| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 缩略词表 | 第6-9页 |
| 一、引言 | 第9-12页 |
| 1 鸭疫里默氏杆菌病概述 | 第9-11页 |
| 1.1 病原学 | 第9-10页 |
| 1.2 流行病学 | 第10页 |
| 1.3 临床症状和病理变化 | 第10页 |
| 1.4 诊断 | 第10-11页 |
| 2 鸭疫里默氏杆菌的分子生物学研究 | 第11页 |
| 3 HSP15的研究进展 | 第11页 |
| 4 选题的目的和意义 | 第11-12页 |
| 二、实验研究 | 第12-40页 |
| 1 材料 | 第12-14页 |
| 1.1 菌株和载体 | 第12页 |
| 1.2 实验动物 | 第12页 |
| 1.3 主要药品及试剂的配制 | 第12-14页 |
| 1.3.1 T克隆及亚克隆相关溶液 | 第12-13页 |
| 1.3.2 蛋白表达及纯化主要试剂 | 第13-14页 |
| 1.3.3 多克隆抗体制备主要试剂 | 第14页 |
| 1.3.4 Western blotting试剂 | 第14页 |
| 1.4 主要仪器及设备 | 第14页 |
| 2 方法 | 第14-23页 |
| 2.1 RAHSP15基因生物信息学分析方法 | 第14-15页 |
| 2.1.1 RAhsp15基因分子特性分析 | 第14-15页 |
| 2.1.2 RAHSP15蛋白质的分子特性分析 | 第15页 |
| 2.2 RAHSP15基因的原核表达、纯化及其抗体制备 | 第15-23页 |
| 2.2.1 RA基因组DNA的提取 | 第15-16页 |
| 2.2.2 RAhsp15基因片段的获取 | 第16页 |
| 2.2.3 目的片段的回收及未端加A | 第16-17页 |
| 2.2.4 hsp15基因的T克隆 | 第17-19页 |
| 2.2.5 RA hsp15基因原核表达载体的构建与鉴定 | 第19页 |
| 2.2.6 hsp15基因的原核表达和表达蛋白的鉴定、纯化 | 第19-22页 |
| 2.2.7 兔抗重组表达蛋白高免血清的制备与纯化 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-37页 |
| 3.1 RAHSP15基因生物信息学分析结果 | 第23-25页 |
| 3.2 RAHSP15蛋白的生物信息学分析结果 | 第25-30页 |
| 3.2.1 蛋白质组成及理化特性分析 | 第25-26页 |
| 3.2.2 氨基酸序列比对 | 第26-27页 |
| 3.2.3 信号肽切割位点预测 | 第27页 |
| 3.2.4 跨膜区预测 | 第27-28页 |
| 3.2.5 抗原性分析 | 第28页 |
| 3.2.6 功能位点预测 | 第28-29页 |
| 3.2.7 二级结构预测 | 第29页 |
| 3.2.8 三级结构预测 | 第29-30页 |
| 3.2.9 蛋白质亚细胞定位分析 | 第30页 |
| 3.3 RAHSP15基因的原核表达、纯化及其抗体制备实验结果 | 第30-37页 |
| 3.3.1 目的基因的扩增及T克隆鉴定 | 第30-32页 |
| 3.3.2 重组表达质粒的鉴定 | 第32页 |
| 3.3.3 重组蛋白在大肠杆菌的表达及分布 | 第32-33页 |
| 3.3.4 重组蛋白表达条件的优化 | 第33-35页 |
| 3.3.5 表达产物的鉴定及纯化 | 第35-36页 |
| 3.3.6 多克隆抗体效价测定 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 4.1 RAHSP15基因生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 4.2 RAHSP15基因的原核表达、纯化及其抗体制备 | 第38-40页 |
| 三、结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |
