| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第15-20页 |
| 1.1 断奶仔猪腹泻的危害及成因 | 第15-16页 |
| 1.2 产肠毒素大肠杆菌引起的断奶仔猪腹泻研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 ETEC的致病机制 | 第16页 |
| 1.2.2 ETEC近年的流行病学调查 | 第16-17页 |
| 1.3 断奶仔猪腹泻疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 灭活疫苗 | 第17页 |
| 1.3.2 基因工程疫苗 | 第17-18页 |
| 1.3.3 靶向性疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 包涵体开发应用研究进展 | 第19页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-43页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 菌种及主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.3 引物 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要实验仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-43页 |
| 2.2.1 Fae G-m STa-LTb-STb融合基因获得 | 第22-24页 |
| 2.2.2 构建p Pro EXHTa-Fae G-mSTa-LTb-STb/BL21重组大肠杆菌 | 第24-27页 |
| 2.2.3 p Pro EXHTa-Fae G-m STa-LTb-STb/BL21的诱导表达及鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.4 包涵体的制备及分析 | 第28-29页 |
| 2.2.5 Fae G-m STa-LTb-STb .服包涵体免疫小鼠 | 第29-30页 |
| 2.2.6 构建含有单、双靶向分子的Fae G-m STa-LTb-STb重组大肠杆菌 | 第30-36页 |
| 2.2.7 构建含有sfimH单、双靶向分子的Fae G-m STa-LTb-STb重组大肠杆菌 | 第36-40页 |
| 2.2.8 重组大肠杆菌的诱导表达及鉴定 | 第40页 |
| 2.2.9 提取包涵体并分析其反应原性 | 第40页 |
| 2.2.10含靶向分子组.服包涵体免疫小鼠 | 第40-41页 |
| 2.2.11包涵体免疫断奶仔猪 | 第41-43页 |
| 3 结果 | 第43-71页 |
| 3.1 各目的基因的PCR扩增结果 | 第43页 |
| 3.2 Fabb组表达蛋白及反应原性分析 | 第43-45页 |
| 3.3 包涵体耐酸碱、胆盐及稳定性结果 | 第45页 |
| 3.4 Fabb组.服包涵体免疫小鼠实验结果 | 第45-47页 |
| 3.4.1 小鼠体内特异性抗体水平检测 | 第45-46页 |
| 3.4.2 特异性淋巴细胞增殖试验 | 第46页 |
| 3.4.3 免疫保护性试验 | 第46-47页 |
| 3.4.4 记忆应答试验结果 | 第47页 |
| 3.5 含单、双靶向分子重组大肠杆菌的鉴定结果 | 第47-50页 |
| 3.5.1 C5a L单、双靶向分子组鉴定结果 | 第47-48页 |
| 3.5.2 Cpe17单、双靶向分子组鉴定结果 | 第48页 |
| 3.5.3 Cpe30单、双靶向分子组鉴定结果 | 第48-49页 |
| 3.5.4 Yad A3单、双靶向分子组鉴定结果 | 第49页 |
| 3.5.5 sfimH单、双靶向分子组鉴定结果 | 第49-50页 |
| 3.6 测序结果鉴定 | 第50页 |
| 3.7 含靶向分子组表达蛋白的鉴定及反应原性分析 | 第50-56页 |
| 3.8.服包涵体免疫小鼠实验结果 | 第56-66页 |
| 3.8.1 含C5a L单、双靶向分子组结果 | 第56-58页 |
| 3.8.2 含Cpe17单、双靶向分子组结果 | 第58-60页 |
| 3.8.3 含Cpe30单、双靶向分子组结果 | 第60-62页 |
| 3.8.4 含Yad A3单、双靶向分子组结果 | 第62-64页 |
| 3.8.5 含sfim H单、双靶向分子组结果 | 第64-66页 |
| 3.9 脾淋巴细胞增殖结果 | 第66-67页 |
| 3.10小鼠攻毒实验后粪便排菌结果 | 第67-68页 |
| 3.11仔猪实验结果 | 第68-71页 |
| 3.11.1 仔猪体内抗体测定结果 | 第68-69页 |
| 3.11.2 攻毒实验仔猪变化及增重 | 第69-70页 |
| 3.11.3 攻毒实验后仔猪粪便排菌检测 | 第70-71页 |
| 4 讨论 | 第71-77页 |
| 4.1 课题设计思路 | 第71-72页 |
| 4.2 包涵体稳定性分析 | 第72页 |
| 4.3.服包涵体免疫小鼠实验免疫效果分析 | 第72-75页 |
| 4.3.1 含C5a L单、双靶向分子组免疫效果分析 | 第72-73页 |
| 4.3.2 含Cpe17 Cpe30单、双靶向分子组免疫效果分析 | 第73-74页 |
| 4.3.3 含Yad A3单、双靶向分子组免疫效果分析 | 第74页 |
| 4.3.4 含sfim H单、双靶向分子组免疫效果分析 | 第74-75页 |
| 4.4 攻毒实验对小鼠的保护性分析 | 第75页 |
| 4.5 仔猪免疫效果及保护性分析 | 第75-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
