致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 绪论 | 第14-30页 |
1.1 木瓜蛋白酶 | 第14-19页 |
1.1.1 木瓜蛋白酶简介 | 第14页 |
1.1.2 木瓜蛋白酶的催化机制 | 第14-16页 |
1.1.3 固定化木瓜蛋白酶的研究现状 | 第16-19页 |
1.2 基于修饰的酶固定化 | 第19-24页 |
1.2.1 固定化酶的后续修饰处理 | 第20页 |
1.2.2 固定化之前酶的修饰改造 | 第20-24页 |
1.3 凝胶载体固定化酶 | 第24-28页 |
1.3.1 物理凝胶载体固定化酶 | 第25-26页 |
1.3.2 化学凝胶载体固定化酶 | 第26-28页 |
1.4 本文研究内容 | 第28-30页 |
2 修饰-包埋酶的制备及其催化性能的考察 | 第30-54页 |
2.1 前言 | 第30页 |
2.2 实验材料与设备 | 第30-31页 |
2.2.1 实验材料 | 第30页 |
2.2.2 实验仪器 | 第30-31页 |
2.3 实验内容 | 第31-39页 |
2.3.1 木瓜蛋白酶酶液的配制 | 第31页 |
2.3.2 蛋白质含量的测定-考马斯亮蓝染色法 | 第31-32页 |
2.3.3 游离L-酪氨酸的测定-紫外分光光度法 | 第32-33页 |
2.3.4 游离木瓜蛋白酶水解活性测定 | 第33-34页 |
2.3.5 木瓜蛋白酶表面的修饰 | 第34-35页 |
2.3.6 修饰-包埋酶的制备 | 第35-36页 |
2.3.7 固定化酶活性测定 | 第36-37页 |
2.3.8 温度对修饰-包埋酶活性的影响 | 第37页 |
2.3.9 不同酸碱度对修饰-包埋酶活性的影响 | 第37-38页 |
2.3.10 变性剂对修饰-包埋酶活性的影响 | 第38页 |
2.3.11 游离酶与固定化酶的米氏常数 | 第38页 |
2.3.12 修饰-包埋酶的重复使用性 | 第38-39页 |
2.4 结果与讨论 | 第39-51页 |
2.4.1 木瓜蛋白酶表面的修饰 | 第39-42页 |
2.4.2 木瓜蛋白酶的包埋 | 第42-46页 |
2.4.3 温度对修饰-包埋酶活性的影响 | 第46-47页 |
2.4.4 pH值对修饰-包埋酶活性的影响 | 第47-48页 |
2.4.5 变性剂对修饰-包埋酶活性的影响 | 第48-49页 |
2.4.6 游离酶与固定化酶的米氏常数 | 第49-50页 |
2.4.7 修饰-包埋酶的重复使用性 | 第50页 |
2.4.8 修饰-包埋酶的储存稳定性 | 第50-51页 |
2.5 小结 | 第51-54页 |
3 紫外引发原位聚合包埋酶的制备及其催化性能的考察 | 第54-64页 |
3.1 前言 | 第54页 |
3.2 实验材料与设备 | 第54页 |
3.2.1 实验材料 | 第54页 |
3.2.2 实验设备 | 第54页 |
3.3 实验内容 | 第54-56页 |
3.3.1 紫外光照聚合时间 | 第54-55页 |
3.3.2 紫外光引发原位聚合包埋酶的制备 | 第55页 |
3.3.3 聚合物溶胀率测定-称重法 | 第55-56页 |
3.3.4 温度对紫外光引发原位聚合包埋酶活性的影响 | 第56页 |
3.3.5 pH值对紫外光引发原位聚合包埋酶活性的影响 | 第56页 |
3.3.6 紫外光引发原位聚合包埋酶的米氏常数 | 第56页 |
3.3.7 紫外光引发原位聚合包埋酶的重复使用性 | 第56页 |
3.4 结果与讨论 | 第56-62页 |
3.4.1 紫外光对游离酶活性的影响 | 第56-57页 |
3.4.2 紫外光引发原位聚合包埋酶的性质 | 第57-58页 |
3.4.3 紫外光引发原位聚合包埋酶的催化活性 | 第58-59页 |
3.4.4 温度对紫外光引发原位聚合包埋酶活性的影响 | 第59-60页 |
3.4.5 pH值对紫外光引发原位聚合包埋酶活性的影响 | 第60页 |
3.4.6 紫外光引发原位聚合包埋酶的米氏常数 | 第60-61页 |
3.4.7 紫外光引发原位聚合包埋酶的重复使用性 | 第61页 |
3.4.8 紫外光引发原位聚合包埋酶的储存稳定性 | 第61-62页 |
3.5 小结 | 第62-64页 |
4 冷冻凝胶包埋酶的制备及其催化性能的考察 | 第64-84页 |
4.1 前言 | 第64页 |
4.2 实验材料与设备 | 第64页 |
4.2.1 实验材料 | 第64页 |
4.2.2 实验设备 | 第64页 |
4.3 实验内容 | 第64-68页 |
4.3.1 单体与交联剂的配比 | 第64-65页 |
4.3.2 引发剂用量的选择 | 第65页 |
4.3.3 冷冻温度的选择 | 第65-66页 |
4.3.4 冷冻时间的选择 | 第66页 |
4.3.5 温度对冷冻凝胶溶胀率的影响 | 第66-67页 |
4.3.6 温度对冷冻凝胶包埋酶活性的影响 | 第67页 |
4.3.7 pH值对冷冻凝胶包埋酶溶胀率的影响 | 第67页 |
4.3.8 pH值对冷冻凝胶包埋酶活性的影响 | 第67页 |
4.3.9 有机溶剂对冷冻凝胶溶胀率的影响 | 第67页 |
4.3.10 有机溶剂对冷冻凝胶包埋酶催化性能的影响 | 第67-68页 |
4.3.11 冷冻凝胶包埋酶的米氏常数 | 第68页 |
4.3.12 冷冻凝胶包埋酶的重复使用性 | 第68页 |
4.4 结果与讨论 | 第68-81页 |
4.4.1 单体与交联剂的配比 | 第68-70页 |
4.4.2 引发剂用量的选择 | 第70页 |
4.4.3 聚合溶液冷冻温度的选择 | 第70-71页 |
4.4.4 聚合溶液冷冻时间的选择 | 第71页 |
4.4.5 温度对冷冻凝胶溶胀率的影响 | 第71-73页 |
4.4.6 温度对冷冻凝胶包埋酶活性的影响 | 第73-74页 |
4.4.7 pH值对冷冻凝胶溶胀率的影响 | 第74-76页 |
4.4.8 pH值对冷冻凝胶包埋酶活性的影响 | 第76-77页 |
4.4.9 有机溶剂对冷冻凝胶溶胀率的影响 | 第77-79页 |
4.4.10 有机溶剂对冷冻凝胶包埋酶催化性能的影响 | 第79-80页 |
4.4.11 冷冻凝胶包埋酶的米氏常数 | 第80页 |
4.4.12 冷冻凝胶包埋酶的重复使用性 | 第80-81页 |
4.4.13 冷冻凝胶包埋酶的储存稳定性 | 第81页 |
4.5 小结 | 第81-84页 |
5 三种包埋酶的比较 | 第84-92页 |
5.1 前言 | 第84页 |
5.2 实验材料与设备 | 第84页 |
5.3 实验内容 | 第84-85页 |
5.3.1 三种包埋酶的制备 | 第84页 |
5.3.2 三种包埋酶的扫描电镜分析 | 第84-85页 |
5.3.3 三种包埋酶的稳定性比较 | 第85页 |
5.3.4 三种包埋酶的米氏常数比较 | 第85页 |
5.4 结果与讨论 | 第85-91页 |
5.4.1 三种包埋酶的扫描电镜分析 | 第85-87页 |
5.4.2 三种包埋酶的活性收率 | 第87-88页 |
5.4.3 三种包埋酶的稳定性 | 第88-91页 |
5.4.4 三种包埋酶的米氏常数比较 | 第91页 |
5.5 小结 | 第91-92页 |
6 结论与建议 | 第92-96页 |
6.1 结论 | 第92-94页 |
6.2 建议 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-104页 |
作者简介及在学期间所获得的科研成果 | 第104页 |