| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-30页 |
| 1.1 轮状病毒概述 | 第11-17页 |
| 1.1.1 轮状病毒的外形特征 | 第11-12页 |
| 1.1.2 轮状病毒主要抗原的生物学特性 | 第12-15页 |
| 1.1.3 致病机制 | 第15-16页 |
| 1.1.4 轮状病毒的流行病学特点 | 第16-17页 |
| 1.2 轮状病毒检测方法的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 经典检测技术 | 第17-18页 |
| 1.2.2 免疫检测技术 | 第18-19页 |
| 1.2.3 基因检测技术 | 第19-20页 |
| 1.3 单克隆抗体概述 | 第20-28页 |
| 1.3.1 抗体的结构及其性质 | 第20-21页 |
| 1.3.2 单克隆抗体制备的影响因素 | 第21-28页 |
| 1.4 本课题的研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 第2章 ELISA检测方法的建立 | 第30-41页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第30-32页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第31页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.2.1 阳性血清与阴性血清的制备 | 第32页 |
| 2.2.2 抗原包被最佳浓度与对照血清最佳稀释度的确定 | 第32-33页 |
| 2.2.3 最佳封闭条件确定 | 第33-34页 |
| 2.2.4 酶标二抗最佳作用时间的确定 | 第34页 |
| 2.2.5 底物液最佳作用时间的确定 | 第34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-39页 |
| 2.3.1 最佳抗原及抗体工作浓度的确定 | 第34-35页 |
| 2.3.2 最佳封闭条件的确定 | 第35-37页 |
| 2.3.3 酶标二抗最佳作用时间的确定 | 第37-38页 |
| 2.3.4 底物液最佳作用时间的确定 | 第38-39页 |
| 2.4 本章小结 | 第39-41页 |
| 第3章 单克隆杂交瘤的制备 | 第41-60页 |
| 3.1 材料仪器与试剂 | 第41-44页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第41-42页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第42页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第42-44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-52页 |
| 3.2.1 BALB/C小鼠的免疫 | 第44-46页 |
| 3.2.2 ELISA测定小鼠血清效价 | 第46页 |
| 3.2.3 蛋白免疫印迹法（Western-blot）检测抗血清特异性 | 第46-48页 |
| 3.2.4 细胞融合 | 第48-50页 |
| 3.2.5 杂交瘤细胞株的建立和筛选 | 第50页 |
| 3.2.6 杂交瘤细胞的单克隆及扩大培养 | 第50-51页 |
| 3.2.7 阳性杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第51页 |
| 3.2.8 单克隆杂交瘤细胞的定性检测 | 第51-52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-59页 |
| 3.3.1 小鼠的免疫 | 第52-54页 |
| 3.3.2 细胞融合 | 第54-55页 |
| 3.3.3 阳性杂交瘤的筛选与单克隆杂交瘤细胞株的建立 | 第55-57页 |
| 3.3.4 单克隆杂交瘤细胞的定性检测 | 第57-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 单克隆抗体的制备纯化及鉴定 | 第60-72页 |
| 4.1 仪器与试剂 | 第60-62页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第60-61页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第61页 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 | 第61-62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-66页 |
| 4.2.1 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第62-63页 |
| 4.2.2 抗体的制备和纯化 | 第63-64页 |
| 4.2.3 抗体效价的测定 | 第64页 |
| 4.2.4 SDS-PAGE分析抗体纯度 | 第64页 |
| 4.2.5 抗体浓度的测定 | 第64页 |
| 4.2.6 单克隆杂交瘤细胞分泌抗体稳定性鉴定 | 第64-65页 |
| 4.2.7 单克隆抗体特异性分析 | 第65-66页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第66-71页 |
| 4.3.1 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第66-67页 |
| 4.3.2 抗体效价的测定 | 第67页 |
| 4.3.3 抗体的鉴定 | 第67-68页 |
| 4.3.4 抗体浓度的测定 | 第68-69页 |
| 4.3.5 单克隆杂交瘤细胞分泌抗体稳定性鉴定 | 第69页 |
| 4.3.6 单克隆抗体特异性分析 | 第69-71页 |
| 4.4 本章小结 | 第71-72页 |
| 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第81-82页 |
