿尔茨海默病 | 第15-17页 |
1.3.0 CYP的简介 | 第15页 |
1.3.1 CYP19A1的简介 | 第15页 |
1.3.2 CYP19A1与阿尔茨海默病的研究进展 | 第15-17页 |
第二章 海马神经元的培养与鉴定 | 第17-23页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 主要耗材 | 第17页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第17页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
2.1.5 主要溶液配制 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-20页 |
2.2.1 原代海马神经元的培养 | 第18-19页 |
2.2.2 免疫荧光鉴定海马神经元 | 第19-20页 |
2.3 实验结果 | 第20-21页 |
2.3.1 原代海马神经元 | 第20-21页 |
2.3.2 海马神经元免疫荧光鉴定 | 第21页 |
2.4 讨论 | 第21-23页 |
第三章 雌激素对Aβ_(25-35)诱导的阿尔茨海默病细胞模型的作用 | 第23-30页 |
3.1 实验材料 | 第23-24页 |
3.1.1 实验动物 | 第23页 |
3.1.2 主要耗材 | 第23页 |
3.1.3 主要实验试剂 | 第23页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第23页 |
3.1.5 主要溶液配制 | 第23-24页 |
3.2 实验方法 | 第24-25页 |
3.2.1 原代海马神经元的培养 | 第24页 |
3.2.2 药物处理 | 第24页 |
3.2.3 细胞活力检测 | 第24-25页 |
3.2.4 海马神经元凋亡的检测 | 第25页 |
3.3 统计学分析 | 第25-26页 |
3.4 实验结果 | 第26-29页 |
3.4.1 Aβ_(25-35)最佳造模浓度 | 第26页 |
3.4.2 DMSO溶媒稀释比的选择 | 第26-27页 |
3.4.3 17β-雌二醇对Aβ_(25-35)损伤的阿尔茨海默病细胞模型的作用 | 第27-29页 |
3.5 讨论 | 第29-30页 |
第四章 CYP19A1过表达慢病毒的构建及鉴定 | 第30-45页 |
4.1 实验材料 | 第30-31页 |
4.1.1 质粒、菌株与细胞 | 第30页 |
4.1.2 主要耗材 | 第30页 |
4.1.3 主要酶与试剂 | 第30页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第30-31页 |
4.1.5 1主要溶液配制 | 第31页 |
4.2 实验方法 | 第31-41页 |
4.2.1 CYP19A1荧光表达载体的构建 | 第31-36页 |
4.2.2 过表达CYP19A1的慢病毒包装及纯化 | 第36-41页 |
4.3 实验结果 | 第41-44页 |
4.3.1 CYP19A1序列的PCR扩增 | 第41-42页 |
4.3.2 CYP19A1载体酶切测序结果 | 第42-43页 |
4.3.3 慢病毒滴度的测定 | 第43页 |
4.3.4 目的质粒的表达情况的检测 | 第43-44页 |
4.4 讨论 | 第44-45页 |
第五章 CYP19A1过表达对阿尔茨海默病细胞模型的作用研究 | 第45-52页 |
5.1 实验材料 | 第45页 |
5.1.1 实验动物 | 第45页 |
5.1.2 主要耗材 | 第45页 |
5.1.3 主要实验试剂 | 第45页 |
5.1.4 主要仪器设备 | 第45页 |
5.1.5 主要溶液配制 | 第45页 |
5.2 实验方法 | 第45-47页 |
5.2.1 慢病毒感染海马神经元的最适感染复数的确定 | 第45-46页 |
5.2.2 CCK-8检测慢病毒转染对AD细胞模型活性影响 | 第46页 |
5.2.3 Hoechst 33258检测慢病毒转染对AD细胞模型凋亡的影响 | 第46-47页 |
5.3 统计学分析 | 第47页 |
5.4 实验结果 | 第47-50页 |
5.4.1 最适感染复数的确定 | 第47-49页 |
5.4.2 CYP19A1过表达对Aβ_(25-35)引起的海马神经元活性损伤的影响 | 第49页 |
5.4.3 CYP19A1过表达对Aβ_(25-35)引起的海马神经元凋亡的影响 | 第49-50页 |
5.5 讨论 | 第50-52页 |
结语 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 | 第57-58页 |
在校期间发表论文情况 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
统计学审核证明 | 第60页 |