| 附录 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 Ouabain对食管腺癌细胞的抑制作用 | 第13-20页 |
| 1.1 实验材料 | 第13-14页 |
| 1.1.1 实验细胞 | 第13页 |
| 1.1.2 细胞培养液 | 第13页 |
| 1.1.3 药物 | 第13-14页 |
| 1.1.4 主要仪器和试剂 | 第14页 |
| 1.2 实验方法 | 第14-16页 |
| 1.2.1 抑制食管腺癌细胞增殖的药物筛选 | 第14页 |
| 1.2.2 Ouabain对食管腺癌细胞体外生长曲线的影响 | 第14-15页 |
| 1.2.3 Ouabain对食管腺癌细胞体内成瘤实验的影响 | 第15-16页 |
| 1.3 实验结果 | 第16-17页 |
| 1.3.1 抑制食管腺癌细胞增殖的药物筛选 | 第16页 |
| 1.3.2 Ouabain对食管腺癌细胞体外生长曲线的影响 | 第16-17页 |
| 1.3.3 Ouabain对食管腺癌细胞体内成瘤实验的影响 | 第17页 |
| 1.4 讨论 | 第17-20页 |
| 1.4.1 抑制食管腺癌细胞增殖的药物筛选 | 第17-18页 |
| 1.4.2 Ouabain对食管腺癌细胞体外生长曲线的抑制 | 第18-19页 |
| 1.4.3 Ouabain对食管腺癌细胞体内成瘤实验的抑制 | 第19-20页 |
| 第二章 Ouabain通过调控MKK6抑制食管腺癌细胞的增殖 | 第20-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 shRNA | 第20页 |
| 2.1.2 引物设计 | 第20页 |
| 2.1.3 抗体 | 第20页 |
| 2.1.4 慢病毒载体 | 第20-21页 |
| 2.1.5 实验细胞 | 第21页 |
| 2.1.6 细胞培养液 | 第21页 |
| 2.1.7 细菌培养基 | 第21页 |
| 2.1.8 主要仪器和试剂 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 RNA测序 | 第22页 |
| 2.2.2 Ouabain对食管腺癌细胞内MKK6 mRNA表达量影响 | 第22-23页 |
| 2.2.3 Ouabain对食管腺癌细胞内MKK6蛋白表达量影响 | 第23-24页 |
| 2.2.4 shRNA介导的MKK6基因敲落 | 第24-25页 |
| 2.2.5 MKK6基因敲落对食管腺癌细胞体外生长曲线的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.6 MKK6基因敲落对食管腺癌细胞体内成瘤实验的影响 | 第26-27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-32页 |
| 2.3.1 RNA测序 | 第27页 |
| 2.3.2 Ouabain对食管腺癌细胞内MKK6 mRNA表达量影响 | 第27页 |
| 2.3.3 Ouabain对食管腺癌细胞内MKK6蛋白表达量影响 | 第27-29页 |
| 2.3.4 shRNA介导的MKK6基因敲落 | 第29-30页 |
| 2.3.5 MKK6基因敲落对食管腺癌细胞体外生长曲线的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.6 MKK6基因敲落对食管腺癌细胞体内成瘤实验的影响 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 2.4.1 Ouabian对食管腺癌细胞内MKK6基因的调控 | 第32-33页 |
| 2.4.2 MKK6基因对食管腺癌细胞体内外增殖的抑制 | 第33-34页 |
| 第三章 MKK6下游转录因子SOX9对食管腺癌细胞增殖的影响 | 第34-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 引物设计 | 第34页 |
| 3.1.2 抗体 | 第34页 |
| 3.1.3 sgRNA设计 | 第34-35页 |
| 3.1.4 CRISPR-Cas载体 | 第35页 |
| 3.1.5 培养基的配置 | 第35页 |
| 3.1.6 主要仪器和试剂 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-40页 |
| 3.2.1 2.1MKK6基因敲落对SOX9 mRNA表达量的调控 | 第36页 |
| 3.2.2 MKK6 基因敲落对SOX9蛋白表达量的调控 | 第36页 |
| 3.2.3 CRISPR-Cas介导的SOX9基因敲除 | 第36-40页 |
| 3.2.4 SOX9基因敲除对食管腺癌细胞体外生长曲线的影响 | 第40页 |
| 3.2.5 SOX9基因敲除对食管腺癌细胞体内皮下成瘤实验的影响 | 第40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-43页 |
| 3.3.1 MKK6基因敲落对SOX9 mRNA表达量的调控 | 第40-41页 |
| 3.3.2 Ouabain作用及MKK6基因敲落对SOX9蛋白表达量的调控 | 第41页 |
| 3.3.3 CRISPR-Cas9介导的SOX9基因敲除 | 第41-42页 |
| 3.3.4 SOX9基因敲除对食管腺癌细胞体外生长曲线影响 | 第42页 |
| 3.3.5 SOX9基因敲除对食管腺癌细胞体内成瘤实验的影响 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 3.4.1 MKK6对下游基因SOX9的调控 | 第43-45页 |
| 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 综述 | 第49-59页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
