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桃蔗糖转运蛋白家族基因的克隆与表达分析

致谢第4-8页
摘要第8-10页
缩写词第10-11页
1 文献综述第11-16页
    1.1 植物蔗糖转运蛋白的研究意义第11-12页
        1.1.1 蔗糖转运与蔗糖转运蛋白第11页
        1.1.2 蔗糖转运蛋白的研究意义第11-12页
    1.2 植物蔗糖转运蛋白的结构和分类第12-13页
        1.2.1 植物蔗糖转运蛋白的结构第12页
        1.2.2 植物转运蛋白的分类第12-13页
    1.3 蔗糖转运蛋白在果树中的研究进展第13-14页
    1.4 蔗糖转运蛋白基因的定量分析方法第14-15页
    1.5 研究桃蔗糖转运蛋白的意义第15-16页
2 引言第16-17页
3 材料与方法第17-25页
    3.1 试验材料第17-18页
        3.1.1 植物材料第17-18页
            3.1.1.1 花期试验材料第18页
            3.1.1.2 果实发育期试验材料第18页
        3.1.2 菌株、酶及主要试剂第18页
        3.1.3 主要仪器设备第18页
    3.2 试验方法第18-25页
        3.2.1 桃花期和果实发育期不同器官总RNA的提取第18-19页
            3.2.1.1 桃叶片总RNA的提取第18-19页
            3.2.1.2 桃果实、花瓣、雄蕊、雌蕊总RNA的提取第19页
            3.2.1.3 桃韧皮部和萼片总RNA的提取第19页
        3.2.2 总RNA纯度与浓度的检测第19页
        3.2.3 总RNA完整性的检测第19页
        3.2.4 c DNA第一链的合成及质量检测第19-20页
        3.2.5 PpSUT1基因克隆第20-23页
            3.2.5.0 RACE-Ready cDNA的准备第20-21页
            3.2.5.1 Rapid Amplification of cDNA Ends(RACE)第21页
            3.2.5.2 PCR扩增产物的检测和回收纯化第21-22页
            3.2.5.3 回收产物与p MDTM18-T载体的连接第22页
            3.2.5.4 含目的片段的重组质粒的转化第22页
            3.2.5.5 重组质粒的PCR鉴定第22页
            3.2.5.6 质粒DNA的提取及测序第22-23页
        3.2.6 PpSUT1基因序列分析第23页
        3.2.7 蔗糖转运蛋白家族基因(SUTs)序列对比分析第23页
        3.2.8 蔗糖转运蛋白家族基因(SUTs)时空及组织特异性表达第23-25页
            3.2.8.1 实时荧光定量引物的设计与检测第23-24页
            3.2.8.2 花期SUTs时空及组织特异性表达第24页
            3.2.8.3 果实发育期SUTs时空及组织特异性表达第24-25页
4 结果与分析第25-39页
    4.1 桃花期和果实发育期不同器官总RNA的提取第25-26页
    4.2 cDNA及实时荧光定量引物的质量检测第26页
    4.3 桃蔗糖转运蛋白基因PpSUT1克隆第26页
    4.4 PpSUT1的序列分析第26-28页
    4.5 PpSUT1编码的氨基酸的跨膜结构分析第28-30页
    4.6 桃SUTs的生物信息学对比分析第30-34页
        4.6.1 桃SUTs氨基酸序列相似性分析第30-33页
        4.6.2 桃SUTs亲缘关系及分类比较第33页
        4.6.3 桃SUTs的跨膜结构分析第33-34页
    4.7 桃SUTs的器官及时空表达特性第34-39页
        4.7.1 桃SUTs在花期的表达特性第34-37页
        4.7.2 桃SUTs在果实发育期的表达特性第37-39页
5 讨论与结论第39-42页
    5.1 讨论第39-41页
        5.1.1 PpSUT1基因的序列分析第39页
        5.1.2 桃SUTs的生物信息学分析第39-40页
        5.1.3 桃SUTs基因的组织及时空表达特性第40-41页
    5.2 结论第41-42页
附录第42-44页
参考文献第44-50页
Abstract第50-51页

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