| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 常用缩略词表 | 第6-9页 |
| 1 前言 | 第9-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 实验细胞、质粒、菌种、基因 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂和耗材 | 第14-15页 |
| 2.1.3 主要试剂配方 | 第15页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-34页 |
| 2.2.1 RNAi瞬时表达载体的构建 | 第16页 |
| 2.2.2 绿色荧光融合表达载体的构建 | 第16-22页 |
| 2.2.3 293T细胞的培养 | 第22-23页 |
| 2.2.4 RNAi干扰效果的检测 | 第23-28页 |
| 2.2.5 CSN1S1打靶载体的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.6 DGAT1打靶载体的构建 | 第30页 |
| 2.2.7 牛肾成纤维细胞的培养 | 第30-31页 |
| 2.2.8 牛肾细胞的转染以及外源基因的整合检测 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-45页 |
| 3.1 RNAi瞬时表达载体构建结果 | 第34-35页 |
| 3.2 融合荧光表达载体的构建结果 | 第35-37页 |
| 3.3 干扰效果的验证结果 | 第37-41页 |
| 3.3.1 荧光验证 | 第37-38页 |
| 3.3.2 m RNA验证 | 第38-41页 |
| 3.4 CSN1S1基因打靶载体的构建结果 | 第41-42页 |
| 3.5 DGAT1基因打靶载体的构建结果 | 第42-43页 |
| 3.6 牛肾胎儿成纤维细胞的转染以及外源基因的整合检测结果 | 第43-45页 |
| 3.6.1 牛肾胎儿成纤维细胞的转染 | 第43-44页 |
| 3.6.2 外源基因的整合检测结果 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 RNAi序列的设计及筛选 | 第45-46页 |
| 4.2 融合表达载体的构建以及融合荧光的表达 | 第46页 |
| 4.3 基因打靶载体的构建 | 第46-47页 |
| 4.4 基因整合结果的讨论 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-63页 |