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卵形鲳鲹肝脏和鳃器官在急、慢性低氧胁迫下的生理组织及相关基因表达变化的研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
引言第14-19页
    1 卵形鲳鲹的生物学特征第14页
    2 卵形鲳鲹的国内外研究现状第14-15页
    3 溶氧对鱼类的意义第15页
    4 鱼类的窒息点第15页
    5 低氧胁迫对鱼类肝脏和鳃器官的影响的研究进展第15-16页
    6 低氧胁迫对鱼类肝脏和鳃器官的生理影响第16页
    7 LDH-A基因及其研究现状第16页
    8 MMP9基因及其研究现状第16-17页
    9 研究的主要内容第17页
    10 研究的目的意义第17-19页
第一章 低氧胁迫对卵形鲳鲹肝脏和鳃器官的组织学影响第19-35页
    1.1 材料和方法第19-21页
        1.1.1 实验材料第19页
        1.1.2 实验方法第19-21页
    1.2 结果第21-30页
        1.2.1 卵形鲳鲹的窒息点第21页
        1.2.2 慢性低氧胁迫下卵形鲳鲹的存活量第21-22页
        1.2.3 低氧胁迫后肝脏和鳃器官的显微观察第22-25页
            1.2.3.1 肝脏低氧胁迫后的显微观察第22页
            1.2.3.2 鳃器官低氧胁迫后的显微观察第22-25页
        1.2.4 低氧胁迫后肝脏和鳃器官的显微观察第25-28页
            1.2.4.1 肝脏低氧胁迫后的透射电镜变化第25-27页
            1.2.4.2 鳃器官低氧胁迫后的透射电镜变化第27-28页
        1.2.5 鳃器官低氧胁迫后的扫描电镜变化第28-30页
            1.2.5.1 低氧胁迫对鳃小片的影响第28页
            1.2.5.2 低氧胁迫对鳃小片基部的影响第28页
            1.2.5.3 低氧胁迫对鳃丝表面的影响第28-29页
            1.2.5.4 低氧胁迫对鳃小片间基部的影响第29-30页
    1.3 讨论第30-35页
        1.3.1 卵形鲳鲹的窒息点第30-31页
        1.3.2 低氧胁迫下卵形鲳鲹肝脏的组织学变化第31-32页
            1.3.2.1 低氧胁迫对卵形鲳鲹肝脏组织的影响第31页
            1.3.2.2 卵形鲳鲹低氧后肝脏线粒体和内质网的变化第31-32页
            1.3.2.3 急性低氧胁迫中卵形鲳鲹肝脏出现的过氧化物酶体第32页
        1.3.3 低氧胁迫对卵形鲳鲹鳃器官的组织学影响第32-35页
            1.3.3.1 低氧胁迫下鳃器官的变化第32-33页
            1.3.3.2 低氧胁迫下MRC的变化第33页
            1.3.3.3 低氧胁迫下鳃红细胞的变化第33-35页
第二章 低氧胁迫下卵形鲳鲹肝脏和鳃器官的氧化应激及肝脏的能量代谢变化第35-45页
    2.1 材料与方法第35-37页
        2.1.1 实验材料及低氧胁迫实验过程第35-36页
        2.1.2 实验方法第36页
        2.1.3 统计分析第36-37页
    2.2 实验结果第37-42页
        2.2.1 低氧胁迫后卵形鲳鲹肝脏的氧化应激第37-39页
        2.2.2 低氧胁迫后卵形鲳鲹鳃的氧化应激第39-41页
        2.2.3 低氧胁迫后卵形鲳鲹肝脏能量代谢变化第41-42页
    2.3 讨论第42-45页
        2.3.1 卵形鲳鲹肝脏和鳃器官的组织中SOD和CAT在低氧胁迫下的变化第42-43页
        2.3.2 卵形鲳鲹肝脏和鳃器官的组织中GSH和MDA在低氧胁迫下的变化第43-44页
        2.3.3 卵形鲳鲹肝脏LG和LDH在低氧胁迫下的变化第44-45页
第三章 卵形鲳鲹低氧相关基因的克隆和序列分析第45-61页
    3.1 材料和方法第45-53页
        3.1.0 实验材料及低氧胁迫实验过程及取样第45页
        3.1.1 试剂盒及药品第45-46页
        3.1.2 相关实验试剂培养基和溶液配制第46-47页
        3.1.3 引物设计第47-48页
        3.1.4 RNA提取第48页
        3.1.5 反转录第48-49页
        3.1.6 cDNA第一链的纯化第49-50页
        3.1.7 cDNA第一链 5′末端加尾第50页
        3.1.8 中间片段克隆第50页
        3.1.9 3′-RACE的克隆第50页
        3.1.10 5′-RACE的克隆第50-51页
        3.1.11 PCR产物的分离、回收和纯化第51-52页
        3.1.12 产物连接第52页
        3.1.13 序列拼接验证第52页
        3.1.14 序列分析第52-53页
    3.2 实验结果第53-60页
        3.2.1 RNA样品质量第53页
        3.2.2 卵形鲳鲹LDH-A全序列第53-56页
            3.2.2.1 卵形鲳鲹LDH-A中间片段的克隆,3`RACE,5`RACE第53-54页
            3.2.2.2 LDH-A序列拼接验证第54-55页
            3.2.2.3 卵形鲳鲹LDH-A的进化分析第55-56页
        3.2.3 卵形鲳鲹MMP9全序列第56-60页
            3.2.3.1 卵形鲳鲹MMP9中间片段的克隆,3`RACE,5`RACE第56-57页
            3.2.3.2 MMP9序列拼接验证第57-59页
            3.2.3.3 卵形鲳鲹MMP9的进化分析第59-60页
    3.3 讨论第60-61页
第四章 低氧胁迫下卵形鲳鲹相关基因的表达变化第61-70页
    4.1 材料和方法第61-65页
        4.1.1 实验材料及低氧胁迫实验过程及取样第61页
        4.1.2 试剂盒及药品第61页
        4.1.3 方法第61-65页
    4.2 结果第65-68页
        4.2.1 引物熔解曲线和标准曲线的分析第65页
        4.2.2 低氧胁迫下卵形鲳鲹肝脏和鳃器官中的LDH-A表达变化第65-66页
        4.2.3 低氧胁迫下卵形鲳鲹肝脏和鳃器官中的MMP9表达变化第66-68页
    4.3 讨论第68-70页
        4.3.1 低氧胁迫下卵形鲳鲹LDH-A表达变化第68页
        4.3.2 低氧胁迫下卵形鲳鲹MMP9表达变化第68-70页
结论第70-71页
参考文献第71-78页
附录第78-79页
致谢第79页

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