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甲基丙烯酸酯类高性能基因载体的构建、制备与表征

学位论文数据集第4-5页
摘要第5-9页
ABSTRACT第9-14页
符号说明第25-26页
第一章 绪论第26-42页
    1.1 基因治疗第26-28页
    1.2 基因传递系统第28-32页
        1.2.1 用于传递基因的病毒载体第29页
        1.2.2 非病毒基因传递系统第29-30页
        1.2.3 化学法制备的非病毒基因载体第30-32页
            1.2.3.1 通过电荷吸引络合DNA的聚阳离子载体第30-32页
            1.2.3.2 DNA封装技术第32页
            1.2.3.3 DNA吸收第32页
    1.3 原子转移自由基聚合在生物医用材料方面的应用第32-40页
        1.3.1 ATRP法制备生物活性表面第33-35页
        1.3.2 ATRP法应用于制备阳离子聚合物基因载体第35-40页
            1.3.2.1 线型均聚物基因载体第36-37页
            1.3.2.2 线型嵌段共聚物基因载体第37-38页
            1.3.2.3 梳状共聚物基因载体第38-39页
            1.3.2.4 星状聚合物基因载体第39-40页
    1.4 课题的目的及意义第40-42页
第二章 可快速进行细胞染色的双功能基因载体第42-58页
    2.1 前言第42页
    2.2 实验部分第42-47页
        2.2.1 实验原料与试剂第42-44页
        2.2.2 实验仪器与设备第44页
        2.2.3 实验方法第44页
        2.2.4 双功能阳离子基因载体PBI-PGEA的制备第44-45页
        2.2.5 聚合物的化学及光谱学测试第45页
        2.2.6 载体的细胞标记性能测试第45-46页
        2.2.7 载体的转染能力测试第46-47页
            2.2.7.1 PBI-PGE-pDNA复合体的琼脂糖凝胶电泳测试第46页
            2.2.7.2 PBI-PGEA/pDNA复合体的粒径及电位测试第46-47页
            2.2.7.3 PBI-PGEA/pDNA复合体的转染能力测试第47页
    2.3 结果与讨论第47-57页
        2.3.1 双功能阳离子基因载体PBI-PGEA的制备第47-49页
        2.3.2 PBI-PGEA的光谱性质第49-50页
        2.3.3 PBI-PGEA的细胞标记性能测试第50-54页
        2.3.4 PBI-PGEA的转染能力测试第54-57页
    2.4 小结第57-58页
第三章 基于普鲁兰多糖构建可生物剪切的肝靶向性基因载体第58-80页
    3.1 前言第58页
    3.2 实验部分第58-64页
        3.2.1 实验原料与试剂第59-60页
        3.2.2 实验仪器与设备第60页
        3.2.3 实验方法第60页
        3.2.4 可生物剪切的肝靶向性阳离子基因载体PuPGEA的制备第60-61页
            3.2.4.1 可生物剪切的ATRP引发位点的引入第60-61页
            3.2.4.2 通过ATRP法合成普鲁兰基阳离子基因载体第61页
        3.2.5 阳离子基因载体PuPGEA的化学表征第61-62页
        3.2.6 聚合物/pDNA复合体的生理物理学测试第62页
            3.2.6.1 琼脂糖凝胶电泳测试第62页
            3.2.6.2 粒径及Zeta电位测试第62页
            3.2.6.3 PuPGEA/pDNA颗粒形态测试第62页
        3.2.7 载体的转染能力及细胞毒性测试第62-63页
            3.2.7.1 细胞毒性测试第63页
            3.2.7.2 体外转染效率测试第63页
        3.2.8 载体的肝靶向性测试第63-64页
        3.2.9 载体的溶血性测试第64页
    3.3 结果与讨论第64-79页
        3.3.1 可生物剪切的肝靶向性阳离子基因载体PuPGEA的制备及化学表征第64-68页
            3.3.1.1 阳离子基因载体PuPGEA的制备及核磁表征第64-67页
            3.3.1.2 阳离子基因载体PuPGEA的分子量表征第67-68页
            3.3.1.3 阳离子基因载体PuPGEA的生物可剪切性测试第68页
        3.3.2 载体与DNA复合体的生理物理学表征第68-71页
        3.3.3 载体的细胞毒性及转染能力表征第71-75页
            3.3.3.1 载体的细胞毒性测试第71-73页
            3.3.3.2 载体的体外基因转染效率第73-75页
        3.3.4 载体的肝靶向性测试第75-77页
        3.3.5 载体的溶血性测试第77-79页
    3.4 小结第79-80页
第四章 基于氧化石墨烯构建可生物剪切的基因/药物载体第80-102页
    4.1 前言第80页
    4.2 实验部分第80-87页
        4.2.1 实验原料与试剂第80-82页
        4.2.2 实验仪器与设备第82页
        4.2.3 实验方法第82页
        4.2.4 氧化石墨烯及可生物剪切的阳离子基因载体SS-GPD的制备第82-83页
            4.2.4.1 氧化石墨烯的制备第82-83页
            4.2.4.2 可生物剪切的ATRP引发位点的引入第83页
            4.2.4.3 可生物剪切的PDMAEMA功能化的氧化石墨烯的合成第83页
        4.2.5 氧化石墨烯及阳离子基因载体SS-GPD的表征第83-84页
            4.2.5.1 X射线光电子能谱测试第83-84页
            4.2.5.2 原子力显微镜测试第84页
            4.2.5.3 粒径及Zeta电位测试第84页
            4.2.5.4 样品的分散性测试第84页
            4.2.5.5 PDMAEMA链的分子量测试第84页
        4.2.6 载体与DNA复合体的表征第84-85页
            4.2.6.1 琼脂糖凝胶电泳测试第85页
            4.2.6.2 粒径及Zeta电位测试第85页
            4.2.6.3 颗粒形态测试第85页
        4.2.7 载体的细胞毒性及转染能力测试第85-86页
            4.2.7.1 细胞毒性测试第85-86页
            4.2.7.2 体外转染效率测试第86页
        4.2.8 载体的载药能力测试第86-87页
    4.3 结果与讨论第87-99页
        4.3.1 可生物剪切的阳离子基因载体SS-GPD的制备及表征第87-91页
        4.3.2 载体与DNA复合体的表征第91-94页
        4.3.3 载体的细胞毒性及转染能力表征第94-96页
            4.3.3.1 载体的细胞毒性测试第94-95页
            4.3.3.2 体外基因转染效率测试第95-96页
        4.3.4 载体的载药能力测试第96-99页
    4.4 小结第99-102页
第五章 基于季戊四醇构建高性能阳离子基因载体用于减轻小鼠心脏纤维化第102-124页
    5.1 前言第102-103页
    5.2 实验部分第103-108页
        5.2.1 实验原料与试剂第103-104页
        5.2.2 实验仪器与设备第104页
        5.2.3 实验方法第104页
        5.2.4 阳离子基因载体s-PGEA的制备第104-105页
        5.2.5 载体的化学表征第105页
        5.2.6 载体与miRNA复合体的生理物理学测试第105-106页
            5.2.6.1 粒径及Zeta电位测试第106页
            5.2.6.2 原子力显微镜(AFM)测试第106页
            5.2.6.3 载体的蛋白吸附实验第106页
        5.2.7 载体的转染能力及细胞毒性测试第106-107页
            5.2.7.1 细胞毒性测试第106页
            5.2.7.2 体外基因传递效率测试第106-107页
        5.2.8 载体携带miRNA减轻心脏纤维化的动物活体实验第107-108页
            5.2.8.1 验证载体/miRNA复合体在心脏部位聚集第107页
            5.2.8.2 载体/miRNA减轻小鼠心脏纤维化实验第107-108页
    5.3 结果与讨论第108-122页
        5.3.1 阳离子基因载体s-PGEA的制备及化学表征第108-109页
        5.3.2 载体的生理物理学测试第109-111页
            5.3.2.1 粒度及电位测试第109-110页
            5.3.2.2 原子力显微镜(AFM)测试第110-111页
            5.3.2.3 蛋白吸附实验第111页
        5.3.3 载体的转染能力及细胞毒性测试第111-116页
            5.3.3.1 细胞毒性测试第111-113页
            5.3.3.2 基因传递能力测试第113-116页
        5.3.4 载体携带miRNA减轻心脏纤维化的动物活体实验第116-122页
            5.3.4.1 验证载体/miRNA在心脏部位聚集第116-119页
            5.3.4.2 验证载体/miRNA减轻小鼠心脏纤维化第119-122页
    5.4 小结第122-124页
第六章 结论第124-126页
参考文献第126-144页
致谢第144-146页
研究成果及发表的学术论文第146-148页
作者简介第148-150页
导师简介第150-151页
博士研究生学位论文答辩委员会决议书第151-152页

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