摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
前言 | 第11-13页 |
材料和方法 | 第13-32页 |
1、主要材料 | 第13页 |
2、主要试剂 | 第13-17页 |
2.1 细胞培养试剂 | 第13页 |
2.2 RNA提取及反转录试剂 | 第13-14页 |
2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂 | 第14-15页 |
2.4 目的基因连接转化相关试剂 | 第15-16页 |
2.5 目的基因连接转染相关试剂 | 第16-17页 |
3、主要仪器与设备 | 第17-18页 |
4、实验方法 | 第18-32页 |
4.1 细胞培养 | 第18-19页 |
4.2 血液总RNA的提取及RT-PCR | 第19-20页 |
4.3 目的基因的调取 | 第20-22页 |
4.4 SPINK8基因克隆载体的构建 | 第22-27页 |
4.5 真核表达载体的构建 | 第27-28页 |
4.6 EC9706细胞系的转染及筛选 | 第28-29页 |
4.7 MTT检测细胞抑制率 | 第29-30页 |
4.8 Annexin V-APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡 | 第30页 |
4.9 Transwell细胞迁移实验 | 第30-32页 |
实验结果 | 第32-38页 |
一、RNA完整性检测及SPINK8基因调取结果 | 第32-33页 |
二、克隆重组质粒的鉴定 | 第33-35页 |
三、真核表达重组载体的鉴定 | 第35-36页 |
四、MTT结果 | 第36页 |
五、流式细胞测定细胞凋亡(Annexin V-APC/7-AAD双染法)结果 | 第36-37页 |
六、Transwell细胞迁移实验结果 | 第37-38页 |
讨论 | 第38-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
综述 | 第46-59页 |
参考文献 | 第54-59页 |
缩略词 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
个人简历 | 第61页 |