摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-17页 |
1.1 牛肠道病毒概述 | 第11-14页 |
1.1.1 牛肠道病毒的发现与流行 | 第11-12页 |
1.1.2 牛肠道病毒致病性研究进展 | 第12页 |
1.1.3 牛肠道病毒的结构 | 第12-13页 |
1.1.4 非结构蛋白 2A和 3C功能概述 | 第13-14页 |
1.2 抗病毒天然免疫概述 | 第14-15页 |
1.2.1 抗病毒天然免疫简介 | 第14页 |
1.2.2 干扰素的抗病毒作用和机制 | 第14-15页 |
1.3 RLRS及其信号转导通路 | 第15-16页 |
1.3.1 RLRs | 第15页 |
1.3.2 MAVS概述 | 第15-16页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 细胞、病毒和实验动物 | 第17页 |
2.1.2 质粒和菌种 | 第17页 |
2.1.3 试剂、抗体 | 第17-18页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第18页 |
2.1.5 主要仪器 | 第18-19页 |
2.1.6 引物序列 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-29页 |
2.2.1 BEV培养和滴度测定 | 第20-21页 |
2.2.2 BEV感染对生成干扰素信号通路的影响 | 第21-22页 |
2.2.3 非结构蛋白 2A、3C对生成干扰素信号通路的影响 | 第22-27页 |
2.2.4 MAVS对干扰素生成信号通路的影响 | 第27-28页 |
2.2.5 统计学分析 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-45页 |
3.1 BEV培养和毒力测定 | 第29-30页 |
3.2 BEV感染对生成干扰素信号通路的影响 | 第30-33页 |
3.2.1 BEV感染对牛IFN-β 及ISGs表达量的影响 | 第30-31页 |
3.2.2 BEV感染对RLR信号通路关键分子的影响 | 第31-33页 |
3.3 非结构蛋白 2A、3C对生成干扰素信号通路的影响 | 第33-40页 |
3.3.1 BEV-2A和BEV-3C基因克隆、重组表达载体构建 | 第33-35页 |
3.3.2 BEV 2A和BEV 3C蛋白表达及多克隆抗体制备 | 第35-36页 |
3.3.3 BEV 2A和BEV 3C对牛IFN-β 和ISGs表达的影响 | 第36-37页 |
3.3.4 BEV 2A和BEV 3C对RLR信号通路关键分子的影响 | 第37-39页 |
3.3.5 BEV 2A和BEV 3C对Bo IFN-β 启动子、ISRE、NF-κB活性的影响 | 第39-40页 |
3.4 MAVS对干扰素生成信号通路的影响 | 第40-45页 |
3.4.1 2A和 3C抑制过表达MAVS引起的抗病毒免疫反应 | 第40-41页 |
3.4.2 干扰MAVS表达对干扰素生成信号通路的影响 | 第41-43页 |
3.4.3 干扰MAVS表达对BEV增殖的影响 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 BEV感染对生成干扰素信号通路的影响 | 第45页 |
4.1.1 BEV感染对干扰素和ISGs表达影响 | 第45页 |
4.1.2 BEV感染对RLR信号通路关键分子表达影响 | 第45页 |
4.2 2A和 3C对生成干扰素信号通路的影响 | 第45-46页 |
4.2.1 2A和 3C对干扰素、ISGs和关键分子表达影响 | 第45-46页 |
4.2.2 2A和 3C对IFN-β 启动子、ISRE和NF-κB的影响 | 第46页 |
4.3 MAVS对干扰素生成信号通路的影响 | 第46-48页 |
4.3.1 2A和 3C抑制过表达MAVS引起的抗病毒免疫反应 | 第46-47页 |
4.3.2 干扰MAVS表达对干扰素生成信号通路的影响 | 第47页 |
4.3.3 干扰MAVS表达对BEV增殖的影响 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |