摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
前言 | 第11-18页 |
1 概述 | 第11页 |
2 鹅细小病毒的生物学特性 | 第11-12页 |
3 鹅细小病毒基因结构及编码蛋白功能 | 第12-13页 |
4 鹅细小病毒病的流行 | 第13页 |
5 鹅细小病毒的致病机理及临床病理特征 | 第13-14页 |
6 鹅细小病毒病的防制 | 第14-15页 |
7 鹅细小病毒疫苗及禽痘病毒载体研究进展 | 第15-16页 |
8 研究的目的和意义 | 第16-18页 |
材料与方法 | 第18-29页 |
1 试验材料 | 第18-21页 |
1.1 病毒及实验材料 | 第18页 |
1.2 质粒 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
1.4 主要仪器设备 | 第19页 |
1.5 试验所需主要溶液的配制 | 第19-21页 |
2 试验方法 | 第21-29页 |
2.1 鸡胚成纤维细胞(CEF)制备 | 第21页 |
2.2 FPV-017种毒培养 | 第21页 |
2.3 引物的设计与合成 | 第21-22页 |
2.4 PCR扩增 | 第22-23页 |
2.5 重组禽痘病毒转移载体构建 | 第23-26页 |
2.6 pSY681-GPV-VP3质粒与FPV-017共转染鸡胚成纤维细胞 | 第26页 |
2.7 重组禽痘病毒筛选与纯化 | 第26-27页 |
2.8 重组禽痘病毒VP3基因的PCR鉴定 | 第27页 |
2.9 重组禽痘病毒的间接免疫荧光鉴定 | 第27页 |
2.10 重组禽痘病毒western blot鉴定 | 第27-28页 |
2.11 重组禽痘病毒滴度测定 | 第28-29页 |
结果 | 第29-34页 |
3.1 鹅细小病毒VP3基因的PCR扩增 | 第29页 |
3.2 pSY538-VP3重组质粒构建 | 第29-30页 |
3.3 pSY538-VP3-Lac Z重组质粒构建 | 第30-31页 |
3.4 pSY681-GPV-VP3重组质粒构建 | 第31页 |
3.5 获得重组禽痘病毒 | 第31-32页 |
3.6 重组禽痘病毒TCID_(50)测定 | 第32页 |
3.7 重组禽痘病毒VP3基因PCR鉴定 | 第32-33页 |
3.8 重组禽痘病毒的间接免疫荧光鉴定 | 第33页 |
3.9 重组禽痘病毒的Western blot鉴定 | 第33-34页 |
讨论 | 第34-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
作者简介 | 第44-45页 |
附录 | 第45页 |