中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 PIFs是一类转录因子 | 第12页 |
1.2 PIFs在光信号通路中的作用 | 第12-19页 |
1.2.1 PIFs蛋白的结构 | 第12-13页 |
1.2.2 phy调节PIF的含量和活性,而PIF又负反馈调节phyB的水平 | 第13-15页 |
1.2.3 PIFs和phy的相互拮抗影响幼苗生长的各个阶段 | 第15-16页 |
1.2.4 PIFs调控的转录网络在幼苗各个生长时期的作用 | 第16-18页 |
1.2.4.1 PIFs在种子萌发时期的作用 | 第16-17页 |
1.2.4.2 PIFs在幼苗形态建成中作用 | 第17页 |
1.2.4.3 PIFs在遮阴环境下的作用 | 第17-18页 |
1.2.4.4 PIFs在节律环境下的作用 | 第18页 |
1.2.5 PIFs靶基因的功能描述 | 第18-19页 |
1.3 PIFs对各路信号途径的综合 | 第19-22页 |
1.3.1 与激素信号途径的相互影响 | 第19-21页 |
1.3.1.1 PIFs在赤霉素信号转导中的作用 | 第19页 |
1.3.1.2 PIFs在油菜素内酯信号转导中的作用 | 第19-20页 |
1.3.1.3 PIFs在茉莉酸信号转导中的作用 | 第20页 |
1.3.1.4 PIFs在乙烯信号转导中的作用 | 第20页 |
1.3.1.5 PIFs诱导生长素的合成 | 第20-21页 |
1.3.1.6 PIFs在一氧化氮信号转导中的作用 | 第21页 |
1.3.2 PIFs的表达受生物钟信号的调控 | 第21-22页 |
1.4 PIFs在作物中的研究进展 | 第22页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-36页 |
2.1 实验材料 | 第23-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 植物材料培养与处理 | 第23页 |
2.1.3 菌株与载体 | 第23页 |
2.1.4 酶和各种生化试剂 | 第23-24页 |
2.1.5 PCR引物 | 第24-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-36页 |
2.2.1 qRT-PCR分析玉米ZmPIFs基因家族的表达 | 第26页 |
2.2.2 对遮阴玉米RNA-seq中ZmPIFs基因表达量变化的分析 | 第26页 |
2.2.3 植物总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.4 cDNA第一条链的合成 | 第27-28页 |
2.2.5 玉米ZmPIFs基因家族的克隆 | 第28-29页 |
2.2.6 真核表达载体的构建及拟南芥转化 | 第29-36页 |
2.2.6.1 目的条带的回收 | 第29页 |
2.2.6.2 目的条带与克隆载体的连接 | 第29-30页 |
2.2.6.3 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
2.2.6.4 转化和阳性克隆的筛选 | 第30页 |
2.2.6.5 碱裂解法提取大肠杆菌质粒DNA | 第30-31页 |
2.2.6.6 双酶切法验证重组质粒 | 第31页 |
2.2.6.7 表达载体的构建 | 第31-32页 |
2.2.6.8 农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第32页 |
2.2.6.9 农杆菌浸泡法转化拟南芥 | 第32-34页 |
2.2.6.10 转基因拟南芥的PCR鉴定与抗性筛选 | 第34页 |
2.2.6.11 转基因拟南芥表型的鉴定 | 第34-35页 |
2.2.6.12 转基因拟南芥的淀粉染色分析 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-51页 |
3.1 玉米ZmPIFs基因家族成员的确定 | 第36-38页 |
3.1.1 玉米ZmPIFs基因家族成员的序列分析和结构域预测 | 第36-37页 |
3.1.2 玉米ZmPIFs基因家族成员氨基酸保守性分析和蛋白结构域预测 | 第37-38页 |
3.2 玉米ZmPIFs基因家族成员时空表达特异性的检测 | 第38-42页 |
3.2.1 玉米ZmPIFs基因家族成员在短日下的节律性表达 | 第38-39页 |
3.2.2 玉米ZmPIFs基因家族成员在玉米不同部位表达差异的检测 | 第39-40页 |
3.2.3 玉米ZmPIFs基因家族成员在玉米不同发育时期表达差异的检测 | 第40-41页 |
3.2.4 玉米ZmPIFs基因家族成员的表达对遮阴处理的响应 | 第41-42页 |
3.3 玉米ZmPIFs基因在拟南芥中的功能验证 | 第42-51页 |
3.3.1 玉米ZmPIFs基因家族成员的基因克隆 | 第42-44页 |
3.3.2 玉米ZmPIFs基因表达的可变剪切模式 | 第44-45页 |
3.3.3 bHLH44转基因拟南芥植株的下胚轴长度测定 | 第45-46页 |
3.3.4 bHLH44转基因拟南芥植株的子叶张开角度测定 | 第46-47页 |
3.3.5 bHLH44转基因拟南芥植株的向重力性测定 | 第47-49页 |
3.3.6 bHLH44转基因拟南芥植株的淀粉含量测定 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62页 |