摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9页 |
1 前言 | 第11-16页 |
1.1 IFITs的结构与表达 | 第11页 |
1.2 IFITs的诱导合成机制 | 第11-12页 |
1.3 IFITs的抗病毒功能 | 第12页 |
1.4 IFITs对I型干扰素的负调节 | 第12页 |
1.5 IFIT2的研究进展 | 第12-13页 |
1.6 启动子的结构及特点 | 第13-14页 |
1.7 启动子的研究方法 | 第14页 |
1.8 定点突变 | 第14-15页 |
1.9 研究目的和意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-27页 |
2.1 试验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 载体和菌株 | 第16页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第16-17页 |
2.1.3 主要药品及试剂盒 | 第17页 |
2.1.4 缓冲液与主要试剂的配制 | 第17-18页 |
2.1.5 主要分子生物学软件 | 第18页 |
2.1.6 相关信息学网站 | 第18页 |
2.2 试验方法 | 第18-27页 |
2.2.1 -1838 ~ -1661 bp调控元件缺失突变 | 第18-19页 |
2.2.2 -1661 ~ -1579 bp调控元件缺失突变 | 第19-20页 |
2.2.3 -389 ~ -310 bp调控元件缺失突变 | 第20-21页 |
2.2.4 -310 ~ -126 bp调控元件缺失突变 | 第21-23页 |
2.2.5 扩增产物纯化 | 第23页 |
2.2.6 克隆载体构建 | 第23-24页 |
2.2.7 报告基因载体构建 | 第24页 |
2.2.8 无内毒素质粒提取 | 第24-25页 |
2.2.9 细胞培养、转染和检测 | 第25-27页 |
3 结果与分析 | 第27-47页 |
3.1 生物信息学分析 | 第27页 |
3.2 -1838 ~ -1661 bp调控元件鉴定 | 第27-31页 |
3.2.1 Delta EF1元件缺失突变 | 第27页 |
3.2.2 荧光素酶报告基因载体构建 | 第27-30页 |
3.2.3 荧光素酶活性检测 | 第30-31页 |
3.3 -1661 ~ -1579 bp调控元件鉴定 | 第31-32页 |
3.3.1 ISREIII元件缺失突变 | 第31-32页 |
3.3.2 荧光素酶报告基因载体构建 | 第32页 |
3.3.3 荧光素酶活性检测 | 第32页 |
3.4 -389 ~ -310 bp调控元件鉴定 | 第32-35页 |
3.4.1 Id3元件三个碱基(TTG)缺失突变 | 第32-33页 |
3.4.2 Id3元件整体缺失突变 | 第33-34页 |
3.4.3 荧光素酶报告基因载体构建 | 第34-35页 |
3.4.4 荧光素酶活性检测 | 第35页 |
3.5 -310 ~ -126 bp调控元件鉴定 | 第35-47页 |
3.5.1 ISREI元件缺失突变 | 第35-36页 |
3.5.2 ISREII元件缺失突变 | 第36-37页 |
3.5.3 ISREI和ISREII元件同时缺失突变 | 第37-38页 |
3.5.4 NF-Kappa BI元件缺失突变 | 第38-39页 |
3.5.5 NF-Kappa BII元件缺失突变 | 第39-40页 |
3.5.6 NF-Kappa BI和NF-Kappa BII元件同时缺失突变 | 第40-41页 |
3.5.7 NF-Kappa BI和ISREI-II元件同时缺失突变 | 第41-42页 |
3.5.8 NF-Kappa BII和ISREI-II元件同时缺失突变 | 第42-44页 |
3.5.9 NF-Kappa BI-II和ISREI-II元件同时缺失突变 | 第44页 |
3.5.10 荧光素酶报告基因载体构建 | 第44-45页 |
3.5.11 荧光素酶活性检测 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
4.1 Delta EF1鉴定 | 第47页 |
4.2 Id3鉴定 | 第47页 |
4.3 ISRE和NF-kappa B鉴定 | 第47-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |