| 致谢 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第15-63页 |
| 1.1 数字PCR技术 | 第17-34页 |
| 1.1.1 数字PCR技术原理 | 第17-20页 |
| 1.1.2 单分子扩增的理论分析 | 第20-22页 |
| 1.1.3 数字PCR的分类 | 第22-27页 |
| 1.1.3.1 孔板或微反应室数字PCR | 第22页 |
| 1.1.3.2 大规模集成流路(IFC)数字PCR | 第22-24页 |
| 1.1.3.3 液滴数字PCR | 第24-27页 |
| 1.1.4 数字PCR的应用 | 第27-32页 |
| 1.1.4.1 癌症早期诊断 | 第27-28页 |
| 1.1.4.2 产前诊断 | 第28-29页 |
| 1.1.4.3 单细胞基因表达的定量 | 第29-30页 |
| 1.1.4.4 在下一代测序上的应用 | 第30页 |
| 1.1.4.5 环境微生物的检测 | 第30-31页 |
| 1.1.4.6 转基因植物的检测 | 第31-32页 |
| 1.1.5 数字PCR仪器发展现状 | 第32-34页 |
| 1.2 环介导等温扩增(LAMP)方法 | 第34-41页 |
| 1.2.1 环介导等温扩增(LAMP)的原理 | 第34-37页 |
| 1.2.2 环介导等温扩增(LAMP)特点、优势 | 第37-38页 |
| 1.2.3 数字环介导等温扩增(LAMP)方法 | 第38-41页 |
| 1.2.3.1 基于样品自数字化芯片的数字LAMP | 第38-40页 |
| 1.2.3.2 基于滑动芯片的数字RT-LAMP | 第40-41页 |
| 1.3 基于PDMS的无动力进样方法 | 第41-44页 |
| 1.3.1 基于PDMS的无动力进样方法原理 | 第41-42页 |
| 1.3.2 基于PDMS的无动力进样方法的应用 | 第42-44页 |
| 1.4 数字ELISA方法检测单分子蛋白质 | 第44-45页 |
| 1.5 本论文的研究概述 | 第45-49页 |
| 1.5.1 本论文的研究思路 | 第45-47页 |
| 1.5.2 本论文的主要创新点和待改进之处 | 第47-49页 |
| 1.6 结论与展望 | 第49-50页 |
| 1.7 参考文献 | 第50-63页 |
| 第二章 基于气动微阀的集成流路数字PCR芯片的研制 | 第63-81页 |
| 2.1 引言 | 第63-64页 |
| 2.2 实验部分 | 第64-70页 |
| 2.2.1 试剂 | 第64-65页 |
| 2.2.2 仪器与装置 | 第65页 |
| 2.2.3 数字PCR芯片的制作 | 第65-69页 |
| 2.2.3.1 集成流路数字PCR芯片的设计 | 第65-66页 |
| 2.2.3.2 芯片掩模版设计与制作 | 第66页 |
| 2.2.3.3 芯片模具的制作 | 第66-68页 |
| 2.2.3.4 芯片的制作 | 第68-69页 |
| 2.2.4 实验操作 | 第69-70页 |
| 2.2.4.1 样品准备 | 第69页 |
| 2.2.4.2 数字PCR反应(digital PCR) | 第69-70页 |
| 2.2.5 图像获取与数据分析 | 第70页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第70-77页 |
| 2.3.1 集成流路数字PCR芯片的制作 | 第70-71页 |
| 2.3.2 气动微阀关闭的关键 | 第71页 |
| 2.3.3 气动微阀开关气压的测试 | 第71-73页 |
| 2.3.4 数字PCR检测结果及讨论 | 第73-77页 |
| 2.4 结论与展望 | 第77-78页 |
| 2.5 参考文献 | 第78-81页 |
| 第三章 自吸分液式数字LAMP芯片的研制及其应用 | 第81-107页 |
| 3.1 引言 | 第81-82页 |
| 3.2 实验部分 | 第82-93页 |
| 3.2.1 试剂 | 第82-83页 |
| 3.2.2 仪器与装置 | 第83-84页 |
| 3.2.3 自吸分液式数字LAMP芯片的制作 | 第84-88页 |
| 3.2.3.1 无动力、无阀门自吸分液式数字LAMP芯片的设计 | 第84-85页 |
| 3.2.3.2 芯片掩模版设计与制作 | 第85页 |
| 3.2.3.3 芯片模具的制作 | 第85-86页 |
| 3.2.3.4 芯片的制作 | 第86-88页 |
| 3.2.4 实验操作 | 第88-93页 |
| 3.2.4.1 样品准备 | 第88-89页 |
| 3.2.4.2 LAMP引物设计 | 第89页 |
| 3.2.4.3 芯片的操作原理 | 第89-91页 |
| 3.2.4.4 实时荧光定量PCR检测 | 第91页 |
| 3.2.4.5 数字环介导等温扩增反应(digital LAMP) | 第91-93页 |
| 3.2.5 数据检测与分析 | 第93页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第93-100页 |
| 3.3.1 无动力、无阀门、自吸式数字LAMP芯片的操作 | 第93-95页 |
| 3.3.2 芯片样品分配的均一性分析 | 第95-96页 |
| 3.3.3 数字LAMP反应阳性孔的阈值确定 | 第96页 |
| 3.3.4 实时荧光定量PCR结果 | 第96-98页 |
| 3.3.5 无动力、无阀门、自吸式数字LAMP | 第98-100页 |
| 3.4 结论与展望 | 第100-102页 |
| 3.5 参考文献 | 第102-107页 |
| 第四章 超百万集成度自吸分液式数字LAMP芯片系统 | 第107-133页 |
| 4.1 引言 | 第107-108页 |
| 4.2 实验部分 | 第108-117页 |
| 4.2.1 试剂与材料 | 第108-109页 |
| 4.2.2 仪器与装置 | 第109页 |
| 4.2.3 超百万集成度自吸分液式数字LAMP芯片的制作 | 第109-113页 |
| 4.2.3.1 无动力、无阀门超百万集成度自吸分液式数字LAMP芯片的设计 | 第109-111页 |
| 4.2.3.2 芯片掩模版设计与制作 | 第111页 |
| 4.2.3.3 芯片模具的制作 | 第111-112页 |
| 4.2.3.4 芯片的制作 | 第112-113页 |
| 4.2.4 实验操作 | 第113-117页 |
| 4.2.4.1 样品准备 | 第113-114页 |
| 4.2.4.2 LAMP引物设计 | 第114页 |
| 4.2.4.3 常规环介导等温扩增反应 | 第114-115页 |
| 4.2.4.4 实时荧光定量PCR检测 | 第115-116页 |
| 4.2.4.5 数字环介导等温扩增反应(digital LAMP) | 第116-117页 |
| 4.2.5 数据检测与分析 | 第117页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第117-127页 |
| 4.3.1 无动力、无阀门、超百万集成度自吸分液式数字LAMP芯片的制作 | 第117-120页 |
| 4.3.2 HBV样本LAMP反应条件优化 | 第120-122页 |
| 4.3.3 数字LAMP反应阳性孔的判定 | 第122页 |
| 4.3.4 实时荧光定量PCR结果 | 第122-124页 |
| 4.3.5 无动力、无阀门、超百万集成度自吸式数字LAMP | 第124-127页 |
| 4.4 结论与展望 | 第127-129页 |
| 4.5 参考文献 | 第129-133页 |
| 第五章 自吸分液式数字PCR集成流路芯片的研究及其应用 | 第133-165页 |
| 5.1 引言 | 第133-134页 |
| 5.2 实验部分 | 第134-145页 |
| 5.2.1 试剂 | 第134-135页 |
| 5.2.2 仪器与装置 | 第135-136页 |
| 5.2.3 自吸分液式数字PCR芯片的制作 | 第136-141页 |
| 5.2.3.1 无动力、无阀门自吸分液式数字PCR芯片的设计 | 第136-137页 |
| 5.2.3.2 芯片的操作原理 | 第137-138页 |
| 5.2.3.3 芯片掩模版设计与制作 | 第138页 |
| 5.2.3.4 芯片模具的制作 | 第138-140页 |
| 5.2.3.5 芯片的制作 | 第140-141页 |
| 5.2.4 实验操作 | 第141-145页 |
| 5.2.4.1 样品准备 | 第141-142页 |
| 5.2.4.2 PCR引物序列设计 | 第142-143页 |
| 5.2.4.3 实时荧光定量PCR检测 | 第143-144页 |
| 5.2.4.4 数字PCR反应(digital PCR) | 第144-145页 |
| 5.2.5 数据检测与分析 | 第145页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第145-157页 |
| 5.3.1 无动力、无阀门、自吸分液式数字PCR芯片的操作 | 第145-147页 |
| 5.3.2 纳米防水层的制备及其防水效果测定 | 第147-148页 |
| 5.3.3 自吸分液式数字PCR结果的统计理论分析 | 第148-152页 |
| 5.3.4 自吸分液式数字PCR扩增结果 | 第152-155页 |
| 5.3.5 自吸分液式数字PCR检测不确定性分析 | 第155-156页 |
| 5.3.6 自吸分液式数字PCR芯片自吸能力的测定 | 第156-157页 |
| 5.4 结论与展望 | 第157-159页 |
| 5.5 参考文献 | 第159-165页 |
| 第六章 数字亲和连接反应(digital PLA)检测单分子蛋白质 | 第165-185页 |
| 6.1 引言 | 第165-166页 |
| 6.2 TaqMan蛋白分析技术的原理 | 第166-168页 |
| 6.3 实验部分 | 第168-175页 |
| 6.3.1 试剂 | 第168-169页 |
| 6.3.2 仪器与装置 | 第169页 |
| 6.3.3 实验操作 | 第169-175页 |
| 6.3.3.1 制作自吸分液式数字PCR芯片 | 第169页 |
| 6.3.3.2 Taqman蛋白实时荧光定量PCR的基本操作步骤 | 第169-174页 |
| 6.3.3.3 数字Proximity ligation assays(digital PLA)检测单个蛋白质分子 | 第174-175页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第175-179页 |
| 6.4.1 Taqman蛋白实时荧光定量PCR | 第175-176页 |
| 6.4.2 数字Proximity ligation assays(digital PLA)检测单个蛋白质分子 | 第176-179页 |
| 6.5 结论与展望 | 第179-181页 |
| 6.6 参考文献 | 第181-185页 |
| 作者简历 | 第185-187页 |
| 攻读博士学位期间所取得的科研成果 | 第187-188页 |
