| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 研究背景 | 第12-34页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 SDF-1α/CXCR4结构和生物学功能分析 | 第13-34页 |
| 1.2.1 趋化因子分类 | 第13-14页 |
| 1.2.2 趋化因子受体分类及其生物学功能 | 第14-16页 |
| 1.2.3 SDF-1α-CXCR4相互作用的结构特点 | 第16-19页 |
| 1.2.4 SDF-1α-CXCR4相互作用的生物学功能与分子机制 | 第19-20页 |
| 1.2.5 PI3K/AKT信号通路介导的EMT诱导 | 第20-22页 |
| 1.2.6 CXCR4与肿瘤细胞EMT诱导相关性研究 | 第22-25页 |
| 1.2.7 PDGF信号通路的研究进展 | 第25-27页 |
| 1.2.8 CXCR4与其他疾病的关系 | 第27-29页 |
| 1.2.9 CXCR4小分子抑制剂的研究进展 | 第29-34页 |
| 第二章 实验材料、设备与方法 | 第34-47页 |
| 2.1 实验材料与仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第34页 |
| 2.1.2 试剂和实验动物 | 第34-35页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-47页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 2.2.2 NT21MP抑制乳腺癌耐药细胞EMT生物学活性检测 | 第36页 |
| 2.2.3 耐药细胞相关基因表达检测 | 第36-38页 |
| 2.2.4 NT21MP逆转耐药细胞PDGF相关蛋白和EMT标志物表达 | 第38-39页 |
| 2.2.5 CXCR4干扰和过表达细胞系的构建 | 第39-42页 |
| 2.2.6 NT21MP通过阻断CXCR4调控PDGFRα逆转EMT | 第42页 |
| 2.2.7 PDGFRα的抑制增强NT21MP逆转EMT效应 | 第42-44页 |
| 2.2.8 NT21MP提高耐药细胞紫杉醇的药物敏感性 | 第44-46页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第46-47页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第47-86页 |
| 3.1 vMIP-Ⅱ N端肽(NT21MP)的设计与制备 | 第47-55页 |
| 3.1.1 vMIP-Ⅱ的生物信息学分析 | 第47-51页 |
| 3.1.2 vMIP-Ⅱ N端21肽(NT21MP)的氨基酸组成及特性分析 | 第51-55页 |
| 3.2 NT21MP抑制乳腺癌耐药细胞的EMT生物学特性 | 第55-59页 |
| 3.3 耐药细胞相关基因表达检测 | 第59-61页 |
| 3.3.1 耐药细胞中SDF-1α和CXCR4表达增高 | 第59-60页 |
| 3.3.2 耐药细胞中PDGFA,PDGFB和PDGFRα表达增高 | 第60-61页 |
| 3.4 NT21MP逆转耐药细胞PDGF相关蛋白和EMT标志物表达 | 第61-64页 |
| 3.4.1 NT21MP下调PDGF及其受体表达 | 第61-62页 |
| 3.4.2 NT21MP逆转EMT标志蛋白的表达 | 第62-64页 |
| 3.5 CXCR4干扰和过表达细胞系的构建 | 第64-70页 |
| 3.5.1 乳腺癌细胞株SDF-1α和CXCR4表达的检测 | 第64-65页 |
| 3.5.2 过表达CXCR4乳腺癌细胞株的构建 | 第65-69页 |
| 3.5.3 CXCR4干扰效应的鉴定 | 第69-70页 |
| 3.6 NT21MP通过阻断CXCR4调控PDGFRα逆转EMT | 第70-76页 |
| 3.6.1 NT21MP通过阻断CXCR4发挥逆转EMT关键蛋白的作用 | 第70-73页 |
| 3.6.2 NT21MP通过阻断CXCR4发挥细胞增殖和迁移抑制作用 | 第73-76页 |
| 3.7 PDGFRα的抑制增强NT21MP逆转EMT效应 | 第76-79页 |
| 3.7.1 PDGFRα干扰片段的筛选和效应分析 | 第76-77页 |
| 3.7.2 PDGFRα抑制剂和激活剂联合NT21MP对信号通路活性影响 | 第77-79页 |
| 3.8 NT21MP提高耐药细胞紫杉醇的药物敏感性 | 第79-82页 |
| 3.9 本研究后续开展的工作 | 第82-85页 |
| 3.9.1 后续研究方向 | 第82-83页 |
| 3.9.2 后续研究进展 | 第83-85页 |
| 小结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-103页 |
| 附录 | 第103-139页 |
| A: pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1-GPF载体图谱 | 第103-104页 |
| B: 主要试剂与仪器 | 第104-106页 |
| C: 细胞复苏及培养 | 第106-109页 |
| D: SRB法检测细胞增殖能力 | 第109页 |
| E: 细胞迁移实验(划痕实验) | 第109-110页 |
| F: 趋化实验(Transwell) | 第110页 |
| G: 流式细胞术检测细胞周期变化 | 第110页 |
| H: 流式细胞术检测细胞凋亡变化 | 第110-111页 |
| I: Real-Time PCR检测基因mRNA表达 | 第111-114页 |
| J: Western blotting检测相关蛋白表达 | 第114-117页 |
| K: 大肠杆菌感受态制备 | 第117-118页 |
| L: 转化 | 第118-119页 |
| M: 常用试剂配制 | 第119-122页 |
| N: 基于结构分析CXCR4受体抑制剂研究 | 第122-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第140-141页 |
