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蝗绿僵菌STE转录因子MaSte12基因的功能研究

中文摘要第3-4页
英文摘要第4-5页
缩略词第8-9页
1 绪论第9-15页
    1.1 引言第9-10页
    1.2 研究背景与研究进展第10-12页
    1.3 研究目的与研究意义第12页
        1.3.1 研究目的第12页
        1.3.2 研究意义第12页
    1.4 研究内容和技术路线第12-13页
        1.4.1 研究内容第12-13页
        1.4.2 技术路线第13页
    1.5 课题创新之处第13-15页
2 绿僵菌MaSte12基因的克隆及功能研究第15-79页
    2.1 主要实验材料第15-21页
        2.1.1 供试菌株及实验昆虫第15页
        2.1.2 质粒载体第15页
        2.1.3 主要试剂及试剂盒第15-16页
        2.1.4 主要实验溶液及培养基配制第16-20页
        2.1.5 主要实验仪器与器材第20-21页
    2.2 主要研究方法第21-51页
        2.2.1 真菌的RNA提取及cDNA反转录第21-24页
        2.2.2 半定量与定量实验第24-26页
        2.2.3 MaSte12基因全长比对及cDNA全长克隆第26-28页
        2.2.4 MaSte12蛋白的生物信息学分析第28-29页
        2.2.5 大肠杆菌感受态细胞转化第29-30页
        2.2.6 根癌农杆菌感受态细胞转化第30-31页
        2.2.7 农杆菌介导的绿僵菌转化(ATMT)第31-32页
        2.2.8 真菌Genome DNA大量提取第32-34页
        2.2.9 真菌基因组微量提取第34页
        2.2.10 敲除与回复载体构建第34-37页
        2.2.11 PCR初筛敲除与回复转化子第37-38页
        2.2.12 Southern blot验证转化子第38-41页
        2.2.13 毒力测试第41-42页
        2.2.14 侵染结构观察第42-43页
        2.2.15 血淋巴中虫菌体观察第43-44页
        2.2.16 生长与抗逆能力测定第44-45页
        2.2.17 差异表达基因分析第45-48页
        2.2.18 差异表达基因验证第48-51页
        2.2.19 实验数据统计分析第51页
    2.3 实验结果与分析第51-76页
        2.3.1 MaSte12生物信息学分析第51-54页
        2.3.2 MaSte12敲除、回复载体构建与转化子筛选第54-55页
        2.3.3 MaSte12缺失影响绿僵菌孢子萌发,但不影响产孢和逆境耐受能力第55-58页
        2.3.4 MaSte12缺失菌株对蝗虫的侵染致病能力基本丧失第58-60页
        2.3.5 MaSte12缺失菌株附着胞形成率降低第60-63页
        2.3.6 受MaSte12调节的差异表达基因和信号通路分析第63-76页
    2.4 讨论第76-79页
3 主要实验结论与后续工作建议第79-81页
    3.1 主要实验结论第79页
    3.2 后续工作第79-81页
致谢第81-83页
参考文献第83-91页
附录第91-118页
    A 序列第91-92页
    B 附表第92-118页

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