中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
序言 | 第11-22页 |
1. 适配体筛选 | 第11-16页 |
2. 适配体的应用 | 第16-18页 |
3. 胰腺癌 | 第18-20页 |
4. 本文研究内容 | 第20-22页 |
第一章 细胞选择和文库引物性能评价 | 第22-36页 |
1. 引言 | 第22页 |
2. 实验 | 第22-26页 |
2.1 试剂与仪器 | 第22-23页 |
2.2 细胞选择与培养 | 第23-24页 |
2.3 文库引物的选择与合成 | 第24页 |
2.4 引物序列软件分析和PCR扩增 | 第24-26页 |
3. 结果讨论 | 第26-34页 |
3.1 细胞选择与培养 | 第26-29页 |
3.2 文库引物序列分析 | 第29-32页 |
3.3 文库引物PCR扩增分析 | 第32-34页 |
4. 小结 | 第34-36页 |
第二章 文库PCR扩增的优化方法研究 | 第36-64页 |
1. 引言 | 第36页 |
2. 实验 | 第36-40页 |
2.1 试剂与仪器 | 第36-37页 |
2.2 试液和电泳胶配制 | 第37页 |
2.3 原始文库PCR | 第37-38页 |
2.4 次级文库PCR | 第38-39页 |
2.5 次级文库切胶回收—PCR | 第39-40页 |
3. 结果讨论 | 第40-63页 |
3.1 PCR优化方案设计 | 第40-41页 |
3.2 PCR扩增特异性与效率的影响因素考察 | 第41-47页 |
3.3 原始文库的PCR扩增条件优化 | 第47-53页 |
3.4 次级文库PCR | 第53-58页 |
3.5 次级文库切胶回收—PCR | 第58-60页 |
3.6 循环数对PCR的显著性影响 | 第60-63页 |
4. 小结 | 第63-64页 |
第三章 次级文库的制备方法研究 | 第64-89页 |
1. 引言 | 第64页 |
2. 实验 | 第64-67页 |
2.1 试剂与仪器 | 第64-65页 |
2.2 建立目的ssDNA的紫外吸收定量分析方法 | 第65页 |
2.3 建立目的ssDNA的荧光定量分析方法 | 第65-66页 |
2.4 PCR产物目的单链分离 | 第66-67页 |
2.5 乙醇沉淀法回收目的ssDNA | 第67页 |
3. 结果讨论 | 第67-88页 |
3.1 基于生物素-亲和素系统的PCR产物目的单链分离原理 | 第67-69页 |
3.2 目的ssDNA分离过程监控与评价 | 第69-78页 |
3.3 目的ssDNA定量分析方法评价 | 第78-81页 |
3.4 目的ssDNA回收与定量分析 | 第81-86页 |
3.5 目的ssDNA的紫外和荧光光谱定量分析方法的适用性考察 | 第86-88页 |
4. 小结 | 第88-89页 |
第四章 细胞适配体筛选方法研究 | 第89-106页 |
1. 引言 | 第89-90页 |
2. 实验 | 第90-93页 |
2.1 试剂与仪器 | 第90-91页 |
2.2 缓冲液配制 | 第91页 |
2.3 靶细胞正向筛选 | 第91-92页 |
2.4 对照细胞反向筛选 | 第92页 |
2.5 流式细胞术表征次级文库 | 第92-93页 |
3. 结果讨论 | 第93-105页 |
3.1 细胞适配体筛选和筛选强度调整 | 第93-97页 |
3.2 流式细胞术表征 | 第97-104页 |
3.3 筛选与筛选强度调整方法评价 | 第104-105页 |
4. 小结 | 第105-106页 |
结论与展望 | 第106-108页 |
1. 结论 | 第106-107页 |
2. 展望 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-117页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-119页 |