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牛肠道病毒2A和3C蛋白酶通过负调控MAVS抑制牛β干扰素表达的研究

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 前言第11-17页
    1.1 牛肠道病毒概述第11-14页
        1.1.1 牛肠道病毒的发现与流行第11-12页
        1.1.2 牛肠道病毒致病性研究进展第12页
        1.1.3 牛肠道病毒的结构第12-13页
        1.1.4 非结构蛋白 2A和 3C功能概述第13-14页
    1.2 抗病毒天然免疫概述第14-15页
        1.2.1 抗病毒天然免疫简介第14页
        1.2.2 干扰素的抗病毒作用和机制第14-15页
    1.3 RLRS及其信号转导通路第15-16页
        1.3.1 RLRs第15页
        1.3.2 MAVS概述第15-16页
    1.4 本研究的目的与意义第16-17页
2 材料与方法第17-29页
    2.1 实验材料第17-20页
        2.1.1 细胞、病毒和实验动物第17页
        2.1.2 质粒和菌种第17页
        2.1.3 试剂、抗体第17-18页
        2.1.4 主要溶液的配制第18页
        2.1.5 主要仪器第18-19页
        2.1.6 引物序列第19-20页
    2.2 实验方法第20-29页
        2.2.1 BEV培养和滴度测定第20-21页
        2.2.2 BEV感染对生成干扰素信号通路的影响第21-22页
        2.2.3 非结构蛋白 2A、3C对生成干扰素信号通路的影响第22-27页
        2.2.4 MAVS对干扰素生成信号通路的影响第27-28页
        2.2.5 统计学分析第28-29页
3 结果与分析第29-45页
    3.1 BEV培养和毒力测定第29-30页
    3.2 BEV感染对生成干扰素信号通路的影响第30-33页
        3.2.1 BEV感染对牛IFN-β 及ISGs表达量的影响第30-31页
        3.2.2 BEV感染对RLR信号通路关键分子的影响第31-33页
    3.3 非结构蛋白 2A、3C对生成干扰素信号通路的影响第33-40页
        3.3.1 BEV-2A和BEV-3C基因克隆、重组表达载体构建第33-35页
        3.3.2 BEV 2A和BEV 3C蛋白表达及多克隆抗体制备第35-36页
        3.3.3 BEV 2A和BEV 3C对牛IFN-β 和ISGs表达的影响第36-37页
        3.3.4 BEV 2A和BEV 3C对RLR信号通路关键分子的影响第37-39页
        3.3.5 BEV 2A和BEV 3C对Bo IFN-β 启动子、ISRE、NF-κB活性的影响第39-40页
    3.4 MAVS对干扰素生成信号通路的影响第40-45页
        3.4.1 2A和 3C抑制过表达MAVS引起的抗病毒免疫反应第40-41页
        3.4.2 干扰MAVS表达对干扰素生成信号通路的影响第41-43页
        3.4.3 干扰MAVS表达对BEV增殖的影响第43-45页
4 讨论第45-48页
    4.1 BEV感染对生成干扰素信号通路的影响第45页
        4.1.1 BEV感染对干扰素和ISGs表达影响第45页
        4.1.2 BEV感染对RLR信号通路关键分子表达影响第45页
    4.2 2A和 3C对生成干扰素信号通路的影响第45-46页
        4.2.1 2A和 3C对干扰素、ISGs和关键分子表达影响第45-46页
        4.2.2 2A和 3C对IFN-β 启动子、ISRE和NF-κB的影响第46页
    4.3 MAVS对干扰素生成信号通路的影响第46-48页
        4.3.1 2A和 3C抑制过表达MAVS引起的抗病毒免疫反应第46-47页
        4.3.2 干扰MAVS表达对干扰素生成信号通路的影响第47页
        4.3.3 干扰MAVS表达对BEV增殖的影响第47-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-55页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第55页

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