| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词对照表 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-37页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一章 核盘菌以及植物抗病防卫机制的研究进展 | 第15-25页 |
| 1 核盘菌的特征与致病机理 | 第15-19页 |
| ·核盘菌的分类与生物学特性 | 第15页 |
| ·核盘菌的致病机理 | 第15-17页 |
| ·核盘菌对寄主的侵染条件与侵染途径 | 第17-18页 |
| ·核盘菌所致菌核病的症状及危害 | 第18页 |
| ·油菜菌核病的防治意义 | 第18-19页 |
| 2 植物抗病防卫机制的研究进展 | 第19-25页 |
| ·过敏性反应(hypersensitive reaction,HR) | 第20-21页 |
| ·系统获得性抗性(system acquired resistance SAR) | 第21-22页 |
| ·植物的非宿主抗性——宿主与病原物的互作机制 | 第22-23页 |
| ·植物抗病反应的信号传导途径 | 第23-25页 |
| 第二章 植物离体组织培养与细胞再生的研究进展 | 第25-29页 |
| 1 植物组织培养的原理 | 第25-26页 |
| ·植物细胞的全能性 | 第25页 |
| ·细胞分化与形态建成 | 第25页 |
| ·植株的再生 | 第25-26页 |
| 2 植株再生的途径 | 第26页 |
| ·胚状体途径 | 第26页 |
| ·器官发生途径 | 第26页 |
| ·器官间接发生途径 | 第26页 |
| ·器官直接发生途径 | 第26页 |
| 3 植物转基因的研究进展 | 第26-29页 |
| 第三章 G蛋白与G蛋白偶联受体(GPCRs)的研究进展 | 第29-37页 |
| 1 G蛋白的结构与功能 | 第29-30页 |
| ·异源三聚体G蛋白的结构 | 第29-30页 |
| ·异源三聚体G蛋白的功能研究 | 第30页 |
| 2 G蛋白偶联受体(GPCRs)的研究进展 | 第30-33页 |
| ·GPCRs的结构与分类 | 第31-32页 |
| ·GPCRs的结构 | 第31页 |
| ·GPCRs的分类 | 第31-32页 |
| ·GPCRs激活的分子机制 | 第32-33页 |
| ·GPCRs二聚化的功能 | 第33页 |
| 3 基于分离泛素的杂交系统(split-ubiquitin system) | 第33-37页 |
| 第二部分 研究报告 | 第37-71页 |
| 第四章 G蛋白偶联受体功能的初步研究 | 第37-63页 |
| 1 材料与方法 | 第38-50页 |
| ·植物品种 | 第38页 |
| ·基因来源 | 第38页 |
| ·菌株和质粒 | 第38页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39-41页 |
| ·细菌培养基 | 第39页 |
| ·植物培养基 | 第39-41页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA提取(碱裂解法)参考《分子克隆实验指南》 | 第41页 |
| ·质粒DNA的酶切与PCR验证 | 第41-42页 |
| ·质粒DNA与连接产物的转化 | 第42页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第42-43页 |
| ·农杆菌质粒的提取 | 第43-44页 |
| ·农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第44-45页 |
| ·无菌苗制备 | 第44页 |
| ·农杆菌培养 | 第44页 |
| ·农杆菌侵染和共培养 | 第44页 |
| ·芽诱导与愈伤组织诱导 | 第44-45页 |
| ·愈伤组织的分化和植株再生 | 第45页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第45-46页 |
| ·无菌外植体制备 | 第45页 |
| ·农杆菌培养 | 第45页 |
| ·农杆菌侵染和共培养 | 第45页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第45-46页 |
| ·愈伤组织的分化和植株再生 | 第46页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第46-47页 |
| ·油菜、烟草基因组DNA的提取方法(CTAB法) | 第46-47页 |
| ·再生植株的PCR检测扩增 | 第47页 |
| ·转基因植株RNA的提取以及RT-PCR检测 | 第47-49页 |
| ·油菜、烟草总RNA的提取方法(Trizol法) | 第47-48页 |
| ·总RNA的DNA消化 | 第48页 |
| ·mRNA反转录为cDNA | 第48页 |
| ·RT-PCR检测 | 第48-49页 |
| ·转基因植株的抗性鉴定 | 第49页 |
| ·小繁缕膜蛋ppn20与油菜G蛋白的互作 | 第49-50页 |
| ·小量LiAc/PEG法制备酵母感受态细胞 | 第49-50页 |
| ·质粒转化酵母感受态细胞 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-60页 |
| ·ppn20-pBplus载体PCR鉴定 | 第50-51页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第51页 |
| ·植株遗传转化转基因植株的获得 | 第51-54页 |
| ·ppn20基因的油菜遗传转化及转基因植株的获得 | 第51-53页 |
| ·ppn20基因的烟草遗传转化及转基因植株的获得 | 第53-54页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第54-55页 |
| ·转基因油菜PCR检测 | 第54-55页 |
| ·转基因烟草PCR检测 | 第55页 |
| ·转基因植株核盘菌抗性鉴定 | 第55-57页 |
| ·转基因油菜的离体叶片接种鉴定 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草的离体叶片接种鉴定 | 第56-57页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第57-58页 |
| ·转基因油菜的RT-PCR检测 | 第58页 |
| ·转基因烟草的RT-PCR检测 | 第58页 |
| ·ppn20与油菜G蛋白之间的相互作用 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第五章 通过瞬时表达研究ppn20的功能 | 第63-71页 |
| 1 材料与方法 | 第63-66页 |
| ·植物品种 | 第63页 |
| ·菌株和质粒 | 第63页 |
| ·培养基 | 第63页 |
| ·农杆菌表达载体ppn20-PVX的构建 | 第63-65页 |
| ·质粒DNA的酶切 | 第64页 |
| ·目的片段的回收 | 第64页 |
| ·连接反应 | 第64页 |
| ·连接产物的转化 | 第64-65页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第65页 |
| ·表达载体的农杆菌转化 | 第65页 |
| ·农杆菌质粒的提取 | 第65页 |
| ·菌落的PCR检测 | 第65页 |
| ·农杆菌介导的植物瞬时表达抗病性鉴定 | 第65-66页 |
| 2. 结果与分析 | 第66-70页 |
| ·农杆菌表达载体的构建与鉴定 | 第66-70页 |
| ·ppn20-PVX载体构建 | 第66-67页 |
| ·ppn20-PVX载体PCR鉴定 | 第67-68页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第68-69页 |
| ·农杆菌介导ppn20基因在烟草中瞬时表达 | 第69-70页 |
| 3. 讨论 | 第70-71页 |
| 全文结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
