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猪IFIT2基因转录调控元件鉴定

摘要第8-9页
英文摘要第9页
1 前言第11-16页
    1.1 IFITs的结构与表达第11页
    1.2 IFITs的诱导合成机制第11-12页
    1.3 IFITs的抗病毒功能第12页
    1.4 IFITs对I型干扰素的负调节第12页
    1.5 IFIT2的研究进展第12-13页
    1.6 启动子的结构及特点第13-14页
    1.7 启动子的研究方法第14页
    1.8 定点突变第14-15页
    1.9 研究目的和意义第15-16页
2 材料与方法第16-27页
    2.1 试验材料第16-18页
        2.1.1 载体和菌株第16页
        2.1.2 主要仪器设备第16-17页
        2.1.3 主要药品及试剂盒第17页
        2.1.4 缓冲液与主要试剂的配制第17-18页
        2.1.5 主要分子生物学软件第18页
        2.1.6 相关信息学网站第18页
    2.2 试验方法第18-27页
        2.2.1 -1838 ~ -1661 bp调控元件缺失突变第18-19页
        2.2.2 -1661 ~ -1579 bp调控元件缺失突变第19-20页
        2.2.3 -389 ~ -310 bp调控元件缺失突变第20-21页
        2.2.4 -310 ~ -126 bp调控元件缺失突变第21-23页
        2.2.5 扩增产物纯化第23页
        2.2.6 克隆载体构建第23-24页
        2.2.7 报告基因载体构建第24页
        2.2.8 无内毒素质粒提取第24-25页
        2.2.9 细胞培养、转染和检测第25-27页
3 结果与分析第27-47页
    3.1 生物信息学分析第27页
    3.2 -1838 ~ -1661 bp调控元件鉴定第27-31页
        3.2.1 Delta EF1元件缺失突变第27页
        3.2.2 荧光素酶报告基因载体构建第27-30页
        3.2.3 荧光素酶活性检测第30-31页
    3.3 -1661 ~ -1579 bp调控元件鉴定第31-32页
        3.3.1 ISREIII元件缺失突变第31-32页
        3.3.2 荧光素酶报告基因载体构建第32页
        3.3.3 荧光素酶活性检测第32页
    3.4 -389 ~ -310 bp调控元件鉴定第32-35页
        3.4.1 Id3元件三个碱基(TTG)缺失突变第32-33页
        3.4.2 Id3元件整体缺失突变第33-34页
        3.4.3 荧光素酶报告基因载体构建第34-35页
        3.4.4 荧光素酶活性检测第35页
    3.5 -310 ~ -126 bp调控元件鉴定第35-47页
        3.5.1 ISREI元件缺失突变第35-36页
        3.5.2 ISREII元件缺失突变第36-37页
        3.5.3 ISREI和ISREII元件同时缺失突变第37-38页
        3.5.4 NF-Kappa BI元件缺失突变第38-39页
        3.5.5 NF-Kappa BII元件缺失突变第39-40页
        3.5.6 NF-Kappa BI和NF-Kappa BII元件同时缺失突变第40-41页
        3.5.7 NF-Kappa BI和ISREI-II元件同时缺失突变第41-42页
        3.5.8 NF-Kappa BII和ISREI-II元件同时缺失突变第42-44页
        3.5.9 NF-Kappa BI-II和ISREI-II元件同时缺失突变第44页
        3.5.10 荧光素酶报告基因载体构建第44-45页
        3.5.11 荧光素酶活性检测第45-47页
4 讨论第47-49页
    4.1 Delta EF1鉴定第47页
    4.2 Id3鉴定第47页
    4.3 ISRE和NF-kappa B鉴定第47-49页
5 结论第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-55页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第55页

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