| 摘要 | 第3-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 中英文缩略词表 | 第6-11页 |
| 第一章 兔豆状带绦虫及带科绦虫免疫原基因的研究进展 | 第11-19页 |
| 1 兔豆状囊尾蚴病概述 | 第11-12页 |
| 1.1 病原 | 第11页 |
| 1.2 豆状带绦虫生活史 | 第11页 |
| 1.3 流行病学 | 第11页 |
| 1.4 临床症状和病理变化 | 第11-12页 |
| 1.5 诊断与防治 | 第12页 |
| 1.5.1 诊断 | 第12页 |
| 1.5.2 防治 | 第12页 |
| 2 带科绦虫免疫原基因的研究进展 | 第12-17页 |
| 2.1 45 W基因 | 第13-15页 |
| 2.1.1 带科绦虫 45 W基因的结构及特征 | 第13-14页 |
| 2.1.2 45W基因剪接方式 | 第14-15页 |
| 2.1.3 45W蛋白 | 第15页 |
| 2.2 8ku蛋白与基因 | 第15-16页 |
| 2.3 18kd和16kd基因 | 第16-17页 |
| 3 带科绦虫抗原定位的研究进展 | 第17-18页 |
| 4 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 豆状带绦虫的人工感染试验 | 第19-24页 |
| 1 材料与方法 | 第19-20页 |
| 1.1 材料 | 第19页 |
| 1.1.1 虫种和实验动物 | 第19页 |
| 1.1.2 仪器 | 第19页 |
| 1.1.3 试剂及溶液配制 | 第19页 |
| 1.2 方法 | 第19-20页 |
| 1.2.1 犬及家兔的处理 | 第19-20页 |
| 1.2.2 犬的感染及虫卵的收集和处理 | 第20页 |
| 1.2.3 豆状囊尾蚴人工感染家兔 | 第20页 |
| 2 结果 | 第20-23页 |
| 2.1 成虫的收集与保存 | 第20页 |
| 2.2 犬感染豆状囊尾蚴后的临床表现 | 第20-21页 |
| 2.3 兔感染豆状囊尾蚴后的临床症状 | 第21页 |
| 2.4 剖检后的眼观病理变化 | 第21-22页 |
| 2.5 感染率 | 第22页 |
| 2.5.1 试验犬感染成虫的检出率 | 第22页 |
| 2.5.2 家兔感染豆状囊尾蚴的检出率 | 第22页 |
| 2.6 保存不同天数的虫卵对家兔感染率的影响 | 第22-23页 |
| 3 讨论 | 第23-24页 |
| 第三章 TPO18重组蛋白大量制备及其抗原性分析 | 第24-33页 |
| 1 材料与方法 | 第24-29页 |
| 1.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 1.1.1 菌种、试剂及动物 | 第24页 |
| 1.1.2 仪器与设备 | 第24-25页 |
| 1.1.3 溶液的配制 | 第25-26页 |
| 1.1.4 培养基 | 第26页 |
| 1.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 1.2.1 重组质粒的诱导表达 | 第26页 |
| 1.2.2 可溶性蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| 1.2.3 表达产物的检测 | 第27-28页 |
| 1.2.4 动物免疫及多抗制备 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-31页 |
| 2.1 GST-TPO18的纯化 | 第29页 |
| 2.2 表达产物的检测 | 第29页 |
| 2.3 蛋白反应原性的分析 | 第29页 |
| 2.4 多克隆抗体的鉴定 | 第29-31页 |
| 2.4.1 间接ELISA检测滴度 | 第29-30页 |
| 2.4.2 Western-blot鉴定 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 3.1 关于蛋白纯化与表达条件 | 第31页 |
| 3.2 关于多克隆抗体的制备 | 第31-33页 |
| 第四章 TPO18抗原单克隆抗体的制备与鉴定 | 第33-47页 |
| 1 材料与方法 | 第33-38页 |
| 1.1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1.1 细胞、小鼠及抗原 | 第33页 |
| 1.1.2 试剂 | 第33-34页 |
| 1.1.3 仪器与设备 | 第34页 |
| 1.1.4 溶液的配制 | 第34页 |
| 1.2 方法 | 第34-38页 |
| 1.2.1 BALB/c小鼠的免疫程序及方法 | 第34-35页 |
| 1.2.2 小鼠抗TPO18抗原阳性、阴性血清的制备 | 第35页 |
| 1.2.3 间接ELISA法确定血清与酶最佳工作浓度 | 第35页 |
| 1.2.4 间接ELISA检测免疫小鼠血清效价 | 第35页 |
| 1.2.5 骨髓瘤细胞的培养 | 第35-36页 |
| 1.2.6 饲养细胞的制备 | 第36页 |
| 1.2.7 免疫脾细胞的制备 | 第36页 |
| 1.2.8 细胞融合 | 第36页 |
| 1.2.9 融合细胞的观察和换液 | 第36页 |
| 1.2.10 杂交瘤抗体的检测与TPO18杂交瘤细胞的筛选 | 第36-37页 |
| 1.2.11 杂交瘤细胞的克隆化（有限稀释法） | 第37页 |
| 1.2.12 细胞计数 | 第37页 |
| 1.2.13 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第37-38页 |
| 1.2.14 单克隆抗体的大量制备与初步纯化 | 第38页 |
| 1.2.15 单克隆抗体类/亚类/亚型的鉴定 | 第38页 |
| 1.2.16 单克隆抗体特性的鉴定 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-43页 |
| 2.1 血清和酶的方阵实验结果 | 第38页 |
| 2.2 第三次免疫后BALB/c小鼠血清ELISA检测结果 | 第38-39页 |
| 2.3 融合细胞的观察 | 第39-40页 |
| 2.4 杂交瘤抗体的检测 | 第40页 |
| 2.5 亚克隆和单克隆细胞株ELISA检测结果 | 第40-41页 |
| 2.6 腹水效价的检测 | 第41-42页 |
| 2.7 单克隆抗体亚型测定 | 第42页 |
| 2.8 腹水热稳定性的分析 | 第42页 |
| 2.9 单克隆抗体的Western-blot检测 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-47页 |
| 3.1 关于动物选择与免疫方案 | 第43页 |
| 3.2 关于细胞融合 | 第43-44页 |
| 3.3 关于细胞筛选 | 第44-45页 |
| 3.4 关于亚克隆与细胞冻存 | 第45页 |
| 3.5 关于腹水的制备与纯化 | 第45页 |
| 3.6 单克隆抗体稳定性分析 | 第45页 |
| 3.7 单克隆抗体的应用 | 第45-47页 |
| 第五章 TPO18抗原组织定位研究 | 第47-52页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| 1.1 试剂与虫体 | 第47页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第47页 |
| 1.3 抗兔豆状带绦虫的多克隆抗体和单克隆抗体 | 第47页 |
| 1.4 溶液配制 | 第47页 |
| 1.5 方法 | 第47-49页 |
| 1.5.1 石蜡切片的制备与免疫组化 | 第47-49页 |
| 2 结果 | 第49-50页 |
| 2.1 囊尾蚴抗原定位 | 第49-50页 |
| 2.2 带绦虫抗原定位 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 3.1 关于研究方法 | 第50-51页 |
| 3.2 关于抗原定位 | 第51-52页 |
| 第六章 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 导师简介 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
