摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表及其英汉对照 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-56页 |
第一章 参与植物非生物胁迫的转录因子 | 第13-27页 |
1 转录因子 | 第14-16页 |
1.1 植物转录因子的结构 | 第14-15页 |
1.2 转录因子的活性与表达 | 第15-16页 |
1.3 植物转录因子的分类 | 第16页 |
2 与逆境相关的转录因子 | 第16-23页 |
2.1 AP2/EREBP转录因子 | 第17页 |
2.2 bZIP转录因子 | 第17-18页 |
2.3 MYB/MYC转录因子 | 第18-19页 |
2.4 锌指蛋白 | 第19-21页 |
2.5 NAC转录因子 | 第21-22页 |
2.6 HSF转录因子 | 第22-23页 |
3 响应植物胁迫的转录调控网络 | 第23-27页 |
3.1 调控网络的复杂性 | 第25页 |
3.2 调控网络的保守性 | 第25-27页 |
第二章 AP2/EREBP转录因子家族研究进展 | 第27-38页 |
1 AP2/EREBP转录因子的结构 | 第27-28页 |
2 AP2/ERF的分类研究 | 第28页 |
3 AP2/EREBP家族的进化 | 第28-30页 |
3.1 AP2亚家族的进化 | 第28-30页 |
3.2 ERF亚家族的进化 | 第30页 |
4 AP2/EREBP蛋白与目标DNA的结合 | 第30-32页 |
4.1 AP2亚家族转录因子与目标DNA的结合 | 第30-31页 |
4.2 EREBP亚家族转录因子与目标DNA的结合 | 第31-32页 |
5 AP2/EREBP家族转录因子的功能 | 第32-34页 |
5.1 AP2亚家族转录因子的功能 | 第32-33页 |
5.2 EREBP亚家族转录因子的功能 | 第33-34页 |
6 DREB转录因子研究进展 | 第34-38页 |
第三章 单核苷酸多态性研究进展 | 第38-47页 |
1 SNP的定义、类型和分布 | 第38-39页 |
2 SNP的检测方法 | 第39-42页 |
2.1 基于数据库的SNP筛选 | 第39-41页 |
2.2 检测SNP的实验方法 | 第41-42页 |
3 SNP在作物遗传改良中的研究进展 | 第42-46页 |
3.1 利用SNP标记构建高密度遗传连锁图谱 | 第42-43页 |
3.2 遗传图谱和物理图谱的整合 | 第43页 |
3.3 群体遗传学和连锁不平衡 | 第43-45页 |
3.4 基于SNP的关联分析 | 第45页 |
3.5 SNP应用于进化和种群多样性的研究 | 第45-46页 |
4 问题与展望 | 第46-47页 |
第四章 分子生物学技术在菊花育种中的应用 | 第47-55页 |
1 分子标记技术的应用 | 第48-50页 |
1.1 RAPD标记的应用 | 第48-49页 |
1.2 AFLR标记的应用 | 第49-50页 |
2 基因克隆技术 | 第50-51页 |
3 基因工程的应用 | 第51-55页 |
3.1 菊花转化再生体系的建立 | 第52页 |
3.2 菊花花色的基因工程 | 第52-53页 |
3.3 改变菊花花型和株型的基因工程 | 第53页 |
3.4 改变菊花花期的基因工程 | 第53页 |
3.5 提高菊花抗性(病虫、逆境)的基因工程 | 第53-55页 |
本研究目的意义 | 第55-56页 |
第二部分 研究报告 | 第56-99页 |
第五章 菊花DmDREBs基因的克隆与鉴定 | 第56-76页 |
1 材料与方法 | 第56-61页 |
1.1 植物材料 | 第56页 |
1.2 菌株和载体 | 第56-57页 |
1.3 主要试剂 | 第57页 |
1.4 菊花基因组DNA和总RNA的提取 | 第57页 |
1.5 cDNA第一链的合成 | 第57页 |
1.6 引物的设计 | 第57-58页 |
1.7 PCR产物的克隆与测序 | 第58页 |
1.8 全长序列的获得 | 第58页 |
1.9 序列分析 | 第58-59页 |
1.10 系统发育分析 | 第59页 |
1.11 Southern杂交 | 第59页 |
1.12 Quantitative Real-Time PCR分析 | 第59-60页 |
1.13 亚细胞定位 | 第60页 |
1.14 结合活性分析 | 第60-61页 |
1.15 转录激活活性分析 | 第61页 |
2 结果与分析 | 第61-73页 |
2.1 DmDREBa/b基因的克隆和序列分析 | 第61-64页 |
2.2 DmDREBs蛋白系统发育分析 | 第64-66页 |
2.3 DmDREBa/b基因的组织表达特异性 | 第66页 |
2.4 DmDREBa/b基因在非生物胁迫下的表达模式 | 第66-68页 |
2.5 Southern杂交分析 | 第68-69页 |
2.6 DmDREB蛋白与DRE元件的结合活性 | 第69-70页 |
2.7 转录激活活性分析 | 第70-72页 |
2.8 DmDREBs蛋白的亚细胞定位 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
第六章 DmDREBa基因转化烟草及功能分析 | 第76-89页 |
1.材料与方法 | 第76-80页 |
1.1 实验材料 | 第76页 |
1.2 宿主菌与质粒载体 | 第76页 |
1.3 表达载体的构建 | 第76-77页 |
1.4 农杆菌叶盘浸染法转化烟草 | 第77-78页 |
1.5 转基因阳性植株的鉴定 | 第78页 |
1.6 转基因烟草的Southern杂交分析 | 第78-79页 |
1.7 低温、干旱和高盐条件对T_0代转基因烟草定性分析 | 第79页 |
1.8 蒸腾失水速率实验 | 第79页 |
1.9 叶片上下表皮的气孔密度检测 | 第79页 |
1.10 T_1代转基因烟草的分离比分析 | 第79-80页 |
1.11 T_1代转基因烟草MDA含量测定 | 第80页 |
2 结果与分析 | 第80-87页 |
2.1 植物表达载体构建 | 第80页 |
2.2 转基因烟草阳性检测 | 第80-81页 |
2.4 转基因烟草Southern blot分析 | 第81-82页 |
2.5 低温、干旱以及高盐对转基因烟草的影响 | 第82-83页 |
2.6 转35S:DmDREBa基因烟草叶片蒸腾失水分析 | 第83-84页 |
2.7 叶片上下表皮的气孔密度检测 | 第84-86页 |
2.8 T_1代转基因烟草的分离比分析 | 第86页 |
2.10 低温胁迫对转35S:DmDREBa基因T_1烟草叶片的MDA含量的影响 | 第86-87页 |
3 讨论 | 第87-89页 |
第七章 野生菊和栽培菊DmDREBb基因核苷酸多态性研究 | 第89-99页 |
1 材料与方法 | 第89-91页 |
1.1 实验材料 | 第89-90页 |
1.2 实验方法 | 第90-91页 |
1.3 生物信息学分析 | 第91页 |
2 结果与分析 | 第91-96页 |
2.1 菊花DmDREBb基因的单核苷酸多态性分布和频率 | 第91-93页 |
2.2 菊花DmDREBb基因位点多态性的类型分析 | 第93页 |
2.3 DmDREBb基因位点的LD分析 | 第93-94页 |
2.4 DmDREBb基因编码区多态性模式分析 | 第94-96页 |
2.5 野生菊和栽培菊系统发育进化树分析 | 第96页 |
3 讨论 | 第96-99页 |
全文结论 | 第99-101页 |
本研究创新之处 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-123页 |
附录 | 第123-135页 |
论文写作与发表 | 第135-137页 |
致谢 | 第137页 |