| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 从传统抗体到抗体片段 | 第12-13页 |
| 1.1.1 多克隆抗体 | 第12页 |
| 1.1.2 单克隆抗体 | 第12页 |
| 1.1.3 基因工程抗体 | 第12-13页 |
| 1.2 纳米抗体生物学特性 | 第13-15页 |
| 1.2.1 分子量小与可溶性好 | 第14页 |
| 1.2.2 免疫原性弱与抗原识别能力强 | 第14页 |
| 1.2.3 稳定性好 | 第14-15页 |
| 1.2.4 穿透能力强 | 第15页 |
| 1.3 纳米抗体在免疫学检测中的应用 | 第15-18页 |
| 1.3.1 用于病原检测 | 第15-17页 |
| 1.3.2 用于食品安全检测 | 第17页 |
| 1.3.3 纳米抗体在其它方面的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 莱克多巴胺检测分析方法的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 莱克多巴胺的性质和特点 | 第18页 |
| 1.4.2 莱克多巴胺检测分析的方法 | 第18-20页 |
| 1.5 选题目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 骆驼天然单域重链抗体库的构建与鉴定 | 第21-35页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 淋巴细胞 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 外周血淋巴细胞的分离 | 第23页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.3 VHH基因片段的扩增 | 第24-26页 |
| 2.2.4 PCR产物的纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.5 VHH噬菌体展示文库的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.6 文库质量评价 | 第29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-32页 |
| 2.3.1 总RNA的提取与分析 | 第29-30页 |
| 2.3.2 PCR扩增结果 | 第30页 |
| 2.3.3 连接与电转化 | 第30-31页 |
| 2.3.4 文库鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 2.4.1 抗体库技术 | 第32-33页 |
| 2.4.2 抗体库容量与多样性 | 第33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-35页 |
| 3 莱克多巴胺人工抗原的合成与鉴定 | 第35-44页 |
| 3.1 材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 RAC-OVA人工抗原的合成 | 第37-38页 |
| 3.2.2 RAC-OVA人工抗原的鉴定 | 第38页 |
| 3.2.3 RAC-BSA人工抗原的合成 | 第38-39页 |
| 3.2.4 RAC-BSA人工抗原的鉴定 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-41页 |
| 3.3.1 紫外光谱扫描鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.3.2 SDS-PAGE鉴定结果 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 3.4.1 偶联方法的选择 | 第41页 |
| 3.4.2 人工抗原载体的选择 | 第41-42页 |
| 3.4.3 人工抗原的鉴定 | 第42-43页 |
| 3.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 4 抗莱克多巴胺纳米抗体重组噬菌体的筛选与鉴定 | 第44-57页 |
| 4.1 材料 | 第44-47页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第44-45页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 试剂配制 | 第45-47页 |
| 4.2 方法 | 第47-51页 |
| 4.2.1 噬菌体的扩增和滴度的测定 | 第47-48页 |
| 4.2.2 VHH噬菌体抗体文库的救援 | 第48页 |
| 4.2.3 噬菌体文库的淘选 | 第48-50页 |
| 4.2.4 phage-ELISA鉴定特异性重组噬菌体 | 第50页 |
| 4.2.5 诱导表达 | 第50-51页 |
| 4.2.6 可溶性重组纳米抗体的ELISA检测 | 第51页 |
| 4.3 实验结果 | 第51-54页 |
| 4.3.1 抗体库的拯救与筛选效果 | 第51-52页 |
| 4.3.2 phage-ELISA鉴定阳性克隆 | 第52-53页 |
| 4.3.3 可溶性重组纳米抗体粗提物的ELISA检测 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 4.4.1 噬菌体展示技术的选择 | 第54-55页 |
| 4.4.2 影响淘选结果的因素 | 第55页 |
| 4.4.3 诱导产物的粗表达与初步鉴定 | 第55-56页 |
| 4.5 本章总结 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第65-66页 |
| 附录 英文缩写词汇表 | 第66-68页 |