| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 综述 | 第10-14页 |
| 1.1 蜱的简介 | 第10-11页 |
| 1.2 iTRAQ定量蛋白质组学简介 | 第11-12页 |
| 1.3 RNA干扰研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第13-14页 |
| 第2章 长角血蜱不同吸血时期转录组测序 | 第14-18页 |
| 2.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第14页 |
| 2.1.2 测序对象 | 第14页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第14页 |
| 2.2 实验仪器及耗材 | 第14-15页 |
| 2.3 实验方法及步骤 | 第15-16页 |
| 2.3.1 蜱的饲养 | 第15页 |
| 2.3.2 RNA样品检测 | 第15页 |
| 2.3.3 cDNA文库的构建及库检 | 第15页 |
| 2.3.4 上机测序 | 第15页 |
| 2.3.5 测序数据筛查 | 第15页 |
| 2.3.6 转录本拼接 | 第15页 |
| 2.3.7 基因功能注释 | 第15-16页 |
| 2.4 实验结果 | 第16-18页 |
| 第3章 运用定量蛋白质组学分析长角血蜱不同吸血时期唾液腺蛋白表达情况及功能分析 | 第18-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第18页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第18页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第18页 |
| 3.2 实验仪器与耗材 | 第18-19页 |
| 3.3 实验步骤 | 第19-22页 |
| 3.3.1 组织解剖与蛋白提取 | 第19页 |
| 3.3.2 蛋白酶解与iTRAQ标定 | 第19-20页 |
| 3.3.3 样品高pH的反相HPLC分离 | 第20-21页 |
| 3.3.4 质谱鉴定 | 第21页 |
| 3.3.5 质谱数据结果比对 | 第21页 |
| 3.3.6 数据统计与分析 | 第21页 |
| 3.3.7 GO富集分析 | 第21页 |
| 3.3.8 聚类分析 | 第21-22页 |
| 3.3.9 蛋白互作分析 | 第22页 |
| 3.3.10 KEGG信号通路分析 | 第22页 |
| 3.4 实验结果 | 第22-37页 |
| 3.4.1 蛋白质定量结果 | 第22页 |
| 3.4.2 重复实验数据分析 | 第22页 |
| 3.4.3 GO富集分析 | 第22-24页 |
| 3.4.4 聚类分析 | 第24-35页 |
| 3.4.5 蛋白互作分析 | 第35-36页 |
| 3.4.6 KEGG信号通路分析 | 第36-37页 |
| 3.5 讨论 | 第37-47页 |
| 第4章 差异蛋白的RNA干扰 | 第47-58页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第47页 |
| 4.1.2 实验仪器与耗材 | 第47页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第47-48页 |
| 4.2 目的蛋白特异序列片段的获取 | 第48页 |
| 4.3 RNA的提取 | 第48页 |
| 4.4 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第48页 |
| 4.5 合成一链cDNA | 第48-50页 |
| 4.6 PCR产物检测及回收 | 第50页 |
| 4.7 差异蛋白特异基因的鉴定 | 第50-51页 |
| 4.7.1 目的基因连接与转化 | 第50-51页 |
| 4.7.2 目的基因序列比对 | 第51页 |
| 4.8 合成含有T7启动子的引物及含T7启动子目的片段扩增 | 第51-52页 |
| 4.9 合成dsRNA | 第52-53页 |
| 4.10 dsRNA的注射 | 第53页 |
| 4.11 饲喂 | 第53页 |
| 4.12 实验结果 | 第53-56页 |
| 4.12.1 目的基因比对结果 | 第53页 |
| 4.12.2 RNA干扰结果 | 第53-56页 |
| 4.13 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66页 |