| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-24页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒概述 | 第14-18页 |
| 1.1.1 病原学 | 第14-15页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第15页 |
| 1.1.3 临床症状和病理变化 | 第15页 |
| 1.1.4 发病机理 | 第15-16页 |
| 1.1.5 PRRSV的基因组结构与病毒粒子的主要蛋白 | 第16-17页 |
| 1.1.6 疫苗研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2 PRRS诊断方法 | 第18-20页 |
| 1.2.1 病毒的分离与鉴定 | 第18页 |
| 1.2.2 间接免疫荧光（IFA） | 第18页 |
| 1.2.3 免疫过氧化物酶吸附实验（IPMA） | 第18页 |
| 1.2.4 血清中和实验（SNT） | 第18页 |
| 1.2.5 酶联免疫吸附实验（ELISA） | 第18-19页 |
| 1.2.6 乳胶凝集实验（LAT） | 第19页 |
| 1.2.7 实时荧光定量PCR(RT-PCR) | 第19页 |
| 1.2.8 基因芯片（Gene chip） | 第19页 |
| 1.2.9 核酸探针原位杂交（ISH） | 第19-20页 |
| 1.2.10环介导等温扩增反应（LAMP） | 第20页 |
| 1.3 巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.1 毕赤酵母的生物学特性 | 第20页 |
| 1.3.2 表达载体及菌株 | 第20-21页 |
| 1.3.3 毕赤酵母外源蛋白表达的影响因素 | 第21-22页 |
| 1.3.4 巴斯德毕赤酵母表达系统应用前景 | 第22页 |
| 1.4 本课题研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 HP-PRRSV dGP5优化基因在毕赤酵母中的高效表达及免疫原性鉴定 | 第24-44页 |
| 摘要 | 第24页 |
| 2.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第24页 |
| 2.1.2 毒株、细胞、抗体和实验动物 | 第24页 |
| 2.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.5 酵母用培养基 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 基因优化 | 第26页 |
| 2.2.2 dGP5蛋白在毕赤酵母中的分泌表达 | 第26-29页 |
| 2.2.3 dGP5重组菌株在摇瓶的诱导表达及其纯化 | 第29-31页 |
| 2.2.4 免疫原性鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3 结果 | 第32-41页 |
| 2.3.1 基因优化 | 第32-35页 |
| 2.3.2 dGP5蛋白在毕赤酵母中的分泌表达 | 第35-37页 |
| 2.3.3 dGP5重组菌株在摇瓶的诱导表达及其纯化 | 第37-40页 |
| 2.3.4 免疫原性鉴定 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-44页 |
| 2.4.1 HP-PRRSV dGP5基因的优化 | 第41页 |
| 2.4.2 dGP5蛋白在毕赤酵母中的分泌表达 | 第41-42页 |
| 2.4.3 dGP5重组菌株在摇瓶的诱导表达及其纯化 | 第42-43页 |
| 2.4.4 免疫原性鉴定 | 第43-44页 |
| 第三章 检测GP5蛋白抗体间接ELISA方法的建立 | 第44-52页 |
| 摘要 | 第44页 |
| 3.1 材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第44页 |
| 3.1.2 血清 | 第44页 |
| 3.1.3 主要试剂和耗材 | 第44-45页 |
| 3.2 方法 | 第45-46页 |
| 3.2.1 间接ELISA检测条件优化 | 第45页 |
| 3.2.2 阴阳性临界值的确定 | 第45-46页 |
| 3.2.3 重复性试验 | 第46页 |
| 3.2.4 特异性试验 | 第46页 |
| 3.2.5 与LSI试剂盒的比较试验 | 第46页 |
| 3.3 结果 | 第46-51页 |
| 3.3.1 抗原最佳包被浓度和血清稀释度的确定 | 第46-47页 |
| 3.3.2 酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第47页 |
| 3.3.3 封闭液的确定 | 第47页 |
| 3.3.4 血清最佳工作时间的确定 | 第47-48页 |
| 3.3.5 酶标二抗最佳工作时间的确定 | 第48页 |
| 3.3.6 最佳显色时间的确定 | 第48页 |
| 3.3.7 阴阳性临界值的确定 | 第48-49页 |
| 3.3.8 重复性试验 | 第49-50页 |
| 3.3.9 特异性试验 | 第50页 |
| 3.3.10与LSI试剂盒的比较试验 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |
