| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第12-19页 |
| 1 渔药的使用及安全管理 | 第12页 |
| 2 中华绒螯蟹养殖规模及病害防治措施 | 第12-13页 |
| 3 恩诺沙星在中华绒螯蟹养殖中的应用 | 第13-17页 |
| 3.1 氟喹诺酮类药物在水产养殖业的应用 | 第13页 |
| 3.2 恩诺沙星的药物特点及作用机理 | 第13-14页 |
| 3.3 恩诺沙星在生物体内的药动学研究 | 第14-16页 |
| 3.4 恩诺沙星在养殖环境中的残留水平、行为及归趋研究 | 第16-17页 |
| 4 转录组学技术在水产动物及细菌性疾病中的应用 | 第17-18页 |
| 5 本研究的目的、意义及主要内容 | 第18-19页 |
| 第一章 模拟中华绒螯蟹养殖系统的建立及恩诺沙星残留检测方法建立 | 第19-31页 |
| 1 材料与方法 | 第19-22页 |
| 1.1 模拟中华绒螯蟹养殖系统 | 第19-20页 |
| 1.1.1 仪器设备及材料 | 第19页 |
| 1.1.2 试验生物 | 第19页 |
| 1.1.3 模拟中华绒螯蟹养殖系统的构建 | 第19-20页 |
| 1.2 饲料给药试验 | 第20-21页 |
| 1.2.1 试验分组 | 第20页 |
| 1.2.2 试验给药方式及饲料管理 | 第20页 |
| 1.2.3 样品采集及保存 | 第20-21页 |
| 1.3 恩诺沙星及环丙沙星的检测方法 | 第21页 |
| 1.3.1 设备及仪器 | 第21页 |
| 1.3.2 试剂配制 | 第21页 |
| 1.3.3 液相色谱条件及操作系数 | 第21页 |
| 1.4 样品前处理方法 | 第21-22页 |
| 1.4.1 中华绒螯蟹及螺蛳样品前处理 | 第21页 |
| 1.4.2 金鱼藻及底泥样品前处理 | 第21-22页 |
| 1.4.3 水样前处理 | 第22页 |
| 1.5 标准液制备及标注曲线绘制 | 第22页 |
| 1.6 回收率及精密度测定 | 第22页 |
| 1.6.1 恩诺沙星的样品回收率和精密度测定 | 第22页 |
| 1.6.2 环丙沙星的样品回收率和精密度测定 | 第22页 |
| 1.7 数据处理 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-29页 |
| 2.1 色谱行为 | 第22-23页 |
| 2.2 标准曲线、线性范围及检测限 | 第23-26页 |
| 2.3 回收率和精密度 | 第26-29页 |
| 2.3.1 恩诺沙星回收率和精密度测定 | 第26-28页 |
| 2.3.2 环丙沙星回收率和精密度测定 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 3.1 模拟中华绒螯蟹养殖系统的建立 | 第29-30页 |
| 3.2 前处理及检测方法的建立 | 第30-31页 |
| 第二章 恩诺沙星在中华绒螯蟹养殖系统中的蓄积及消除规律分析 | 第31-44页 |
| 1 材料及方法 | 第31页 |
| 1.1 模拟水生态系统的建立 | 第31页 |
| 1.2 饲料给药试验 | 第31页 |
| 1.3 检测方法 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-42页 |
| 2.1 恩诺沙星及代谢产物环丙沙星的含量测定 | 第31-33页 |
| 2.2 恩诺沙星在各组分的含量变化及消除规律 | 第33-38页 |
| 2.2.1 恩诺沙星在水体、底泥及金鱼藻中的含量变化及消除规律 | 第33-36页 |
| 2.2.2 恩诺沙星在中华绒螯蟹、螺蛳中的含量变化及消除规律 | 第36-38页 |
| 2.3 环丙沙星在各组分的含量变化及消除规律 | 第38-42页 |
| 2.3.1 环丙沙星在水体、底泥及金鱼藻中的含量变化及消除规律 | 第38-40页 |
| 2.3.2 环丙沙星在中华绒螯蟹及螺蛳中的含量变化 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 3.1 恩诺沙星及代谢产物环丙沙星在水体、底泥及金鱼藻中的分布及消除规律 | 第42-43页 |
| 3.2 恩诺沙星及代谢产物环丙沙星在中华绒螯蟹及螺蛳中的分布及消除规律 | 第43-44页 |
| 第三章 口灌恩诺沙星对中华绒螯蟹肝胰腺的转录组学分析 | 第44-53页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| 1.1 实验材料及试剂 | 第44页 |
| 1.2 口灌给药试验 | 第44页 |
| 1.3 总RNA的提取及质量控制 | 第44页 |
| 1.4 cDNA文库的制备 | 第44-45页 |
| 1.5 测序数据的拼接和组装 | 第45页 |
| 1.6 基因功能注释 | 第45页 |
| 1.7 差异基因的筛选及分析 | 第45页 |
| 1.8 qRT-PCR验证 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-51页 |
| 2.1 测序质量评估及控制 | 第46页 |
| 2.2 参考基因比较分析核 | 第46页 |
| 2.3 中华绒螯蟹unigenes功能注释 | 第46-47页 |
| 2.4 差异表达基因筛选 | 第47-48页 |
| 2.5 差异表达基因的GO富集分析 | 第48-49页 |
| 2.6 差异表达基因的KEGG富集分析 | 第49页 |
| 2.7 差异表达基因的验证 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 嗜水气单胞杆菌对恩诺沙星耐药性的转录组学分析 | 第53-60页 |
| 1 材料与方法 | 第53-54页 |
| 1.1 嗜水气单胞杆菌的培养 | 第53页 |
| 1.2 最低抑菌浓度测试及耐药型菌株诱导 | 第53页 |
| 1.3 总RNA的提取及质量控制 | 第53页 |
| 1.4 cDNA文库的制备 | 第53页 |
| 1.5 测序数据的拼接和组装 | 第53-54页 |
| 1.6 基因功能注释 | 第54页 |
| 1.7 差异基因的筛选及分析 | 第54页 |
| 1.8 qRT-PCR验证 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-59页 |
| 2.1 测序质量评估及控制 | 第54页 |
| 2.2 参考基因比较分析核 | 第54-55页 |
| 2.3 unigenes功能注释 | 第55页 |
| 2.4 差异表达基因筛选 | 第55-56页 |
| 2.5 差异表达基因的GO富集分析 | 第56-57页 |
| 2.6 差异表达基因的KEGG富集分析 | 第57页 |
| 2.7 差异表达基因的验证 | 第57-59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
