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狐源犬瘟热病毒SD(14)7分离株全基因组序列分析及致病性研究

附件第4-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-7页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-22页
    1.1 犬瘟热病毒综述第13-15页
        1.1.1 犬瘟热病原特性第13-14页
        1.1.2 CDV的细胞受体第14-15页
        1.1.3 CDV的流行病学第15页
    1.2 犬瘟热病毒分子生物学研究进展第15-19页
        1.2.1 核衣壳蛋白(N蛋白)第16页
        1.2.2 磷蛋白(P蛋白)第16-17页
        1.2.3 基质膜蛋白(M蛋白)第17页
        1.2.4 融合蛋白(F蛋白)第17-18页
        1.2.5 血凝蛋白(H蛋白)第18-19页
        1.2.6 大蛋白(L蛋白)第19页
    1.3 犬瘟热病毒分离方法第19-20页
        1.3.1 原代细胞第19-20页
        1.3.2 传代细胞第20页
        1.3.3 表达CDV细胞受体的细胞系第20页
    1.4 本研究的目的和意义第20-22页
第二章 水貂、狐狸和貉源犬瘟热病毒Fsp、H和F基因的克隆与序列分析第22-38页
    摘要第22-23页
    2.1 材料和方法第23-25页
        2.1.1 病料和病毒第23页
        2.1.2 试剂第23页
        2.1.3 引物设计与合成第23页
        2.1.4 病料处理、病毒RNA提取及反转录第23-24页
        2.1.5 疑似犬瘟热样品的RT-PCR检测第24页
        2.1.6 Fsp、H和F基因的RT-PCR扩增第24页
        2.1.7 Fsp、H和N基因的克隆和测序第24-25页
        2.1.8 序列分析第25页
    2.2 结果第25-35页
        2.2.1 疑似犬瘟热样品的RT-PCR检测第25页
        2.2.2 Fsp、H和F基因的扩增第25-27页
        2.2.3 CDV Fsp基因的遗传进化分析第27-28页
        2.2.4 H基因序列与遗传进化分析第28-30页
        2.2.5 H氨基酸序列分析第30-31页
        2.2.6 F基因序列与遗传进化分析第31-34页
        2.2.7 F氨基酸序列分析第34-35页
    2.3 讨论第35-38页
第三章 犬瘟热病毒SD(14)7 株分离鉴定及全基因组测序与分析第38-52页
    摘要第38页
    3.1 材料与方法第38-41页
        3.1.1 细胞、毒株及实验动物第38页
        3.1.2 主要试剂和仪器第38-39页
        3.1.3 病毒分离第39-41页
    3.2 结果第41-50页
        3.2.1 病毒的分离结果第41-42页
        3.2.2 病毒的RT-PCR鉴定结果第42-43页
        3.2.3 病毒形态观察结果第43页
        3.2.4 间接免疫荧光试验结果第43-44页
        3.2.5 动物回归试验结果第44-45页
        3.2.6 SD(14)7 株全基因组分段扩增结果第45-46页
        3.2.7 SD(14)7 株全基因组拼接与分析结果第46页
        3.2.8 SD(14)7 株与GenBank登录毒株之间的相似性分析结果第46-47页
        3.2.9 SD(14)7 株全基因组的遗传进化分析第47-48页
        3.2.10 SD(14)7 株H基因的比对分析与系统发育分析第48-50页
        3.2.11 SD(14)7 株H氨基酸序列分析第50页
    3.3 讨论第50-52页
        3.3.1 病毒的分离第50-51页
        3.3.2 病毒的毒力第51页
        3.3.3 SD(14)7 株全基因组与H基因分析第51-52页
第四章 犬瘟热病毒SD(14)7 株的致病性研究第52-66页
    摘要第52页
    4.1 材料和方法第52-54页
        4.1.1 试验动物和毒株第52页
        4.1.2 主要试剂和仪器第52页
        4.1.3 病毒TCID50测定第52-53页
        4.1.4 阴性动物的筛选第53页
        4.1.5 动物的分组与攻毒第53页
        4.1.6 动物的致病性研究第53页
        4.1.7 动物组织的病理切片与免疫组化第53页
        4.1.8 病毒RNA的提取和cDNA的合成第53-54页
        4.1.9 荧光定量PCR测定病毒含量第54页
    4.2 结果第54-65页
        4.2.1 病毒TCID50测定结果第54页
        4.2.2 动物的发病特征第54-55页
        4.2.3 发病动物的组织脏器病变特征第55-57页
        4.2.4 动物组织的病理切片和免疫组化结果第57-61页
        4.2.5 动物的体温特征第61-62页
        4.2.6 动物的抗体效价第62-63页
        4.2.7 动物的排毒期第63-64页
        4.2.8 CDV在血液内的含量第64页
        4.2.9 CDV在各组织内的分布第64-65页
    4.3 讨论第65-66页
        4.3.1 动物的致病性第65页
        4.3.2 动物的体温第65页
        4.3.3 动物的排毒期与病毒在组织内的分部第65-66页
第五章 全文结论第66-67页
参考文献第67-74页
附录1 实验所用仪器汇总第74-75页
附录2 实验所需溶液的配方第75-76页
致谢第76-77页
作者简历第77页

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