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菊花DREB同源基因的克隆和功能分析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表及其英汉对照第12-13页
第一部分 文献综述第13-56页
    第一章 参与植物非生物胁迫的转录因子第13-27页
        1 转录因子第14-16页
            1.1 植物转录因子的结构第14-15页
            1.2 转录因子的活性与表达第15-16页
            1.3 植物转录因子的分类第16页
        2 与逆境相关的转录因子第16-23页
            2.1 AP2/EREBP转录因子第17页
            2.2 bZIP转录因子第17-18页
            2.3 MYB/MYC转录因子第18-19页
            2.4 锌指蛋白第19-21页
            2.5 NAC转录因子第21-22页
            2.6 HSF转录因子第22-23页
        3 响应植物胁迫的转录调控网络第23-27页
            3.1 调控网络的复杂性第25页
            3.2 调控网络的保守性第25-27页
    第二章 AP2/EREBP转录因子家族研究进展第27-38页
        1 AP2/EREBP转录因子的结构第27-28页
        2 AP2/ERF的分类研究第28页
        3 AP2/EREBP家族的进化第28-30页
            3.1 AP2亚家族的进化第28-30页
            3.2 ERF亚家族的进化第30页
        4 AP2/EREBP蛋白与目标DNA的结合第30-32页
            4.1 AP2亚家族转录因子与目标DNA的结合第30-31页
            4.2 EREBP亚家族转录因子与目标DNA的结合第31-32页
        5 AP2/EREBP家族转录因子的功能第32-34页
            5.1 AP2亚家族转录因子的功能第32-33页
            5.2 EREBP亚家族转录因子的功能第33-34页
        6 DREB转录因子研究进展第34-38页
    第三章 单核苷酸多态性研究进展第38-47页
        1 SNP的定义、类型和分布第38-39页
        2 SNP的检测方法第39-42页
            2.1 基于数据库的SNP筛选第39-41页
            2.2 检测SNP的实验方法第41-42页
        3 SNP在作物遗传改良中的研究进展第42-46页
            3.1 利用SNP标记构建高密度遗传连锁图谱第42-43页
            3.2 遗传图谱和物理图谱的整合第43页
            3.3 群体遗传学和连锁不平衡第43-45页
            3.4 基于SNP的关联分析第45页
            3.5 SNP应用于进化和种群多样性的研究第45-46页
        4 问题与展望第46-47页
    第四章 分子生物学技术在菊花育种中的应用第47-55页
        1 分子标记技术的应用第48-50页
            1.1 RAPD标记的应用第48-49页
            1.2 AFLR标记的应用第49-50页
        2 基因克隆技术第50-51页
        3 基因工程的应用第51-55页
            3.1 菊花转化再生体系的建立第52页
            3.2 菊花花色的基因工程第52-53页
            3.3 改变菊花花型和株型的基因工程第53页
            3.4 改变菊花花期的基因工程第53页
            3.5 提高菊花抗性(病虫、逆境)的基因工程第53-55页
    本研究目的意义第55-56页
第二部分 研究报告第56-99页
    第五章 菊花DmDREBs基因的克隆与鉴定第56-76页
        1 材料与方法第56-61页
            1.1 植物材料第56页
            1.2 菌株和载体第56-57页
            1.3 主要试剂第57页
            1.4 菊花基因组DNA和总RNA的提取第57页
            1.5 cDNA第一链的合成第57页
            1.6 引物的设计第57-58页
            1.7 PCR产物的克隆与测序第58页
            1.8 全长序列的获得第58页
            1.9 序列分析第58-59页
            1.10 系统发育分析第59页
            1.11 Southern杂交第59页
            1.12 Quantitative Real-Time PCR分析第59-60页
            1.13 亚细胞定位第60页
            1.14 结合活性分析第60-61页
            1.15 转录激活活性分析第61页
        2 结果与分析第61-73页
            2.1 DmDREBa/b基因的克隆和序列分析第61-64页
            2.2 DmDREBs蛋白系统发育分析第64-66页
            2.3 DmDREBa/b基因的组织表达特异性第66页
            2.4 DmDREBa/b基因在非生物胁迫下的表达模式第66-68页
            2.5 Southern杂交分析第68-69页
            2.6 DmDREB蛋白与DRE元件的结合活性第69-70页
            2.7 转录激活活性分析第70-72页
            2.8 DmDREBs蛋白的亚细胞定位第72-73页
        3 讨论第73-76页
    第六章 DmDREBa基因转化烟草及功能分析第76-89页
        1.材料与方法第76-80页
            1.1 实验材料第76页
            1.2 宿主菌与质粒载体第76页
            1.3 表达载体的构建第76-77页
            1.4 农杆菌叶盘浸染法转化烟草第77-78页
            1.5 转基因阳性植株的鉴定第78页
            1.6 转基因烟草的Southern杂交分析第78-79页
            1.7 低温、干旱和高盐条件对T_0代转基因烟草定性分析第79页
            1.8 蒸腾失水速率实验第79页
            1.9 叶片上下表皮的气孔密度检测第79页
            1.10 T_1代转基因烟草的分离比分析第79-80页
            1.11 T_1代转基因烟草MDA含量测定第80页
        2 结果与分析第80-87页
            2.1 植物表达载体构建第80页
            2.2 转基因烟草阳性检测第80-81页
            2.4 转基因烟草Southern blot分析第81-82页
            2.5 低温、干旱以及高盐对转基因烟草的影响第82-83页
            2.6 转35S:DmDREBa基因烟草叶片蒸腾失水分析第83-84页
            2.7 叶片上下表皮的气孔密度检测第84-86页
            2.8 T_1代转基因烟草的分离比分析第86页
            2.10 低温胁迫对转35S:DmDREBa基因T_1烟草叶片的MDA含量的影响第86-87页
        3 讨论第87-89页
    第七章 野生菊和栽培菊DmDREBb基因核苷酸多态性研究第89-99页
        1 材料与方法第89-91页
            1.1 实验材料第89-90页
            1.2 实验方法第90-91页
            1.3 生物信息学分析第91页
        2 结果与分析第91-96页
            2.1 菊花DmDREBb基因的单核苷酸多态性分布和频率第91-93页
            2.2 菊花DmDREBb基因位点多态性的类型分析第93页
            2.3 DmDREBb基因位点的LD分析第93-94页
            2.4 DmDREBb基因编码区多态性模式分析第94-96页
            2.5 野生菊和栽培菊系统发育进化树分析第96页
        3 讨论第96-99页
全文结论第99-101页
本研究创新之处第101-102页
参考文献第102-123页
附录第123-135页
论文写作与发表第135-137页
致谢第137页

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