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T-2毒素影响K562细胞向红系细胞分化的分子机理研究

摘要第8-11页
Abstract第11-13页
缩略语表第14-16页
1. 前言第16-23页
    1.1 立题依据第16-17页
    1.2 T-2毒素造血系统的毒素研究进展第17-18页
    1.3 K562细胞向红系分化的研究进展第18-19页
    1.4 筛选所得差异表达基因(蛋白)功能的研究进展第19-21页
    1.5 研究目标和内容第21-23页
2 材料方法第23-40页
    2.1 细胞株第23页
    2.2 主要试剂第23-25页
    2.3 主要仪器第25-26页
    2.4 主要试剂的配制第26-28页
    2.5 差异基因和差异蛋白的筛选第28页
    2.6 细胞培养及冻存第28-29页
    2.7 实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达第29-33页
        2.7.1 细胞处理及实验分组第29-30页
        2.7.2 总RNA的提取第30-31页
        2.7.3 总RNA纯度及完整性的检测第31页
        2.7.4 逆转录反应第31-32页
        2.7.5 实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平第32页
        2.7.6 荧光定量数据分析第32-33页
    2.8 Western blot方法测定相关蛋白磷酸化水平第33-36页
        2.8.1 细胞处理及实验分组第33页
        2.8.2 总蛋白的提取第33页
        2.8.3 蛋白浓度测定第33-34页
        2.8.4 SDS-PAGE电泳第34-35页
        2.8.5 Western印迹杂交第35-36页
    2.9 RNA干扰技术检测MS4A3在红系分化中的作用第36-38页
        2.9.1 细胞处理及实验分组第36-37页
        2.9.2 RNA干扰实验第37-38页
    2.10 细胞红系分化检测第38-39页
        2.10.1 流式细胞仪检测红系分化的可行性第38-39页
        2.10.2 T-2毒素及信号通路抑制剂对K562细胞向红系细胞分化的影响第39页
        2.10.3 MS4A3基因对红系分化的影响第39页
    2.11 统计学分析第39-40页
3. 结果第40-72页
    3.1 红系分化潜在的功能基因和蛋白第40-41页
    3.2 K562细胞培养第41页
    3.3 引物设计及检测第41-45页
        3.3.1 引物设计第41-42页
        3.3.2 RNA质量鉴定第42-43页
        3.3.3 引物可靠性检测第43-45页
    3.4 差异基因(蛋白)在T-2毒素影响K562细胞向红系分化中的作用第45-62页
        3.4.1 T-2毒素和信号通路抑制剂对K562细胞向红系分化的影响第45-49页
        3.4.2 T-2毒素影响差异基因mRNA表达水平的时效关系第49-51页
        3.4.3 差异基因(蛋白)与信号转导通路间的关系第51-62页
    3.5 MS4A3在红系分化中的作用第62-72页
        3.5.1 siRNA干扰效率与剂量第62-64页
        3.5.2 MS4A3与K562细胞向红系分化的关系第64-68页
        3.5.3 信号通路对MS4A3基因的调控作用第68-69页
        3.5.4 MS4A3基因与其他差异表达基因(蛋白)间的关系第69-72页
4. 讨论第72-81页
    4.1 红系分化检测方法的确定第72-73页
    4.2 红系分化相关的基因和蛋白的选择第73页
    4.3 T-2毒素抑制K562细胞分化的途径第73-77页
    4.4 MS4A3是T-2毒素调控红系分化的关键基因第77-78页
    4.5 红系分化相关的潜在分子机理第78-81页
5. 结论第81-83页
6 文献综述:单端孢霉烯族毒素的毒性作用机理研究进展第83-95页
    6.1 引言第83-84页
    6.2 单端孢霉烯族毒素的特性第84-87页
        6.2.1 T-2毒素的特性第84-85页
        6.2.2 雪腐镰刀菌烯醇的特性第85-86页
        6.2.3 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)的特性第86-87页
    6.3 单端孢霉烯族毒素的毒性第87-92页
        6.3.1 急性毒性第88页
        6.3.2 血液系统毒性第88-89页
        6.3.3 免疫系统毒性第89-90页
        6.3.4 细胞毒性第90-91页
        6.3.5 神经毒性第91页
        6.3.6 遗传毒性第91页
        6.3.7 致癌、致畸、致突变作用第91-92页
    6.4 单端孢霉烯族毒素毒性作用的分子机制第92-94页
        6.4.1 单端孢霉烯族毒素诱导细胞凋亡的分子机制第92页
        6.4.2 单端孢霉烯族毒素影响细胞增殖的分子机理第92-93页
        6.4.3 单端孢霉烯族毒素对mRNA翻译的抑制作用第93页
        6.4.4 单端孢霉烯族毒素对MAPKs信号通路的影响第93-94页
    6.5 结论与展望第94-95页
参考文献第95-108页
致谢第108-109页
附录第109-123页

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