| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第13-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-30页 |
| 2.1 材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第16页 |
| 2.1.2 实验耗材 | 第16页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 细胞培养和药物处理 | 第19页 |
| 2.2.2 真核细胞过表达及干扰RNA载体构建、转染与稳定表达 | 第19-20页 |
| 2.2.3 RNA提取、半定量PCR与定量PCR | 第20-22页 |
| 2.2.4 DNA提取和硫化处理 | 第22-23页 |
| 2.2.5 甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)及甲基化特异性定量PCR(MS-qPCR) | 第23-24页 |
| 2.2.6 硫酸氢钠测序法(Bisulfite sequencing) | 第24-26页 |
| 2.2.7 蛋白质免疫印迹分析 | 第26页 |
| 2.2.8 免疫荧光染色与免疫组化 | 第26-27页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀(Co-IP) | 第27页 |
| 2.2.10 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第27-28页 |
| 2.2.11 细胞生物学功能实验 | 第28-29页 |
| 2.2.12 统计学分析 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-49页 |
| 3.1 MZF1在人胃癌细胞中的表达及表观调控 | 第30-33页 |
| 3.1.1 MZF1在胃癌细胞中的表达 | 第30页 |
| 3.1.2 表观药物对人胃癌细胞中MZF1表达的影响 | 第30-31页 |
| 3.1.3 人胃癌细胞中MZF1基因启动子区甲基化状态 | 第31-32页 |
| 3.1.4 组蛋白乙酰化对人胃癌细胞系中MZF1基因的调控 | 第32-33页 |
| 3.2 人胃癌及配对癌旁组织中MZF1的表达及DNA甲基化状态的分析 | 第33-35页 |
| 3.2.1 原发性胃癌及配对癌旁组织样本中MZF1的表达水平 | 第33-34页 |
| 3.2.2 原发性胃癌及配对癌旁组织样本中MZF1基因启动子区DNA甲基化状态 | 第34-35页 |
| 3.3 MZF1在胃癌细胞中的生物学功能研究 | 第35-41页 |
| 3.3.1 过表达MZF1对胃癌细胞生物学功能的影响 | 第35-38页 |
| 3.3.2 降低MZF1表达对GES-1细胞生物学功能的影响 | 第38-41页 |
| 3.4 MZF1与MT2A的相关性研究 | 第41-49页 |
| 3.4.1 Co-IP分析MZF1与MT2A相互作用 | 第42-43页 |
| 3.4.2 MZF1与MT2A相关性的荧光共聚焦(Cofocal)定位分析 | 第43页 |
| 3.4.3 MZF1转录调节IκB-α表达的研究 | 第43-44页 |
| 3.4.4 通过干扰及过表达方法分析MZF1与MT2A的相互调控作用 | 第44-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 MT2A与MZF1基因的表观遗传学调控 | 第49-50页 |
| 4.2 MZF1基因的生物学功能 | 第50页 |
| 4.3 MZF1与MT2A之间的相互作用 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 作者简历 | 第58-60页 |
| 学位论文数据集 | 第60页 |
