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副干酪乳酸杆菌X12肽聚糖的提取及诱导结肠癌细胞免疫原性死亡的作用研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 绪论第10-22页
    1.1 课题研究背景及目的意义第10页
    1.2 肽聚糖概述第10-15页
        1.2.1 肽聚糖化学组成及结构第10-11页
        1.2.2 肽聚糖的合成及代谢第11-12页
        1.2.3 肽聚糖的分离提取第12-13页
        1.2.4 肽聚糖识别分子及其作用第13页
        1.2.5 肽聚糖免疫调节及抗肿瘤作用第13-15页
    1.3 结肠癌细胞凋亡与免疫调节第15-17页
    1.4 肿瘤细胞免疫原性死亡第17-20页
        1.4.1 钙网蛋白与钙离子第18页
        1.4.2 钙网蛋白膜转位机制第18-20页
    1.5 本课题主要研究内容第20-22页
        1.5.1 技术路线第20-21页
        1.5.2 主要研究内容第21-22页
第2章 材料和方法第22-34页
    2.1 材料及仪器第22-24页
        2.1.1 材料与试剂第22-23页
        2.1.2 实验仪器第23-24页
    2.2 肽聚糖提取及其组分分析第24-28页
        2.2.1 肽聚糖提取第24-25页
        2.2.2 肽聚糖形态观察第25页
        2.2.3 溶菌酶实验第25页
        2.2.4 总糖含量的测定第25-26页
        2.2.5 蛋白质含量测定第26页
        2.2.6 氨基酸分析第26页
        2.2.7 紫外可见光谱扫描分析第26-27页
        2.2.8 肽聚糖分子量分析第27-28页
    2.3 肽聚糖提取物对结肠癌抑制作用的研究第28-30页
        2.3.1 冻存结肠癌细胞复苏第28页
        2.3.2 结肠癌细胞传代第28-29页
        2.3.3 MTT 实验第29页
        2.3.4 HT-29 细胞凋亡电镜观察第29-30页
        2.3.5 HT-29 细胞内质网电镜观察第30页
    2.4 肽聚糖诱导结肠癌细胞免疫原性死亡机制研究第30-33页
        2.4.1 免疫细胞荧光技术检测第30-31页
        2.4.2 流式细胞仪检测细胞表面上的钙网蛋白第31页
        2.4.3 细胞因子 IL-8 检测第31-32页
        2.4.4 肿瘤坏死因子 TNF-α检测第32页
        2.4.5 胞浆中钙离子浓度测定(流式细胞术)第32-33页
    2.5 统计学分析第33-34页
第3章 肽聚糖提取及其组分分析第34-43页
    3.1 肽聚糖提取及形态学观察第34-36页
        3.1.1 肽聚糖提取第34-35页
        3.1.2 肽聚糖形态观察第35-36页
    3.2 肽聚糖提取物组分分析第36-39页
        3.2.1 总糖含量测定第36页
        3.2.2 蛋白质含量测定第36-37页
        3.2.3 氨基酸分析第37-39页
    3.3 肽聚糖定性研究第39-41页
        3.3.1 溶菌酶实验第39-40页
        3.3.2 紫外可见光谱扫描分析第40页
        3.3.3 肽聚糖分子量分析第40-41页
    3.4 本章小结第41-43页
第4章 肽聚糖提取物对结肠癌抑制作用的研究第43-50页
    4.1 肽聚糖抑制 HT-29 细胞增殖研究第43-44页
    4.2 肽聚糖诱导 HT-29 细胞凋亡形态学观察第44-47页
    4.3 肽聚糖诱导 HT-29 细胞内质网结构观察第47-48页
    4.4 本章小结第48-50页
第5章 肽聚糖诱导结肠癌细胞免疫原性死亡的机制研究第50-62页
    5.1 肽聚糖诱导 HT-29 细胞钙网蛋白膜转位作用第50-54页
        5.1.1 免疫细胞荧光技术检测第50-52页
        5.1.2 流式细胞仪检测细胞表面上的钙网蛋白第52-54页
    5.2 肽聚糖对细胞因子的影响第54-58页
        5.2.1 细胞因子 IL-8 检测第54-56页
        5.2.2 肿瘤坏死因子 TNF-α检测第56-58页
    5.3 细胞胞浆中钙离子浓度研究第58-60页
    5.4 本章小结第60-62页
结论第62-63页
参考文献第63-70页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第70-72页
致谢第72页

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