符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 玉米组织培养概述 | 第12-16页 |
1.1.1 玉米组织培养现状及应用 | 第12页 |
1.1.2 玉米愈伤组织类型 | 第12-13页 |
1.1.3 不同外植体的组织培养 | 第13-15页 |
1.1.3.1 幼胚的组织培养 | 第13页 |
1.1.3.2 成熟胚的组织培养 | 第13-14页 |
1.1.3.3 花药的组织培养 | 第14页 |
1.1.3.4 芽尖的组织培养 | 第14页 |
1.1.3.5 叶片的组织培养 | 第14-15页 |
1.1.4 组织培养的影响因素 | 第15-16页 |
1.1.4.1 外植体基因型对组织培养的影响 | 第15页 |
1.1.4.2 不同外植体对组织培养的影响 | 第15页 |
1.1.4.3 外植体发育时期对组织培养的影响 | 第15-16页 |
1.1.4.4 培养基中的激素对组织培养的影响 | 第16页 |
1.2 玉米遗传转化方法 | 第16-18页 |
1.2.1 农杆菌介导法 | 第16-17页 |
1.2.2 基因枪转化法 | 第17页 |
1.2.3 花粉管通道法 | 第17-18页 |
1.2.4 PEG介导法 | 第18页 |
1.2.5 电激法 | 第18页 |
1.3 全基因组关联分析 | 第18-22页 |
1.3.1 关联分析的发展 | 第18-19页 |
1.3.2 连锁不平衡在关联分析中的应用 | 第19页 |
1.3.3 玉米的遗传多样性可以提高关联分析的能力 | 第19-20页 |
1.3.4 关联分析群体的结构 | 第20页 |
1.3.5 候选基因关联分析 | 第20-21页 |
1.3.6 全基因组关联分析 | 第21页 |
1.3.7 关联分析的限制因素 | 第21-22页 |
1.4 本研究的意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 玉米材料 | 第23页 |
2.1.2 菌株及质粒载体 | 第23页 |
2.1.3 酶与生化试剂 | 第23页 |
2.1.4 引物合成及DNA测序 | 第23-24页 |
2.1.5 实验使用的培养基 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-34页 |
2.2.1 幼胚组织培养实验 | 第24-25页 |
2.2.2 感受态细胞制备 | 第25-26页 |
2.2.2.1 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第25-26页 |
2.2.2.2 农杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
2.2.3 RNA提取方法 | 第26-27页 |
2.2.4 反转录合成cDNA第一链 | 第27页 |
2.2.5 转基因载体构建 | 第27-33页 |
2.2.5.1 候选基因的克隆 | 第27-28页 |
2.2.5.2 琼脂糖凝胶的配制及PCR产物的电泳检测 | 第28页 |
2.2.5.3 目的基因片段回收 | 第28-29页 |
2.2.5.4 克隆载体连接体系 | 第29页 |
2.2.5.5 热激法转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
2.2.5.6 大肠杆菌活化 | 第30页 |
2.2.5.7 阳性菌落筛选 | 第30页 |
2.2.5.8 质粒DNA提取 | 第30-31页 |
2.2.5.9 表达载体构建 | 第31-32页 |
2.2.5.10 电激法转化农杆菌 | 第32页 |
2.2.5.11 菌种活化与保存 | 第32-33页 |
2.2.6 玉米遗传转化 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-53页 |
3.1 玉米幼胚组织培养 | 第34-39页 |
3.1.1 玉米幼胚组织培养表型观察 | 第34页 |
3.1.2 玉米幼胚组织培养表型统计 | 第34-39页 |
3.1.2.1 初级愈伤组织诱导率 | 第35-36页 |
3.1.2.2 成熟愈伤组织诱导率 | 第36页 |
3.1.2.3 愈伤组织状态 | 第36-37页 |
3.1.2.4 愈伤组织的增殖能力 | 第37-38页 |
3.1.2.5 愈伤组织芽再生率 | 第38页 |
3.1.2.6 单个愈伤组织芽分化数 | 第38页 |
3.1.2.7 各性状间的相关性分析 | 第38-39页 |
3.2 全基因组关联分析 | 第39-45页 |
3.2.1 玉米幼胚组织培养能力关联SNPs的挖掘 | 第39-42页 |
3.2.2 候选基因功能注释 | 第42-45页 |
3.3 候选基因的功能验证 | 第45-53页 |
3.3.1 候选基因过表达载体构建 | 第45-50页 |
3.3.2 玉米遗传转化 | 第50页 |
3.3.3 遗传转化后玉米幼胚组织培养能力的观察及统计 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
附录 | 第66-79页 |
致谢 | 第79页 |