摘要 | 第11-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
第一章 绪论 | 第16-53页 |
1.1 致病菌危害严重性 | 第17-19页 |
1.2 本研究涉及的三种食源性致病菌 | 第19-23页 |
1.2.1 沙门氏菌 | 第19-20页 |
1.2.2 大肠杆菌 | 第20-22页 |
1.2.3 金黄色葡萄球菌 | 第22-23页 |
1.3 致病菌检测技术研究进展 | 第23-27页 |
1.3.1 常规检测技术及改进 | 第23-24页 |
1.3.2 利用微生物特征酶的检测方法 | 第24-25页 |
1.3.3 免疫学检测技术 | 第25-27页 |
1.4 分子生物学方法 | 第27-33页 |
1.4.1 PCR技术 | 第27页 |
1.4.2 PCR-ELISA | 第27-28页 |
1.4.3 生物芯片检测技术 | 第28-29页 |
1.4.4 实时荧光定量PCR技术 | 第29-31页 |
1.4.5 细菌自动鉴定系统 | 第31-33页 |
1.4.6 目前所用检测方法的优缺点 | 第33页 |
1.5 纳米技术及应用 | 第33-36页 |
1.5.1 纳米技术简介 | 第33页 |
1.5.2 纳米技术的发展过程 | 第33-34页 |
1.5.3 纳米材料 | 第34页 |
1.5.4 纳米材料的特性 | 第34-35页 |
1.5.5 纳米粒子的制备 | 第35-36页 |
1.6 生物学研究常用纳米粒子 | 第36-40页 |
1.6.1 分类及表征 | 第36-37页 |
1.6.2 磁性纳米粒子及应用 | 第37-39页 |
1.6.3 纳米金及应用 | 第39页 |
1.6.4 量子点 | 第39-40页 |
1.7 核壳荧光纳米粒子 | 第40-44页 |
1.7.1 核壳荧光纳米粒子的制备 | 第41-43页 |
1.7.2 荧光纳米粒子的修饰及功能化 | 第43页 |
1.7.3 核壳荧光纳米粒子的性能 | 第43-44页 |
1.7.4 核壳荧光纳米粒子与荧光分子标记 | 第44页 |
1.8 纳米粒子在生物检测中应用 | 第44-46页 |
1.8.1. 荧光纳米粒子在芯片上的应用 | 第44-45页 |
1.8.2 纳米粒子在细菌检测中的应用 | 第45-46页 |
1.9 本课题的设计思路与研究内容 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
第二章 荧光纳米粒子的制备与表征 | 第53-69页 |
2.1 引言 | 第53页 |
2.2 材料与方法 | 第53-57页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第53-54页 |
2.2.2 实验方法 | 第54-57页 |
2.3 结果 | 第57-64页 |
2.3.1 电镜观察及粒径测量 | 第57-58页 |
2.3.2 小尺寸纳米粒子的制备 | 第58-60页 |
2.3.3 纳米粒子与抗体的结合 | 第60-61页 |
2.3.4 纳米粒子与微球的结合球 | 第61-62页 |
2.3.5 纳米粒子表面结合抗体的稳定性 | 第62-63页 |
2.3.6 纳米粒子与微球结合的特异性 | 第63-64页 |
2.4 讨论 | 第64-67页 |
2.4.1 荧光纳米粒子合成方法 | 第64-66页 |
2.4.2 纳米粒子的表征及修饰 | 第66-67页 |
2.5 小结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-69页 |
第三章 荧光纳米粒子用于细菌检测 | 第69-87页 |
3.1 引言 | 第69页 |
3.2 材料与方法 | 第69-73页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第69-70页 |
3.2.2 菌种 | 第70页 |
3.2.3 实验方法 | 第70-73页 |
3.3 结果 | 第73-79页 |
3.3.1 菌种的鉴定 | 第73页 |
3.3.2 纳米粒子用于细菌检测原理 | 第73页 |
3.3.3 细菌的培养 | 第73-74页 |
3.3.4 纳米粒子与细菌的特异性反应 | 第74-75页 |
3.3.5 纳米粒子—菌耦联体的检测 | 第75-77页 |
3.3.6 细菌的定量检测与计数 | 第77-78页 |
3.3.7 纳米粒子抗体结合体稳定性测试 | 第78-79页 |
3.4 讨论 | 第79-85页 |
3.4.1 荧光纳米粒子检测细菌与常用方法比较 | 第79-80页 |
3.4.2 纳米粒子检测细菌与荧光标记检测比较 | 第80页 |
3.4.3 毛细管流式荧光检测仪 | 第80-81页 |
3.4.4 细菌的定量检测 | 第81-82页 |
3.4.5 核酸适体(Aptamer) | 第82-83页 |
3.4.6 纳米粒子检测细菌的其他方法 | 第83-85页 |
3.5 小结 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-87页 |
第四章 多重荧光纳米粒子的制备与表征 | 第87-97页 |
4.1 引言 | 第87页 |
4.2 材料与方法 | 第87-90页 |
4.2.1 试剂及仪器 | 第87-88页 |
4.2.2 实验方法 | 第88-90页 |
4.3 结果 | 第90-94页 |
4.3.1 荧光染料的选择 | 第90页 |
4.3.2 纳米粒子的透射电镜观察 | 第90-91页 |
4.3.3 紫外灯下观察 | 第91-92页 |
4.3.4 纳米粒子的荧光观察 | 第92页 |
4.3.5 纳米粒子与微球的结合 | 第92-94页 |
4.3.6 纳米粒子的修饰 | 第94页 |
4.4 讨论 | 第94-95页 |
4.5 小结 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-97页 |
第五章 利用纳米粒子进行多种细菌的同时检测 | 第97-110页 |
5.1 引言 | 第97-98页 |
5.2 材料与方法 | 第98-101页 |
5.2.1 仪器与试剂 | 第98页 |
5.2.2 菌种 | 第98页 |
5.2.3 培养基 | 第98页 |
5.2.4 实验方法 | 第98-101页 |
5.3 结果 | 第101-107页 |
5.3.1 细菌的培养 | 第101-103页 |
5.3.2 扫描电镜下观察纳米粒子与细菌的结合 | 第103-104页 |
5.3.3 荧光显微镜观察TMR纳米粒子与沙门氏菌的结合 | 第104-105页 |
5.3.4 纳米粒子与目标细菌的特异性结合 | 第105-106页 |
5.3.5 三种细菌的同时检测 | 第106-107页 |
5.4 讨论 | 第107-108页 |
5.5 小结 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-110页 |
第六章 结论 | 第110-112页 |
本论文的创新点 | 第112-114页 |
问题与建议 | 第114-116页 |
附录Ⅰ 溶液配置 | 第116-117页 |
附录Ⅱ 所用染料相关信息 | 第117-118页 |
博士期间发表文章 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |