致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
缩写词 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-16页 |
1.1 植物蔗糖转运蛋白的研究意义 | 第11-12页 |
1.1.1 蔗糖转运与蔗糖转运蛋白 | 第11页 |
1.1.2 蔗糖转运蛋白的研究意义 | 第11-12页 |
1.2 植物蔗糖转运蛋白的结构和分类 | 第12-13页 |
1.2.1 植物蔗糖转运蛋白的结构 | 第12页 |
1.2.2 植物转运蛋白的分类 | 第12-13页 |
1.3 蔗糖转运蛋白在果树中的研究进展 | 第13-14页 |
1.4 蔗糖转运蛋白基因的定量分析方法 | 第14-15页 |
1.5 研究桃蔗糖转运蛋白的意义 | 第15-16页 |
2 引言 | 第16-17页 |
3 材料与方法 | 第17-25页 |
3.1 试验材料 | 第17-18页 |
3.1.1 植物材料 | 第17-18页 |
3.1.1.1 花期试验材料 | 第18页 |
3.1.1.2 果实发育期试验材料 | 第18页 |
3.1.2 菌株、酶及主要试剂 | 第18页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第18页 |
3.2 试验方法 | 第18-25页 |
3.2.1 桃花期和果实发育期不同器官总RNA的提取 | 第18-19页 |
3.2.1.1 桃叶片总RNA的提取 | 第18-19页 |
3.2.1.2 桃果实、花瓣、雄蕊、雌蕊总RNA的提取 | 第19页 |
3.2.1.3 桃韧皮部和萼片总RNA的提取 | 第19页 |
3.2.2 总RNA纯度与浓度的检测 | 第19页 |
3.2.3 总RNA完整性的检测 | 第19页 |
3.2.4 c DNA第一链的合成及质量检测 | 第19-20页 |
3.2.5 PpSUT1基因克隆 | 第20-23页 |
3.2.5.0 RACE-Ready cDNA的准备 | 第20-21页 |
3.2.5.1 Rapid Amplification of cDNA Ends(RACE) | 第21页 |
3.2.5.2 PCR扩增产物的检测和回收纯化 | 第21-22页 |
3.2.5.3 回收产物与p MDTM18-T载体的连接 | 第22页 |
3.2.5.4 含目的片段的重组质粒的转化 | 第22页 |
3.2.5.5 重组质粒的PCR鉴定 | 第22页 |
3.2.5.6 质粒DNA的提取及测序 | 第22-23页 |
3.2.6 PpSUT1基因序列分析 | 第23页 |
3.2.7 蔗糖转运蛋白家族基因(SUTs)序列对比分析 | 第23页 |
3.2.8 蔗糖转运蛋白家族基因(SUTs)时空及组织特异性表达 | 第23-25页 |
3.2.8.1 实时荧光定量引物的设计与检测 | 第23-24页 |
3.2.8.2 花期SUTs时空及组织特异性表达 | 第24页 |
3.2.8.3 果实发育期SUTs时空及组织特异性表达 | 第24-25页 |
4 结果与分析 | 第25-39页 |
4.1 桃花期和果实发育期不同器官总RNA的提取 | 第25-26页 |
4.2 cDNA及实时荧光定量引物的质量检测 | 第26页 |
4.3 桃蔗糖转运蛋白基因PpSUT1克隆 | 第26页 |
4.4 PpSUT1的序列分析 | 第26-28页 |
4.5 PpSUT1编码的氨基酸的跨膜结构分析 | 第28-30页 |
4.6 桃SUTs的生物信息学对比分析 | 第30-34页 |
4.6.1 桃SUTs氨基酸序列相似性分析 | 第30-33页 |
4.6.2 桃SUTs亲缘关系及分类比较 | 第33页 |
4.6.3 桃SUTs的跨膜结构分析 | 第33-34页 |
4.7 桃SUTs的器官及时空表达特性 | 第34-39页 |
4.7.1 桃SUTs在花期的表达特性 | 第34-37页 |
4.7.2 桃SUTs在果实发育期的表达特性 | 第37-39页 |
5 讨论与结论 | 第39-42页 |
5.1 讨论 | 第39-41页 |
5.1.1 PpSUT1基因的序列分析 | 第39页 |
5.1.2 桃SUTs的生物信息学分析 | 第39-40页 |
5.1.3 桃SUTs基因的组织及时空表达特性 | 第40-41页 |
5.2 结论 | 第41-42页 |
附录 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
Abstract | 第50-51页 |